学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

调节性B细胞在控制小鼠疟疾免疫病理中的作用及机制研究

作 者: 刘云峰
导 师: 苏钟
学 校: 中国科学技术大学
专 业: 微生物学
关键词: 疟疾 调节性B细胞 脑疟 IL-10 疫苗
分类号: R531.3
类 型: 博士论文
年 份: 2013年
下 载: 44次
引 用: 0次
阅 读: 论文下载
 

内容摘要


疟疾是由原虫类寄生虫——疟原虫(Plasmodium spp.)感染引起的流行性疾病,是全球三大主要传染性疾病之一。流行病学调查数据表明,目前在世界许多地区,疟疾仍然呈现高发病率和高死亡率,特别是在撒哈拉以南的非洲地区;易感人群多为5岁以下的儿童,其感染后常表现严重的病理变化和症状,例如脑疟、严重贫血和肺功能衰竭等。然而,我们对疟疾感染所诱导的主要免疫病理变化—脑疟—及其调控机理尚未完全了解。在疟疾流行区,感染疟疾后的人群虽然能获得部分保护性免疫,但是这种免疫力维持时间短,并且在个体离开疟疾流行区后保护力快速消失。目前治疗疟疾的主要手段是药物治疗,可是由于疟原虫耐药性的产生及药物的不及时使用严重降低抗疟药的效果,所以疫苗被认为是目前应对疟疾的最理想方式。然而在疟疾疫苗研发方面我们仍然面临巨大的挑战,其原因之一是我们尚未完全探明疟原虫病原与宿主之间的复杂免疫学关系。在本论文报告的研究中,我们采用小鼠伯氏疟原虫(Plasmodium berghei)疟疾模型,(1)分析研究了与疟疾相关的主要免疫病理变化—脑疟的发生和调节机制;(2)比较和分析了诱导有效免疫保护力的疟疾疫苗的不同免疫策略。1.调节性B细胞与脑疟疟原虫感染诱发的神经系统功能障碍—脑疟,是疟疾感染时产生的主要病理变化和致死原因之一。大约有1%的恶性疟原虫感染个体可发生脑疟;其中,10%到20%的脑疟患者发生死亡。脑疟是免疫失调所导致的脑组织免疫病理反应。目前认为,其主要的诱发原因与感染疟原虫的红细胞粘附在脑组织毛细血管壁,并引起局部毛细血管堵塞和炎性细胞招募有关。淋巴细胞浸润、免疫杀伤性NK细胞和细胞毒性CD8+T细胞等破坏毛细血管壁和血脑屏障,导致脑组织出血和神经系统功能受损。免疫调节性细胞因子IL-10在维持免疫自身稳定和控制感染诱导的免疫病理如脑疟的过程中发挥关键作用。近年来有大量实验表明,可分泌IL-10的调节性B细胞具有免疫调节功能,并证实其在维持免疫自身耐受和抑制免疫病理中发挥着重要作用。据此,本课题采用伯氏疟原虫感染C57BL/6小鼠的疟疾模型,研究了调节性B细胞在疟疾感染过程中调控过度免疫反应和脑疟病理的作用。研究结果表明,伯氏疟原虫感染后可诱导血清中IL-10水平的增高;同时观察到小鼠脾脏细胞中可分泌IL-10的调节性B细胞比率显著增高。体内转输实验证实,IL-10+调节性B细胞明显抑制脑组织微血管出血性病理变化,并显著降低疟疾感染小鼠的死亡率;进一步研究发现,调节性B细胞能抑制免疫杀伤细胞向脑组织迁移,但对疟原虫血虫水平没有显著影响。用IL-10受体抗体阻断IL-10信号后,调节性B细胞抑制脑疟发生的作用消失,这说明调节性B细胞抑制脑疟发生是由IL-10介导的。我们还发现,转输CD4+CD25+调节性T细胞对脑疟发生没有显著作用。以上结果表明调节性B细胞,而不是调节性T细胞,抑制疟原虫感染的小鼠脑疟病理的发生。此项研究的成果不仅揭示疟疾病理新的调控机制,还对制定脑疟预防策略及抗疟疾药物研发提供重要理论依据。2.疟疾活虫疫苗的免疫效能目前疫苗被认为是控制疟疾最有效的方式。近半个多世纪以来人们尝试用各种疫苗方式来预防疟疾,然而到目前为止还没有成功的抗疟疾疫苗在临床上应用。亚单位疫苗被人们寄予厚望,但近三十年来许多亚单位疟疾疫苗临床试验都以失败告终,这可能与这些疫苗缺乏危险信号进而不能有效激活免疫应答和免疫保护力相关。人们发现放射线致弱和基因改造的减毒子孢子能够诱导针对疟疾的完全保护力,可是这种疫苗难以在体外大规模获得从而限制了在临床上的应用。在本研究中,我们分析两种疫苗免疫策略诱导的免疫应答和保护力水平。一种是短期活虫感染加药物终止模拟活虫疫苗的方式,另一种是全虫抗原加佐剂的疫苗方式。研究目的是鉴定两种疫苗策略的免疫应答差异以及与有效保护力相关的免疫应答标志物。实验结果表明,短期活虫感染免疫可诱导较强的免疫保护力。二全虫抗原家佐剂仅可诱导部分保护。与全虫抗原加佐剂组相比,短期活虫感染加药物阻断组诱导更高的疟原虫特异的抗体水平和树突状细胞激活水平以及更强的CD4+T细胞应答。Thl型、Th2型和调节性细胞因子表达水平在两种疫苗策略之间都有类似的显著性差异。进一步的研究将验证这些免疫因素和保护力之间的相互联系。本项研究有助于设计出更理性的疟疾疫苗方案。

