学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

白香丹胶囊对肝气逆证大鼠海马GABA_B受体表达及其G蛋白偶联的离子通道和信号通路的影响

作 者: 蔡洪信
导 师: 张惠云
学 校: 山东中医药大学
专 业: 中药学
关键词: 白香丹胶囊 肝气逆证 γ-氨基丁酸B受体 内向整流性钾通道 细胞外信号调节蛋白激酶 cAMP反应元件结合蛋白 神经肽Y
分类号: R285.5
类 型: 博士论文
年 份: 2012年
下 载: 18次
引 用: 0次
阅 读: 论文下载
 

内容摘要


目的:检测肝气逆证模型大鼠海马GABABR1、GABABR2、AC、KIR3.2、pERK1/2、ERK1/2、pCREB、CREB、BDNF、NPY表达的变化,探讨调肝方药白香丹胶囊对肝气逆证的部分中枢干预机制。方法:大鼠随机分为正常组、模型组、白香丹胶囊组(0.2g.kg-1)、巴氯芬组(0.008g.kg-1),采用“社会隔离结合居住入侵”方法制备肝气逆证大鼠模型,药物组按相应剂量灌胃给药7天,每日1次。通过糖水偏好实验、旷场实验和高架十字迷宫实验进行模型评价,采用免疫荧光技术检测各组大鼠海马GABABR1、GABABR2和AC、KIR3.2、BDNF、NPY的表达与分布,Western blot检测各组大鼠海马GABABR1、GABABR2、AC、KIR3.2、pERK1/2、ERK1/2、pCREB、CREB、BDNF、NPY蛋白表达变化。结果:居住入侵后,与正常组比较,模型组体重降低(P<0.05),糖水偏好系数降低(P<0.05),旷场实验得分增高(P<0.05),高架十字迷宫实验HD、OE+CE、RE值增高(P<0.05),OE%和OT%降低(P<0.05),海马GABABR1、GABABR2、AC、KIR3.2、pERK1/2、pCREB、BDNF、NPY表达均降低(P<0.05),ERK、CREB蛋白表达无差异(P>0.05)。与模型组比较,白香丹胶囊组体重和糖水偏好系数增高(P<0.05),巴氯芬组体重和糖水偏好系数无差异(P>0.05);与模型组比较,白香丹胶囊组和巴氯芬组旷场实验得分降低(P<0.05)、HD、OE+CE和RE值降低(P<0.05),OE%和OT%升高(P<0.05),海马GABABR1、GABABR2、AC、KIR3.2、pERK1/2、pCREB、BDNF、NPY表达均升高(P<0.05),ERK、CREB表达无差异(P>0.05)。结论:肝疏泄失常导致肝气逆证的微观机制与海马GABAB受体G蛋白偶联的离子通道功能和信号通路传导紊乱有关,改善海马GABAB受体G蛋白偶联的离子通道功能和信号通路传导紊乱可能是白香丹胶囊平肝理气的分子生物学机制之一。

