学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

以LSC为靶标的复方浙贝颗粒抗AML临床研究

作　者: 赖宗浪
导　师: 李冬云
学　校: 北京中医药大学
专　业: 中西医结合临床
关键词: 白血病干细胞 分子标记物 复方浙贝颗粒 急性髓系白血病
分类号: R733.71
类　型: 博士论文
年　份: 2014年
下　载: 3次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


本文由两部分组成,通过两篇文献综述回顾了白血病干细胞(leukemia stem cell,LSC)具有自我更新和无限增殖潜能,是造成白血病发生发展的根源。而且LSC处于静止期,对化疗药物不敏感,易产生对多种化疗药物的交叉耐药,一般细胞周期化疗药物很难对其发挥杀伤效果。加之LSC集中于药物难以达到的骨髓区域以及具有天然耐药特性,正好逃逸了抗癌药物的攻击,为急性白血病复发潜伏了祸根。当多数白血病患者处于临床完全缓解状态时,体内仍残留包括LSC在内的微小残留病灶会重新活跃进入细胞分裂周期,并很快自我更新,无限增殖,造成急性白血病复发。临床观察还发现,部分难治性急性白血病患者一旦使用化疗既会出现严重的骨髓抑制,但停药后外周血或骨髓却很快显现大量的白血病细胞,且具有耐药相关蛋白高表达特征,支持LSC具有高度增殖潜能与多药耐药的生物学特征。因此针对LSC源头上的靶向干预治疗是克服白血病多药耐药最有效途径。我们前期研究发现,复方浙贝颗粒联合化疗能够提高难治性急性白血病患者临床缓解率,效应机制与诱导细胞凋亡、降低膜耐药蛋白高表达、调节酶异常变化相关,但均以白血病细胞为靶标,是否能针对LSC起到逆转耐药效应缺乏深入研究。临床研究主要为：1.研究目的通过观察复方浙贝颗粒联合化疗对难治性急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)患者骨髓LSC表面分子标志物的影响及难治性AML患者白血病细胞PI3K/Akt/mTOR信号通路和NF-κB信号通路中相关分子标记物(PI3K、mTOR、PTEN、 NF-κB)与骨髓周围微环境相互作用的细胞表面标记物CD44表达变化,试图明确复方浙贝颗粒逆转多药耐药效应靶点。2.研究方法全部病例资料来自北京中医药大学东直门医院血液肿瘤科,北京大学人民医院血液科,廊坊市中医医院血液科于2011年12月至2013年8月观察的难治性AML患者。治疗采用化疗方案有HAE, MA, CAG, AA, EA, FLAG等,复方浙贝颗粒(浙贝母12克,川芎9克,防已9克)由北京康仁堂药业有限公司制成中药配方颗粒,于化疗前3天开始服用复方浙贝颗粒,每次1袋,每日2次,共服用14天,21天为一疗程。以流式细胞术分别检测骨髓有核细胞中LSC表面分子标志物(CD34+CD123+、 CD33+CD123+)细胞表达比例。有30例患者完成治疗前后对照,分别检测了2次LSC表达比例；另外23例患者仅检测了1次LSC表达比例。20例次在北京中医药大学东直门医院血液肿瘤科住院的难治性AML患者行骨髓活检术采集组织标本,以免疫组化技术检测了CD44、PI3K、mTOR、PTEN、NF-κB表达情况。3.研究结果①难治AML中CD34+与CD33+CD123+细胞比例分别为11.78%、12.86%,两者相关性分析显示相关系数为0.953,两者具有明显相关性(p<0.001)。②按诊疗标准分类将难治性AML分为两组,其中处于缓解状态时患者的LSC表达比例分别为0.66%,0.92%,较处于复发状态时LSC比例(20.73%,22.47%)明显降低,差异具有统计学意义(p<0.001)。③30例完成前后治疗对照的难治性AML患者治疗后LSC表面分子标志物细胞表达比例(5.49%,5.94%)较治疗前明显降低(17.05%,17.71%),差异有统计学意义(p<0.05)。其中25例处于复发状态时完成治疗前后对照的患者进一步分析发现,治疗后LSC比例(6.82%,7.39%)也较治疗前LSC比例(21.74%,22.48%)明显降低,差异有统计学意义(p<0.01)。治疗后达到完全缓解有10例患者(有效率40%),且LSC表面分子标志物细胞表达比例分别为1.50%,1.65%,较未缓解患者明显下降(11.65%,12.61%),差异具有统计学意义(p<0.01)。④20例取骨髓活检患者中9例处于完全缓解的白血病细胞相关分子标记物CD44、PI3K、mTOR.PTEN.NF-κB阳性细胞表达率分别为22.2%、0%、33.3%、33.3%、77.8%,与11例未缓解的63.6%、0%、18.2%、63.6%、90.9%相比,CD44表达差异有统计学意义(p<0.05),阳性表达强度也提示CD44表达在两组间有统计学差异。完全缓解的白血病细胞相关分子标记物CD44.PI3K.mTOR.PTEN.NFκB平均光密度分别为441.78、217.28、393.58、91.16、642.66,与未缓解的840.06、316.21、223.00、292.51、775.35相比,CD44表达差异有统计学意义(p<0.05)。4.研究结论①CD34’CD123+与CD33+CD123+细胞具有显著相关,可以用来定位LSC。②LSC比例可以反映急性白血病患者是否处于持续缓解状态。③复方浙贝颗粒是通过降低LSC表面分子标记物CD123、CD33表达比例,提高了难治性AML化疗缓解率。④白血病细胞中CD44高表达可作为难治性AML预后判定的重要参考指标,PI3K/Akt/mTOR信号通路和NF-κB信号通路在白血病细胞中的作用需要进一步研究。

