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圣脑康丸对大鼠脑缺血—再灌注损伤的保护及降压作用研究

作　者: 陈琳
导　师: 赵晔
学　校: 西北大学
专　业: 中药学
关键词: 圣脑康丸脑缺血/再灌注氧化应激凋亡降压耐缺氧
分类号: R743.31
类　型: 硕士论文
年　份: 2014年
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内容摘要

脑缺血／再灌注损伤及高血压均是常见的心脑血管疾病,中药复方从多靶点、多向调节出发对心脑血管疾病起保护作用。圣脑康丸(SNKP)由丹参、川芎等15味中药组成,具有活血化瘀、凉血降压等功效,临床用于急、慢性心脑血管病的治疗,目前尚未有SNKP对脑缺血/再灌注损伤保护及降压的实验研究报道。本实验采用HPLC法同时测定了SNKP中丹参素、原儿茶醛、芍药苷、葛根素、阿魏酸、丹参酮ⅡA6种有效成分的含量,甲醇-0.25%冰醋酸水溶液为流动相梯度洗脱,检测波长为280nm,方法简便、准确、灵敏。采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤模型和小鼠常压耐缺氧实验,研究了SNKP对脑缺血缺氧的保护作用。通过大鼠神经功能评分、TIC染色、H&E染色法等方法进行综合评价;同时测定大鼠血清或组织中MDA、SOD、GSH-Px、iNOS、Caspase-3等相关指标活性,观察小鼠常压耐缺氧时间,结果表明SNKP能明显改善神经功能障碍,减少大脑梗死体积,增加存活的神经元数量,降低MDA含量,增强SOD、GSH-Px活性,降低iNOS及TNOS活性,减少Caspase-3活性细胞数目。说明SNKP对脑缺血／再灌注损伤有保护作用,其保护机制可能与其抗氧化、抗凋亡与降低iNOS和TNOS活性等有关。SNKP能有效提高常压下及异丙肾上腺素联合给药的耐缺氧时间,具有明显的耐缺氧作用。利用自发性高血压大鼠研究了SNKP的降压作用。采用无创血压测量分析系统测量血压及心率,采用全自动生化分析仪测定血脂、肾功能等相关的生化指标,并测量了各脏器指数、左心室指数等,结果表明SNKP能有效平稳的降低血压,调节心率,降低左心室指数,改善肾功、血脂等生化指标,恢复对主要器官(心、脑、肾等)的损伤。因此,SNKP对大鼠脑缺血／再灌注损伤有保护作用,对自发性高血压大鼠有降压作用,并能有效延长小鼠的常压耐缺氧时间,为心脑血管疾病的治疗提供了理论基础。

