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肺心汤含药血清对离体培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和低氧诱导因子脯氨酸羟化酶的影响

作 者: 李敏
导 师: 戴爱国
学 校: 南华大学
专 业: 呼吸内科学
关键词: 肺心汤 含药血清 平滑肌细胞 PHDs HIF-1α
分类号: R544.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要


【目的】研究肺心汤含药血清对体外缺氧环境下大鼠原代肺动脉平滑肌细胞PHDs-HIF-1α信号分子表达的影响,探索肺心汤含药血清与对缺氧下大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的关系。【方法】细胞增殖部分:组织贴壁法培养大鼠原代肺动脉平滑肌细胞,MTT法、EDU标记法检测不同浓度FXD含药血清对缺氧处理(1%O2、94%N2和5%CO2)24h后大鼠PAMSC增殖情况。基因表达部分:Western-blot检测不同缺氧时间(2h、4h、6h、12h、24h)下HIF-1α的蛋白表达;选用HIF-1α表达量最高一组的时间点作为后续时间点检测常氧组、缺氧模型组、缺氧+FXD含药血清组,缺氧+硝苯地平组PHDs、HIF-1α蛋白和mRNA的表达。【结果】1.肺心汤含药血清可抑制体外缺氧处理24h后大鼠PASMC的增殖,且呈剂量依赖性。2.不同缺氧时间点对HIF-1α蛋白表达的影响Western Blot结果显示:随着缺氧时间的延长,HIF-1α的蛋白表达量呈递增趋势,缺氧12h组达到高峰值,高于缺氧2h组(P<0.05),缺氧24h组维持高水平。3.缺氧处理12h对大鼠PASMC中HIF-1α、PHDs蛋白表达的影响Western Blot结果显示:与正常对照组比较,缺氧模型组、缺氧+FXD组、缺氧+硝苯地平组HIF-1a、PHD3蛋白表达水平明显增加(P<0.01)。4.缺氧处理12h对大鼠PASMC中HIF-1α、PHDs mRNA表达的影响RT-PCR结果显示:与正常对照组比较,缺氧模型组HIF-1a、PHD2、PHD3mRNA表达水平明显增加(P<0.01)。5.肺心汤含药血清对缺氧处理12h大鼠PASMC中HIF-1α、PHDs蛋白表达的影响Western Blot结果显示:与缺氧模型组相比:缺氧+FXD组HIF-1α蛋白表达水平增加(P<0.05),缺氧+FXD组PHD1蛋白表达水平明显增加(P<0.01)。6.肺心汤含药血清对大鼠PASMC中HIF-1α、PHDs mRNA表达的影响RT-PCR结果显示:与缺氧模型组相比,缺氧+FXD组和缺氧+西药组PHD1mRNA表达升高(P<0.05)。7.【结论】1.肺心汤含药血清可抑制体外缺氧处理24h大鼠PASMC的增殖;2.肺心汤含药血清能抑制缺氧处理12h大鼠PASMC中HIF-1α蛋白的表达,但能提高PHD1蛋白和mRNA水平的表达;3.缺氧12h状态下,肺心汤含药血清可能通过PHD1-HIF-1α途径抑制大鼠PASMC的增殖。

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 心脏、血管(循环系)疾病 > 血压异常 > 高血压
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