学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

IL-13对人乳腺成纤维细胞在乳腺肿瘤微环境中IKK/NFκBp65表达的影响

作　者: 张明静
导　师: 李文林
学　校: 南昌大学医学院
专　业: 细胞生物学
关键词: 肿瘤微环境 乳腺癌 成纤维细胞 IKK NFκBp65
分类号: R737.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 26次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


目的：乳腺癌已经排列在女性肿瘤发病的第一位，乳腺恶性转化微环境对乳腺肿瘤的发生发展起着重要作用，成纤维细胞是乳腺肿瘤微环境中最主要的基质细胞，它通过直接的细胞接触、自噬行为、分泌信息分子与微环境中的各组成成分发生交互作用，对癌变细胞的生长起着沃土或蓄电池的作用，从而影响肿瘤的发生和发展。恶性转化微环境中肿瘤相关成纤维细胞的活性调控网络是肿瘤发生等相关领域不可忽视的问题。本文探索IL-13对人乳腺成纤维细胞在乳腺肿瘤微环境中IKK/NFκBp65基因表达的影响，为进一步深入研究乳腺肿瘤的发生和发展提供理论和实验基础。方法：通过对人乳腺癌细胞与成纤维细胞共培养，体外模拟建立乳腺肿瘤微环境，采用实时-PCR，检测成纤维细胞IKK和NFκBp65的mRNA表达变化。运用免疫细胞化学，检测成纤维细胞IKK和NFκBp65的蛋白表达。结果：1.不同浓度的IL-13(5ng/ml、10ng/ml、20ng/ml、100ng/ml)刺激与人乳腺癌细胞MDA-MB-435共培养的人乳腺成纤维细胞Hs578Bst，采用实时-PCR检测成纤维细胞IKK和NFκBp65mRNA的表达。结果显示，IL-13100ng/ml组IKK mRNA的表达与对照组比较，无显著性差异（P>0.05）， IL-135ng/ml、10ng/ml、20ng/ml各组IKK mRNA表达上调（P<0.05)；IL-135ng/ml、10ng/ml、20ng/ml、100ng/ml各组NFκBp65mRNA表达上调（P<0.05)。2.不同浓度的IL-13(5ng/ml、10ng/ml、20ng/ml、100ng/ml)刺激非共培养的人乳腺成纤维细胞Hs578Bst，采用实时-PCR检测成纤维细胞IKK和NFκBp65mRNA的表达。结果显示，各实验组IKK mRNA的表达下调（P<0.05)；各实验组成纤维细胞NFκBp65mRNA的表达上调(P<0.05)。3.不同浓度的IL-13（5ng/ml、10ng/ml、20ng/ml、100ng/ml）的作用下，共培养的成纤维细胞IKK mRNA的表达高于非共培养的各同浓度组（P<0.05）；IL-1310ng/ml组共培养成纤维细胞NFκBp65mRNA的表达高于同浓度组非共培养成纤维细胞NFκBp65mRNA的表达（P<0.05），其它共培养组（IL-135ng/ml、20ng/ml、100ng/ml组）成纤维细胞NFκBp65mRNA的表达均低于同浓度组非共培养成纤维细胞NFκBp65mRNA的表达（P<0.05）。4.免疫细胞化学结果显示，在乳腺肿瘤细胞共培养条件下成纤维细胞IKK和NFκBp65的蛋白表达高于非共培养组（P<0.05）。结论：1.乳腺肿瘤微环境和IL-13的共同作用上调人乳腺成纤维细胞IKK的表达；与人乳腺癌细胞株MDA-MB-435共培养的人乳腺成纤维细胞株Hs578BsIKK的表达高于非共培养的人乳腺成纤维细胞株Hs578Bs。2. IL-13浓度为10ng/ml与乳腺肿瘤细胞微环境形成较好的协同作用；上调与人乳腺癌细胞株MDA-MB-435共培养的人乳腺成纤维细胞株Hs578BsNFκBp65的表达。