全文目录

中文摘要  3-4
Abstract  4-10
第一章绪论  10-17
  1.1 引言  10
  1.2 脑缺血/再灌注损伤研究概况  10-12
    1.2.1 脑缺血/再灌注损伤的发病机制  10-12
    1.2.2 脑缺血/再灌注损伤模型  12
    1.2.3 中医药在脑缺血/再灌注损伤的作用进展  12
  1.3 原发性性高血压研究概况  12-14
    1.3.1 高血压靶器官损害  13
    1.3.2 原发性高血压模型  13-14
    1.3.3 中医药的降压作用进展  14
  1.4 圣脑康丸的研究概况  14-15
    1.4.1 圣脑康丸的组成及其有效成分  14-15
    1.4.2 圣脑康丸的药理作用  15
  1.5 研究意义及创新性  15-17
    1.5.1 研究意义  15-16
    1.5.2 实验特色及创新性  16-17
第二章圣脑康丸中6种有效成分的含量测定  17-23
  2.1 前言  17
  2.2 实验材料及仪器  17-18
    2.2.1 实验材料  17
    2.2.2 实验仪器  17-18
  2.3 方法和结果  18-22
    2.3.1 供试品溶液的制备  18
    2.3.2 对照品储备液的配制  18
    2.3.3 色谱条件  18
    2.3.4 专属性试验  18-19
    2.3.5 线性关系考察  19-20
    2.3.6 稳定性试验  20
    2.3.7 加样回收试验和精密度试验  20-21
    2.3.8 样品的测定  21-22
  2.4 讨论  22-23
    2.4.1 圣脑康丸供试品的制备  22
    2.4.2 流动相选择  22
    2.4.3 检测波长选择  22-23
第三章圣脑康丸对脑缺血/再灌注损伤的实验研究  23-36
  3.1 前言  23
  3.2 材料及仪器  23-24
    3.2.1 实验动物  23-24
    3.2.2 药材及试剂  24
    3.2.3 实验仪器  24
  3.3 实验方法  24-26
    3.3.1 分组和给药  24
    3.3.2 制作局灶性脑缺血/再灌注损伤模型  24-25
    3.3.3 神经功能障碍评分  25
    3.3.4 脑梗死体积测定  25
    3.3.5 血清中生化指标测定  25
    3.3.6 脑组织病理结构观察  25
    3.3.7 免疫组织化学染色  25-26
    3.3.8 统计分析  26
  3.4 结果  26-34
    3.4.1 圣脑康丸对神经功能的影响  26-27
    3.4.2 圣脑康丸对脑梗死体积的影响  27-28
    3.4.3 圣脑康丸对MDA、SOD和GSH-Px含量的影响  28-29
    3.4.4 圣脑康丸对NOS和TNOS活力的影响  29-30
    3.4.5 圣脑康丸对神经细胞组织结构的影响  30-32
    3.4.6 圣脑康丸对Caspase-3阳性免疫反应结果的影响  32-34
  3.5 讨论  34-36
第四章圣脑康丸对SHR的降压作用研究  36-52
  4.1 前言  36-37
  4.2 材料及仪器  37
    4.2.1 实验动物  37
    4.2.2 实验药材  37
    4.2.3 实验仪器  37
  4.3 实验方法  37-39
    4.3.1 动物分组  37
    4.3.2 圣脑康丸对SHR的降压作用实验  37-38
    4.3.3 圣脑康丸对SHR血脂代谢的影响  38
    4.3.4 圣脑康丸对SHR凝血功能的影响  38
    4.3.5 圣脑康丸对SHR血清离子的影响  38
    4.3.6 圣脑康丸对SHR左心室指数的影响  38
    4.3.7 脏器组织标本的采集和测定  38
    4.3.8 圣脑康丸对SHR肾功能的影响  38
    4.3.9 统计分析  38-39
  4.4 实验结果  39-49
    4.4.1 大鼠的一般指标  39
    4.4.2 圣脑康丸对SHR的降压作用实验  39-43
    4.4.3 圣脑康丸对SHR血脂代谢的影响  43-44
    4.4.4 圣脑康丸对SHR凝血功能的影响  44-45
    4.4.5 圣脑康丸对SHR血清离子的影响  45-46
    4.4.6 圣脑康丸对SHR心室指数的影响  46-48
    4.4.7 圣脑康丸对SHR对脏器重量指数的影响  48
    4.4.8 圣脑康丸对SHR肾功能的影响  48-49
  4.5 讨论  49-52
第五章圣脑康丸的耐缺氧实验研究  52-56
  5.1 前言  52
  5.2 实验材料  52
    5.2.1 实验动物  52
    5.2.2 药材及试剂  52
    5.2.3 实验器材  52
  5.3 实验方法  52-53
    5.3.1 常压耐缺氧实验  52-53
    5.3.2 异丙肾上腺素复合药物耐缺氧实验  53
    5.3.3 数据统计  53
  5.4 实验结果  53-55
    5.4.1 小鼠常压耐缺氧实验  53-54
    5.4.2 异丙肾上腺素复合药物耐缺氧实验  54-55
  5.5 讨论  55-56
结论  56-57
参考文献  57-64
攻读硕士学位期间取得的科研成果  64-65
致谢  65

圣脑康丸对大鼠脑缺血—再灌注损伤的保护及降压作用研究

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