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噻托溴铵对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺表面活性蛋白-D影响的研究

作 者: 张金梅
导 师: 孙丽华
学 校: 南京医科大学
专 业: 内科学
关键词: 慢性阻塞性肺疾病 大鼠 香烟烟熏 内毒素 噻托溴铵 肺表面活性蛋白-D
分类号: R563.9
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要


目的:采用烟熏加气管内注入内毒素法建立慢性阻塞性肺疾病大鼠模型。方法:采用SPF级健康雄性SD大鼠20只,6-8周龄,初始体重(200±20)g,随机分为对照组、COPD组,每组10只。COPD组于第30、60天气管内注入内毒素(LPS),注入当天不给予烟熏,其余每天以5%烟雾浓度进行烟熏,2次/天,0.5h/次,2次间隔时间为8h,共90天制作COPD大鼠模型。造模结束后取大鼠右上肺组织于10%中性甲醛溶液中固定24h后行HE染色,光学显微镜下观察大鼠肺、支气管的病理改变,定量检测肺平均内衬间隔(MLI)及平均肺泡数(MAN)以评估肺气肿程度。酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组大鼠血清及肺组织中IL-8、TNF-α的含量。结果:建模结束后COPD组大鼠体重明显降低,出现咳嗽,活动后气喘等症状。肺、支气管的HE染色下病理示支气管管腔严重变形,气道黏膜上皮纤毛部分粘连、倒伏、脱落,杯状细胞增生,肺泡壁变薄,肺泡腔扩大融合成肺大泡,管壁周围可见大量炎性细胞浸润;其血清及肺组织中IL-8、TNF-α含量较对照组明显减少升高,结果均有显著统计学差异(P<0.01)。符合COPD慢性支气管炎和肺气肿的病理改变。结论:烟熏加气管内注入内毒素共90天法建立的COPD大鼠模型具备了气道慢性炎症及肺气肿的病理特点,可以用于实验研究。目的:观察噻托溴铵干预慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠造模前后血清及肺组织中肺表面活性蛋白-D (SP-D)水平的变化,探讨噻托溴铵在COPD早期干预中的作用。方法:采用SPF级健康雄性SD大鼠30只,6-8周龄,初始体重(200±20)g,随机分为对照组、COPD组和噻托溴铵干预组,每组10只。COPD组及噻托溴铵干预组于第30、60天气管内注入内毒素(LPS),注入当天不给予烟熏,其余每天以5%烟雾浓度进行烟熏,2次/天,0.5h/次,2次间隔时间为8h,共90天制作COPD大鼠模型。噻托溴铵干预组每天烟熏前30min雾化吸入噻托溴铵。90天后取各组大鼠右上肺组织于10%中性甲醛溶液中固定24h后行HE染色,光学显微镜下观察大鼠肺、支气管的病理改变,定量检测肺平均内衬间隔(MLI)及平均肺泡数(MAN),采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测三组大鼠血清及肺组织中IL-8、TNF-α水平。ELISA法检测各组大鼠血清中SP-D水平、RT-PCR检测各组大鼠肺组织中SP-DmRNA的含量、Western-blot及免疫组织化学方法检测各组大鼠肺组织中SP-D的水平变化。结果:噻托溴铵干预组大鼠肺、支气管的病理改变较COPD组显著减轻,炎症因子水平较COPD组明显减少;对照组、COPD组及噻托溴铵干预组大鼠血清中SP-D水平分别为(42.14±2.52)ng/ml,(53.21±4.17)ng/ml和(47.58±5.97) ng/ml,三组间相比差异显著(P<0.01);三组大鼠肺组织中SP-D在mRNA水平的表达量分别为0.05±0.00,0.34±0.03和0.23+0.02,差异有显著统计学意义(P<0.01);三组大鼠肺组织中SP-D在蛋白水平的表达量分别为0.68+0.01,0.98+0.01和0.76+0.01,有显著统计学意义(P<0.01)。结论:1、COPD大鼠血清及肺组织中SP-D与COPD的发病密切相关。2、在COPD大鼠前期给予噻托溴铵干预可降低血清及肺组织中SP-D的过表达。

全文目录


摘要  5-9
Abstract  9-13
主要英汉縮略词对照表  13-15
第一部分 香烟烟熏联合气管内注入内毒素建立慢性阻塞性肺疾病大鼠模型  15-26
  前言  15-16
  材料和方法  16-21
  结果  21-23
  讨论  23-25
  参考文献  25-26
第二部分 噻托溴铵对慢性阻塞性肺疾病大鼠血清及肺组织中肺表面活性蛋白-D的影响  26-54
  前言  26-28
  材料和方法  28-41
  结果  41-45
  讨论  45-52
  参考文献  52-54
全文总结  54-55
综述  55-64
  参考文献  61-64
攻读硕士学位期间发表文章情况  64-65
致谢  65

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 呼吸系及胸部疾病 > 肺疾病 > 其他
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