全文目录


摘要  7-9
Abstract  9-12
符号说明  12-14
第1章 绪论  14-33
  1.1 调节性B细胞  14-23
    1.1.1 调节性B细胞表型特征  15-17
    1.1.2 调节性B细胞激活方式  17-18
    1.1.3 调节性B细胞的作用机理  18
    1.1.4 调节性B细胞与自身免疫性疾病  18-19
    1.1.5 调节性B细胞与其他免疫失调性疾病的关系  19-20
    1.1.6 调节性B细胞与肿瘤  20
    1.1.7 调节性B细胞与新生儿疾病  20-21
    1.1.8 人调节性B细胞的研究  21
    1.1.9 调节性B细胞与感染性疾病  21-23
  1.2 疟疾  23-27
    1.2.1 疟疾的实验研究现状  23
    1.2.2 疟原虫生活史  23-24
    1.2.3 疟疾病理学  24-25
    1.2.4 脑疟免疫调控  25-27
  1.3 疟疾免疫与疫苗  27-32
    1.3.1 疟疾免疫应答及其特点  28-30
    1.3.2 疟疾疫苗  30-32
  1.4 结语  32-33
第2章 调节性B细胞调控疟疾免疫病理的作用  33-53
  2.1 引言  33
  2.2 实验材料和方法  33-39
    2.2.1 实验材料  33-36
    2.2.2 实验方法  36-39
  2.3 实验结果  39-49
    2.3.1 疟原虫感染诱导IL-10~+B细胞  39-40
    2.3.2 疟疾诱导的调节性B细胞表型特点  40-41
    2.3.3 LPS体外刺激可提高调节性B细胞比例  41-42
    2.3.4 转输经LPS刺激的B细胞减轻疟疾感染小鼠脑组织病理反应  42-43
    2.3.5 IL-10~+调节性B细胞而非IL-10~-B细胞在抑制脑疟时发挥作用  43-45
    2.3.6 调节性B细胞通过诱导体内IL-10的分泌来发挥抑制作用  45-48
    2.3.7 调节性T细胞在控制脑疟中的作用  48-49
  2.4 讨论  49-53
第3章 疟疾活虫疫苗和全虫抗原疫苗的免疫应答差异  53-67
  3.1 引言  53
  3.2 实验材料与方法  53-59
    3.2.1 实验材料  53-56
    3.2.2 实验方法  56-59
  3.3 实验结果  59-65
    3.3.1 活虫短期感染免疫比全虫抗原疫苗可诱导更有效保护力  59-60
    3.3.2 活虫短期感染免疫比全虫抗原疫苗诱导更高的抗体滴度  60-61
    3.3.3 活虫短期感染免疫诱导DC细胞激活  61-62
    3.3.4 活虫短期感染免疫后细胞因子分泌特征  62-63
    3.3.5 活虫短期感染免疫后CD4~+T细胞因子分泌水平  63-64
    3.3.6 效应性CD4~+T细胞和调节性T细胞应答反应  64-65
  3.4 讨论  65-67
参考文献  67-82
附录  82-84
致谢  84-85
攻读博士期间发表的的学术论文与取得的研究成果  85

相似论文

  1. 溶藻弧菌噬菌体、菌影疫苗及其对对虾免疫保护性的比较研究,S945
  2. 甲型流感病毒M2蛋白的表达、纯化及其免疫原性的研究,R392
  3. TRAIL对肿瘤侵润CD4~+CD25~+ Treg的调节作用,R730.2
  4. 猪细小病毒河南流行株的分离、鉴定及部分生物学特性研究,S852.65
  5. 维生素A不同给药途径对持续性哮喘大鼠CD4~+CD25~+调节性T细胞及IL-4、IFN-γ细胞因子的影响,R562.25
  6. 葡萄籽原花青素对肾血管性高血压大鼠血压的影响及其机制研究,R544.1
  7. 大连地区变应性鼻炎变应原调查和78例特异性免疫治疗效果分析,R765.21
  8. 草鱼NCCRP-1和IL-10基因的克隆和表达,S917.4
  9. 外周血CD4+CD25+Treg细胞、TGF-β1在斑秃患者的表达研究,R758.71
  10. 骨髓间充质干细胞对重症急性胰腺炎大鼠CD4~+CD25~+调节性T细胞的影响及中西医结合治疗,R576
  11. 糖皮质激素对乙型肝炎重症化阻断作用的临床研究,R512.62
  12. IKK2dn转染受者未成熟树突状细胞诱导产生的CD4~+CD25~-T细胞致耐受作用的实验研究,R392
  13. 基于流感哨点监测网络的甲型H1N1流感疫苗效果评估,R186
  14. IKK2dn转染未成熟树突状细胞诱导产生的CD4~+CD25~-T细胞的筛选及功能鉴定,R392
  15. 壳聚糖—白念菌热休克蛋白90核酸疫苗纳米粒子的制备及其缓释作用初探,R392.1
  16. 防龋用转基因番茄和生菜中目的基因遗传传递的初步分析,R781.1
  17. 原发性肾病综合征患儿CD4~+CD25~+调节性T细胞动态变化及意义,R726.91
  18. 麦胚无细胞蛋白合成系统表达恶性疟原虫环子孢子蛋白的研究,R392
  19. 变应性鼻炎外周血Th17、CD4+IL-10+Treg、Th1/2细胞功能研究,R765.21
  20. 环介导等温扩增技术检测疟原虫方法的建立及其应用,R392
  21. 肿瘤细胞对CD4~+Foxp3~+调节性T细胞影响的临床和实验研究,R392

中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 寄生虫病 > 原虫病 > 疟疾
© 2012 www.xueweilunwen.com