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美洲大蠊提取物诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡及作用机制的初步研究

作　者: 董京千
导　师: 伟忠民
学　校: 辽宁医学院
专　业: 药物分析学
关键词: 美洲大蠊人肝癌细胞SMMC-7721 凋亡线粒体途径作用机制
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的通过观察美洲大蠊提取物对人肝癌细胞SMMC-7721的影响，探讨美洲大蠊提取物对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制增殖和诱导凋亡作用，并初步研究其作用机制，为美洲大蠊的进一步开发、实验研究与临床应用提供理论依据。方法采用MTT比色法检测美洲大蠊提取物对人肝癌细胞SMMC-7721增殖抑制影响；流式细胞仪法分析美洲大蠊提取物对人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的影响；分光光度法检测凋亡过程中Caspase-3、Caspase-9蛋白活性的变化；JC^-1染色法检测细胞线粒体膜电位变化；蛋白质印迹法检测凋亡时蛋白Bax、Bcl-2的活性表达情况。结果不同浓度美洲大蠊提取物(12.5μg·mL^-1，25μg·mL^-1，50μg·mL^-1，100μg·mL^-1，200μg·mL^-1)作用人肝癌细胞SMMC-7721，24h、48h和72h的IC50分别为148.9μg·mL^-1、85.6μg·mL^-1、37.2μg·mL^-1，实验组细胞抑制率明显高于阴性对照组，并呈现时间–剂量依赖关系（P＜0.05）。低中高浓度美洲大蠊提取物(50μg·mL^-1，100μg·mL^-1，200μg·mL^-1)作用细胞24h后细胞凋亡率分别为（12.34±0.98）%、（18.67±1.23）%、（26.38±1.14）%，凋亡率明显高于阴性对照组，呈现剂量依赖性（P＜0.01）。在细胞凋亡过程中线粒体膜电位不断下降，Caspase-3、Caspase-9活性逐渐升高（P＜0.05）。蛋白质印迹法显示Bax活性表达升高，Bcl-2活性表达减弱，Bax/Bcl-2比值升高。结论美洲大蠊提取物具有抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖并诱导其凋亡作用，通过升高Bax活性和降低Bcl-2活性而激活效应因子Caspase级联反应。线粒体途径可能是美洲大蠊提取物诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的主要机制之一。

全文目录

中文论著摘要  5-7
英文论著摘要  7-9
英文缩略语表  9-10
前言  10-12
第一章美洲大蠊提取物对人肝癌细胞 SMMC-7721 增殖及凋亡的影响  12-22
  实验材料与方法  12-16
  实验结果  16-18
  讨论  18-21
  小结  21-22
第二章美洲大蠊提取物诱导人肝癌细胞 SMMC-7721 凋亡作用机制的初步探讨  22-33
  实验材料与方法  22-26
  实验结果  26-29
  讨论  29-32
  结论  32-33
本研究创新性的自我评价  33-34
参考文献  34-38
综述  38-48
  参考文献  43-48
在学习期间科研成绩  48-49
致谢  49-50
个人简介  50-51

美洲大蠊提取物诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡及作用机制的初步研究

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