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EPHA10基因的差别表达在肿瘤恶性表型转变中的作用研究

作 者: 李夜
导 师: 马丁
学 校: 华中科技大学
专 业: 妇产科学
关键词: EPHA10 乳腺癌 肿瘤 侵袭转移
分类号: R730.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
下 载: 4次
引 用: 0次
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内容摘要


目的EphA10普遍认为在正常乳腺腺体组织中低表达,但其表达情况是否参与乳腺癌的发生以及淋巴转移尚不清楚。本研究通过对比观察正常和癌变组织中EphA10的表达区别,以及在乳腺细胞系中调节其表达情况来探讨EphA10基因在乳腺癌恶性化表型转变的作用。方法1).免疫组化检测EphA10在乳腺良性病变,浸润性导管癌和与其配对的一级淋巴结转移灶中的表达情况;2).通过实时定量PCR仪筛查乳腺细胞系中EphA10的两条剪切变异体(EphA10,EphA10s)在mRNA水平的表达情况;3).设计并构建针对两条剪切变异体质粒;4).通过使用EphA10SiRNA和pEGFP-T2A-EphA10s对MDA-MB-231细胞进行转染从而干扰EphA10基因的表达情况,对比相应的对照转染细胞在western-blot水平上验证;5).通过流式细胞仪检测转染后的细胞,对比对照细胞在细胞增殖和凋亡水平上的变化;6).通过细胞划痕实验,transwell实验以及细胞免疫荧光验证处理后的细胞在侵袭和转移能力上的改变。结果1).在乳腺癌良性病变,癌症组织和与其相对应的淋巴结转移灶EphA10的表达依次递增;2).细胞水平上呈现明显EphA10和EphA10s的表达区别如MS-MAB-231的EphA10的mRNA水平高而EphA10s的mRNA水平低;3).通过转染了EphA10SiRNA和pEGFP-T2A-EphA10s后均发现细胞的侵袭和转移能力下降,在抑制了EphA10的表达后侵袭转移能力下降等明显,并且两种剪切变异的作用并不相互影响;4).干扰EphA10基因表的细胞系在增值和凋亡水平没有明显改变。结论EphA10基因在癌症组织中是高表达的,并且当其发生淋巴转移后表达水平加强;高表达EphA10的细胞在抑制其表达水平后转移和侵袭能力明显下降;而低表达EphA10s的细胞在提高其表达水平后,转移和侵袭能力也能有所降低。

全文目录


第一部分 EPHA10 基因的差别表达在恶性化表型转变中作用研究  5-43
  中文摘要  5-6
  Abstract  6-7
  简介  7-9
  实验材料与方法  9-28
  实验结果  28-38
  讨论  38-41
  参考文献  41-43
第二部分 综述 EPH 家族和癌症  43-54
  Eph 家族  43-44
  Eph 受体与 Ephrin 配体的相互作用参与组织的恶性化转变  44
  EphB和结肠直肠癌  44-45
  乳腺癌和 Eph  45-46
  皮肤癌和 Eph-Ephrin  46-47
  Eph家族的突变和前列腺癌  47
  肺癌和Eph家族成员的表达变化  47-48
  肿瘤新生脉管系统与Eph-Ephrin  48
  结语  48-50
  参考文献  50-54
致谢  54-56

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 一般性问题 > 肿瘤病理学、病因学
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