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姜黄素上调miR-124抑制人骨肉瘤细胞MG-63增殖和侵袭的机制研究

作 者: 唐志斌
导 师: 廖瑛
学 校: 南华大学
专 业: 外科学
关键词: 姜黄素 miR-124 SPHK1 人骨肉瘤细胞MG-63
分类号: R738.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
下 载: 7次
引 用: 0次
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内容摘要


目的:研究姜黄素调控的miR-124(Homo sapiens miR-124)改变在抑制人骨肉瘤细胞MG-63增殖和侵袭中发挥的作用及其机制。方法:通过qRT-PCR的方法,分别检测人骨肉瘤细胞株MG-63(姜黄素处理组和DMSO对照组)中miR-124的表达水平;采用MTT、细胞划痕实验等研究姜黄素调控的miR-124抑制人骨肉瘤细胞MG-63的生长增殖能力;运用蛋白质印迹技术(Western blot)和荧光素酶报告基因方法研究miR-124直接调控的靶基因。结果:MTT结果显示,与DMSO对照组细胞相比,姜黄素处理组的人骨肉瘤细胞MG-63的增殖能力明显受到抑制,抑制效应呈剂量依赖关系。qRT-PCR结果发现,姜黄素处理组中的miR-124表达量较DMSO对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);转染miR-124mimics12h、24h和48h后,细胞株的生长明显受到了抑制(抑制率分别为47.9%,58.5%和67.1%),差异均有统计学意义(P<0.05),并具有时间依赖性;细胞划痕实验显示,转染miR-124mimics24h后伤口愈合率明显减缓,差异有统计学意义(P<0.05);荧光素酶报告基因检测结果证实了SPHK1(Sphingosine kinase1,鞘氨醇激酶)是miR-124直接调控的靶基因;WB(Western blot)结果显示,miR-124能抑制SPHK1蛋白在人骨肉瘤细胞MG-63中的表达。结论:1.姜黄素可能通过上调miR-124在人骨肉瘤细胞株MG-63中的表达,抑制了人骨肉瘤细胞MG-63的增殖和侵袭;2. miR-124直接调控的靶基因是SPHK1;3. miR-124可通过下调SPHK1的表达,达到抑制人骨肉瘤细胞MG-63生长增殖和侵袭的作用。

全文目录


目录  3-4
主要缩略词简表  4-5
中文摘要  5-6
Abstract  6-7
前言  7-9
材料与方法  9-20
  材料  9-11
  实验方法  11-20
结果  20-26
讨论  26-28
结论  28-29
参考文献  29-33
综述  33-43
  参考文献  39-43
在读期间发表的论文  43-44
致谢  44

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 运动系肿瘤 > 骨骼肿瘤
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