全文目录


中文摘要  4-6
Abstract  6-9
英文缩略词  9-12
文献综述  12-46
  综述一 白血病干细胞研究概述  12-34
    1 白血病干细胞的发现  12-13
    2 白血病干细胞的起源  13-16
    3 白血病干细胞特征  16-21
    4 针对白血病干细胞的靶向治疗  21-26
    参考文献  26-34
  综述二 中药逆转白血病多药耐药研究  34-46
    1 白血病多药耐药机制及治疗措施  34-35
    2 白血病干细胞多药耐药机制  35-37
    3 中药逆转白血病多药耐药  37-41
    4 浙贝颗粒逆转白血病多药耐药研究  41
    参考文献  41-46
临床研究  46-66
  第一部分 复方浙贝颗粒联合化疗对AML干细胞影响的临床观察  46-60
    前言  46
    临床资料  46-47
    诊疗标准  47-48
    结果  48-55
    讨论  55-60
  第二部分 急性髓系白血病患者骨髓细胞相关分子标志物表达研究  60-66
    前言  60
    临床资料  60-62
    诊疗标准  62
    结果  62-63
    讨论  63-66
参考文献  66-69
致谢  69-70
个人简历  70-71
附录：免疫组化实验结果彩图  71-73

相似论文

  1. 急性髓系白血病中MT1FmRNA与VEGFmRNA的表达研究,R733.71
  2. 血清胸苷激酶1与急性髓系白血病的相关性分析,R733.71
  3. 辛伐他汀对急性髓系白血病细胞WT1/hDMP1基因表达的影响,R733.71
  4. AML1-ETO9a异构体在伴t（8；21）AML-M2中的临床意义与相关性研究,R733.7
  5. WT1基因表达与突变在儿童急性髓细胞白血病预后中的意义,R733.71
  6. TET2基因突变及SNP rs2454206在急性髓系白血病中的研究,R733.71
  7. 血清miRNA定量方法的建立及其在肝相关疾病诊断中的应用,R440
  8. 通过急性髓性白血病干细胞表面CD123导入携带IL-24基因溶瘤腺病毒的实验研究,R733.7
  9. 急性白血病患者造血干细胞CD96分子表达的初步研究,R733.7
  10. 胰岛素样生长因子Ⅰ受体SUMOylation在急性髓系白血病的表达及意义,R733.71
  11. 40例老年急性髓系白血病治疗总结,R733.71
  12. 滋肾生血胶囊在急性髓系白血病巩固化疗中作用机制的研究,R733.7
  13. Treg细胞在急性髓系白血病中的表达及其临床意义,R733.7
  14. 荧光定量PCR联合检测初治急性髓系白血病患者MDR1和BAALC基因的表达水平及其临床意义,R733.7
  15. 急性髓系白血病免疫表型与预后关系的研究,R733.71
  16. 白血病干细胞介导的白血病耐药性及小白菊内酯的干预作用,R285
  17. 肝细胞癌中WIF-1基因甲基化及其表达的研究,R735.7
  18. 去甲氧柔红霉素联合阿糖胞苷治疗初治急性髓系白血病临床分析,R733.7
  19. 复方浙贝颗粒辅助化疗对RAL患者KPS评分与症状影响的临床观察,R733.71
  20. 复方浙贝颗粒改善难治性急性白血病症状与体征的临床观察,R733.71
  21. 血细胞中HMOX-1基因变化预测诊断DVT的实验研究,R654.3

中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 造血器及淋巴系肿瘤 > 白血病 > 急性白血病
© 2012 www.xueweilunwen.com