全文目录


摘要  3-5
ABSTRACT  5-9
英文缩略词  9-10
第1章 前言  10-13
第2章 材料方法  13-21
  2.1 材料与试剂  13-14
    2.1.1 主要实验试剂  13
    2.1.2 主要仪器设备  13
    2.1.3 细胞株  13-14
    2.1.4 引物合成  14
  2.2 实验方法  14-20
    2.2.1 细胞培养及分组  14-15
    2.2.2 实时定量PCR  15-19
    2.2.3 免疫细胞化学  19-20
  2.3 统计学分析  20-21
第3章 实验结果与分析  21-31
  3.1 细胞生长状况  21
  3.2 总 RNA 提取样品的纯度与质量  21-23
    3.2.1 紫外分光光度测量RNA吸光值的比值及浓度  21-22
    3.2.2 琼脂糖凝胶电泳检测提取的RNA  22-23
  3.3 IL-13 对成纤维细胞IKK和NFκBp65 mRNA 表达的影响  23-29
    3.3.1 不同浓度 IL-13 对成纤维细胞 IKK 和 NFκBp65 mRNA 表达的影响  23-25
    3.3.2 比较不同培养条件下成纤维细胞 IKK 和 NFκBp65 mRNA 的表达  25-27
    3.3.3 IL-13 不同时间对成纤维细胞 IKK 和 NFκBp65 mRNA 表达的影响  27-29
  3.4 免疫细胞化学检测 IL-13 对成纤维细胞 IKK 和 NFκBp65 蛋白表达的影响  29-31
第4章 讨论  31-35
第5章 结论  35-36
致谢  36-37
参考文献  37-40
攻读学位期间的研究成果  40-41
综述  41-45
  参考文献  44-45

相似论文

  1. 兔骨髓间充质干细胞分离培养及定向分化的研究,R329
  2. 基于健康信念模式的健康教育干预对乳腺癌患者术后淋巴水肿预防效果的研究,R473.73
  3. 乳腺癌保乳术后切线照射的相关研究,R737.9
  4. 乳腺癌钙化X线表现与病理相关性研究,R737.9
  5. 人皮肤成纤维细胞搅拌培养和保存的初步研究,R329
  6. CIF与CEF方案用于Ⅱ期乳腺癌辅助化疗的临床观察,R737.9
  7. 体外诱导人脂肪间充质干细胞向表皮细胞和成纤维细胞分化,R329
  8. 低浓度血清法培养纯化新生大鼠雪旺细胞,R329
  9. 成纤维细胞与明胶海绵支架三维共培养的实验研究,R329
  10. 乳腺癌超声弹性成像与ER、PR及C-erbB-2表达的相关性研究,R445.1
  11. HOXA9 HOXA10 HOXA11在乳腺癌中的表达,R737.9
  12. 乳腺癌免疫分型与临床病理参数相关性及用于预后判断的可行性,R737.9
  13. 环磷酰胺LDM联合MTD在乳腺癌抗血管生成、诱导凋亡方面的研究,R737.9
  14. MTD化疗联合节律化疗对乳腺癌血管生成和细胞增殖的研究,R737.9
  15. 甲状旁腺激素相关蛋白在骨转移乳腺癌中的表达及意义,R737.9
  16. 全乳腺大切片观察乳腺癌新辅助化疗后残留灶形态学变化及部分分子生物学特点研究,R737.9
  17. 维吾尔族与汉族女性三阴性乳腺癌患者的临床病理特征和预后分析,R737.9
  18. 联合检测乳腺癌肿瘤标志物的临床意义,R737.9
  19. NF-κB信号通路在应力介导的人牙周膜成纤维细胞增殖中的作用及其机制,R781.4
  20. SPC对人真皮成纤维细胞中MMP-1、MMP-2、MMP-3表达影响的研究,R751
  21. 大豆异黄酮摄入与乳腺癌及前列腺癌发生风险的Meta分析,R737.25

中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 乳腺肿瘤
© 2012 www.xueweilunwen.com