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截瘫三联针对SD大鼠脊髓损伤神经功能保护及行为学的影响

作 者: 葛杜鹃
导 师: 张安仁
学 校: 成都中医药大学
专 业: 康复医学与理疗学
关键词: 脊髓损伤 截瘫三联针 常规针刺 甲基强的松龙 BBB评分 CGRP Caspase-3
分类号: R651.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
下 载: 7次
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内容摘要


目的:观察截瘫三联针治疗SD大鼠脊髓损伤的有效性,探讨其可能的作用机制,为临床脊髓损伤的治疗提供实验依据。方法:采用改良钳夹法建立大鼠急性脊髓损伤模型,将75只脊髓损伤大鼠随机分为5组,每组15只。A组:治疗组(截瘫三联针+甲基强的松龙),B组:对照组(常规针刺+甲基强的松龙),C组:基础治疗组(甲基强的松龙),D组:模型组,E组:假手术组。甲基强的松龙治疗,于脊髓损伤术后即刻行甲基强的松龙腹腔注射;电针治疗,A、B两组分别于脊髓损伤术后4h行相应腧穴电针治疗,模型组与假手术组不做任何治疗。各组大鼠分别于1、3、7天行行为学运动功能BBB评分观察大鼠神经功能变化后,取损伤段脊髓组织行伊红-苏木素(HE)染色观察脊髓组织结构变化,并通过免疫组织化学方法(IHC)观察各组大鼠急性脊髓损伤后降钙素基因相关肽(CGRP)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)阳性细胞的表达情况。结果:1.行为学结果显示:①与E组比较,A、B、C、D组大鼠1、3、7天BBB评分均明显降低(P<0.05);②治疗1d后,A、B、C、D各组大鼠后肢BBB评分未见明显差异(P>0.05);③治疗3d后,A、B、C各组评分均高于D组(P<0.05),A、B、C各组比较未见明显差异(P>0.05);④治疗7d后,A、B组评分均高于C、D组(P<0.05),A、B两组比较未见明显差异(P>0.05),C组评分高于D组(P<0.05);⑤A、B、C、D各组1d、3d、7d组内比较,BBB评分均有不同程度的恢复,差异均具有统计学意义(P<0.05);⑥E组各个时间点比较差异无统计学意义(P>0.05)。2.HE染色结果显示:各治疗组及模型组脊髓内均可见不同程度的出血灶、炎性细胞浸润,坏死、空洞形成,亦可见残存神经元胞体变圆、胞核固缩、边置、消失,且白质与灰质界限不清;与模型组相比,A、B、C各组脊髓组织病理学改变明显减轻;假手术组各个时间点神经元结构形态规则,白质致密,无明显出血、水肿、坏死、炎细胞浸润等变化。3.免疫组化结果显示:①GRP:A、B、C、D、E各组均可见阳性细胞表达,1d、3d与E组比较,脊髓损伤各组阳性细胞表达量明显低于E组(P<0.05);治疗7d后,A、B两组阳性细胞表达与E组比较未见明显差异(P>0.05),C、D两组阳性细胞表达明显低于E组(P<0.05);A、B两组各个时间点阳性细胞表达量明显高于C、D两组(P<0.05);A组与B组比较和C组与D组比较差异无统计学意义(P>0.05):A组1d与3d、1d与7d、3d与7d组内比较,B、C、D三组1d与7d、3d与7d比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。②Caspase-3:假手术组仅见少量的阳性细胞,脊髓损伤后各组均可见阳性细胞表达,1d.3d.7d,A.B.C.D各组阳性细胞表达明显高于E组(P<0.05),A、B、C各组阳性细胞表达明显低于D组(P<0.05);治疗1d后,A、B、C组阳性细胞表达未见明显差别(P>0.05);治疗3d、7d后,A、B两组阳性细胞表达低于C组(P<0.05),但A、B两组比较差异无统计学意义(P>0.05);A、B两组1d与3d、3d与7d组内比较,C、D两组1d与3d、1d与7d、3d与7d组内比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:1.截瘫三联针在改善脊髓损伤大鼠后肢运动功能方面有效;2.截瘫三联针的作用机制可能与促进神经保护因子CGRP的表达,抑制细胞凋亡因子Caspase-3的表达,从而抑制细胞凋亡,减轻继发性损害,保护神经细胞,促进其再生修复有关;3.“以运动为腧”的取穴方法可作为一种新的取穴方法应用于临床。

全文目录


中文摘要  2-4
ABSTRACT  4-7
目录  7-9
中英文缩略语表  9-10
引言  10-12
1 实验材料  12-13
  1.1 实验对象  12
  1.2 主要试剂和药品  12
  1.3 主要设备和仪器  12-13
2 实验方法  13-16
  2.1 动物模型的建立  13-14
  2.2 动物分组和治疗方法  14-16
3 观察指标及测定方法  16-18
  3.1 一般活动观察  16
  3.2 动物行为学观察  16
  3.3 组织形态学观察  16
  3.4 苏木素-伊红染色  16-17
  3.5 免疫组织化学方法  17-18
4 图像分析及数据统计学处理  18
5 结果  18-28
  5.1 实验大鼠一般情况  18
  5.2 行为学观察结果  18-21
  5.3 HE染色结果  21-22
  5.4 免疫组化结果  22-28
6 讨论  28-42
  6.1 现代医学对脊髓损伤的认识  28-30
  6.2 祖国医学对SCI的认识  30-31
  6.3 脊髓损伤模型的建立  31-32
  6.4 治疗方案的选择依据  32-36
  6.5 评价指标的选择依据  36-38
  6.6 结果分析  38-42
7 结论  42-43
问题与展望  43-44
致谢  44-45
参考文献  45-49
附件1:文献综述  49-60
附件2:BBB评分表  60-61
附件3:图片  61-64
附件4:在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果  64-65

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中图分类: > 医药、卫生 > 外科学 > 外科学各论 > 头部及神经外科学 > 脊髓
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