全文目录


提要  3-4
Abstract  4-10
引言  10-14
材料与方法  14-30
  1 材料  14-19
    1.1 实验动物  14
    1.2 药品及试剂  14-15
    1.3 仪器设备  15
    1.4 相关试剂的配制  15-19
      1.4.1 0.1mol/L PH 7.4 PB 缓冲液的配制  15
      1.4.2 0.01mol/L PH 7.5 PBS 缓冲液的配制  15
      1.4.3 4%多聚甲醛固定液的配制  15
      1.4.4 0.01mol/L PH 6.0 柠檬酸缓冲液的配制  15
      1.4.5 Western blot 存储液的配制  15-16
      1.4.6 Western blot 使用液的配制  16-19
  2 方法  19-30
    2.1 大鼠分组、造模及给药  19-20
    2.2 行为学评价  20-22
      2.2.1 打斗情况观察  20
      2.2.2 旷场实验  20-21
      2.2.3 糖水偏好实验  21
      2.2.4 高架十字迷宫实验  21-22
    2.3 脑组织留取  22
    2.4 石蜡切片制备  22-23
      2.4.1 洗涤  22
      2.4.2 脱水  22
      2.4.3 透明  22-23
      2.4.4 浸蜡  23
      2.4.5 包埋  23
      2.4.6 切片  23
    2.5 免疫荧光化学反应  23-24
      2.5.1 石蜡切片脱蜡至水  23
      2.5.2 微波热抗原修复  23-24
      2.5.3 封闭  24
      2.5.4 一抗孵育  24
      2.5.5 二抗孵育  24
      2.5.6 封片  24
      2.5.7 免疫荧光检测  24
    2.6 蛋白的提取和测定  24-26
      2.6.1 蛋白的提取  24-25
      2.6.2 样品蛋白含量的测定  25-26
        2.6.2.1 制作标准曲线  25
        2.6.2.2 检测样品蛋白含量  25-26
    2.7 蛋白免疫印记(Western bolt)  26-29
      2.7.1 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)  26-27
      2.7.2 转膜  27-28
      2.7.3 杂交反应  28
      2.7.4 显影与图像分析  28-29
    2.8 统计方法  29-30
结果  30-38
  1 一般情况和行为学观察  30-32
    1.1 各组大鼠一般情况和打斗情况观察  30
    1.2 各组大鼠的体重变化  30
    1.3 各组大鼠旷场实验结果比较  30-31
    1.4 各组大鼠糖水偏好实验结果比较  31
    1.5 各组大鼠高架十字迷宫实验结果比较  31-32
  2 免疫荧光结果  32-34
    2.1 各组大鼠海马 GABABR1、GABABR2 的表达与分布  32-33
    2.2 各组大鼠海马 KIR3.2 的表达与分布  33
    2.3 各组大鼠海马 AC 的表达与分布  33-34
    2.4 各组大鼠海马 BDNF 的表达与分布  34
    2.5 各组大鼠海马 NPY 的表达与分布  34
  3 Western blot 结果  34-38
    3.1 各组大鼠海马 GABABR1、GABABR2、KIR3.2、AC 的表达  34-35
    3.2 各组大鼠海马 pERK1/2、ERK1/2、pCREB、CREB 的表达  35-36
    3.3 各组大鼠海马 BDNF、NPY 的表达  36-38
讨论  38-51
  1 情志病证的概述  38-39
  2 怒所致情志病证  39
  3 肝气逆证大鼠模型的造模及评价  39-41
  4 白香丹胶囊对肝气逆证的调节作用  41
  5 GABAB 受体 G 蛋白偶联的离子通道和信号通路在应激过程中的作用  41-48
    5.1 GABAB 受体和 G 蛋白的结构  41-42
    5.2 GABAB 受体 G 蛋白偶联的离子通道  42-43
    5.3 GABAB 受体 G 蛋白偶联的信号通路  43-48
      5.3.1 AC  43-44
      5.3.2 ERK1/2  44
      5.3.3 CREB  44-45
      5.3.4 BDNF  45-46
      5.3.5 NPY  46-48
  6 巴氯芬与白香丹胶囊对肝气逆证干预效果比较  48-50
  7 问题与展望  50-51
结语  51-52
参考文献  52-59
附录  59-68
缩略词表  68-69
致谢  69-70
查新报告  70-81
论文著作  81-93
科研课题  93-99
详细摘要  99-106

相似论文

  1. 酮色林对炎性痛和神经病理性痛的治疗作用及其机制,R741
  2. α7胆碱能受体激动剂DMXB对Aβ损伤认知功能的影响及其分子机制,R749.16
  3. PMS肝气逆证大鼠脑区ERα和ERβ基因表达及药物的影响,R271.9
  4. 经前平颗粒治疗经前期综合征肝气逆证疗效观察与作用机制探讨,R285
  5. 急性脑梗死患者血神经肽Y与一氧化氮合酶水平变化及其临床意义,R743.3
  6. 白香丹胶囊对PMS肝气逆证大鼠不同脑区γ氨基丁酸A受体β2亚基表达量及分布模式的影响,R285.5
  7. 电针风府对阿尔茨海默病模型大鼠海马区BDNF、TrkB、CREB的影响,R245
  8. L-肉毒碱在Alzheimer样tau蛋白过度磷酸化和空间记忆障碍中的保护作用,R749.16
  9. 经前期综合征肝气逆证大鼠模型血清及不同脑区孕酮及氨基酸检测分析,R271.9
  10. 急性脑梗死患者血浆神经肽Y与内皮素的水平变化及其临床意义,R743.3
  11. 地特胰岛素减少体重增加的中枢机制,R587.1
  12. 失神经对幼兔干骺端损伤愈合影响的实验研究,R726.5
  13. ERK活性对哮喘大鼠CyclinD1表达的影响及调控作用,R562.25
  14. 阿片系统和NPFF系统在体温调节上的相互作用研究,R96
  15. 神经肽FF在外周阿片镇痛调节和脊髓心血管活性方面的研究,R96
  16. 盆腔脏器脱垂患者主韧带和阴道前壁中神经肽Y及其受体的表达及意义,R711.2
  17. 神经肽Y系统在高剂量咖啡因、可可碱对大鼠焦虑行为影响的作用机制,R749.7
  18. 不同强度光照对母鸡中脑和间脑c-fos基因表达的影响,S831
  19. 原发性失眠患者血浆神经肽Y水平的对照研究,R740
  20. 单、双相抑郁障碍患者血浆神经肽Y及P物质水平的对比研究,R749.4
  21. 嗅黏膜神经干细胞及嗅鞘细胞生物学特性的体外研究,R329.28

中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
© 2012 www.xueweilunwen.com