学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

花青素对镉诱导肝脏损伤的保护作用及机制研究

作　者: 王静
导　师: 马养民
学　校: 陕西科技大学
专　业: 有机化学
关键词: 花青素 镉 肝脏损伤 自由基 氧化应激
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 36次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


镉（Cadmium, Cd），是一种常见的环境污染物。由于其生物半衰期长，代谢缓慢，因此毒性极强；能够引起多种组织和器官的损伤，并诱发畸形导致基因突变。其中，以肝脏损伤的镉中毒备受关注。已有研究认为，镉的肝脏毒性与自由基的积累和氧化压力（oxidative stress, OS）的产生有关，因此寻找高效、安全的抗氧化物成为肝脏解毒的主要方向。鉴于花青素（Anthocyanidin）是一类具有超强自由基清除能力的天然抗氧化物，并且在蓝莓（blue berry）中储量丰富，故本文通过实验，研究蓝莓花青素（Ay）对小鼠镉损伤肝脏的保护作用及其作用机制。体外实验中，通过分光光度法讨论Ay对OH和DPPH的清除能力并评价Ay与金属Cd2+的螯合作用。体内实验中，首先构建Ay保护的镉诱导小鼠肝脏损伤模型。其次，测量体重增长、肝脏重量及肝脏系数等指标来评价Cd对小鼠生长的影响和Ay的保护作用；使用原子吸收分光光度计分析肝脏组织中Cd和Zn的含量；肝脏组织匀浆后，对肝细胞抗氧化酶的活力水平及细胞氧化程度进行检测；同时采用H&E染色、石蜡切片进行组织病理学分析。最后，为进一步讨论镉的遗传毒性，采用琼脂糖凝胶电泳法对肝细胞DNA的损伤进行定性分析，二苯胺法对DNA的损伤进行定量分析。结果表明：Ay具有良好的体外自由基清除能力，同时还具有螯合金属Cd2+的作用。饲养期镉损伤小鼠生长缓慢，肝脏出现明显病变。然而花青素的摄入能明显抑制Cd2+在肝脏中的蓄积，还原肝细胞功能，促进镉损伤小鼠健康生长；提高超氧化物歧化酶（superoxidedismutase, SOD）和过氧化氢酶（catalase, CAT）的活力水平，削弱镉诱导的氧化压力。通过抑制丙二醛（madondialdehyde, MDA）、蛋白羰基化物（protein carbonyl, PCO）和一氧化氮（nitric oxide, NO）的积累，阻止DNA分子片段化。组织病理学还表明，Ay能防止镉引起的肝细胞皱缩、核质外流和炎症浸润等。另外，花青素的保护作用与实验中的喂饲浓度呈依赖关系，其保护机理如下：i)清除自由基、提高机体的抗氧化能力； ii)抑制NO等炎症因子的产生； iii)螯合金属Cd2+，抑制肝脏中镉的蓄积，缓解损伤。

全文目录


摘要  5-7
ABSTRACT  7-15
1 文献综述  15-30
  1.1 肝脏研究  15-20
    1.1.1 肝脏的结构与功能  15
    1.1.2 肝脏损伤的原因  15-16
    1.1.3 重金属镉对肝脏的影响  16-20
  1.2 花青素简介  20-27
    1.2.1 花青素的结构  20-21
    1.2.2 花青素的生理功效  21-27
  1.3 蓝莓简介  27-29
    1.3.1 蓝莓植物资源  27
    1.3.2 蓝莓果实组成  27-28
    1.3.3 蓝莓的开发利用  28-29
  1.4 研究的目的及意义  29-30
2 蓝莓花青素的提取、分离及体外抗氧化研究  30-36
  2.1 材料与方法  30-31
    2.1.1 主要实验材料  30
    2.1.2 实验仪器  30-31
  2.2 实验方法  31-33
    2.2.1 蓝莓花青素的提取、分离  31
    2.2.2 花青素提取物对 DPPH 自由基的清除实验  31-32
    2.2.3 花青素提取物对羟自由基的清除实验  32
    2.2.4 花青素提取物与金属 Cd2+的螯合实验  32-33
  2.3 实验结果  33-35
    2.3.1 花青素提取物对 DPPH 自由基的清除实验  33-34
    2.3.2 花青素提取物对羟自由基的清除实验  34
    2.3.3 花青素提取物与金属 Cd2+的螯合实验  34-35
  2.4 小结  35-36
3 体内实验  36-60
  3.1 实验材料  36-39
    3.1.1 实验试剂  36-39
    3.1.2 实验仪器  39
  3.2 实验方法  39-47
    3.2.1 实验动物与分组  39
    3.2.2 模型建立  39-40
    3.2.3 小鼠生活观察  40
    3.2.4 体重变化及脏器系数  40
    3.2.5 肝脏组织中 Cd2+含量检测  40-41
    3.2.6 肝脏组织中 Zn2+含量检测  41
    3.2.7 蛋白质含量的测定  41-42
    3.2.8 谷胱甘肽含量测定  42-43
    3.2.9 样品 SOD 含量测定  43
    3.2.10 样品 CAT 含量测定  43-44
    3.2.11 一氧化氮含量测定  44-45
    3.2.12 PCO 含量测定  45
    3.2.13 MDA 含量测定  45
    3.2.14 组织形态学观察  45-46
    3.2.15 DNA 损伤检测  46-47
    3.2.16 统计学分析  47
  3.3 实验结果  47-58
    3.3.1 小鼠生活观察  47
    3.3.2 小鼠生长情况  47-48
    3.3.3 小鼠肝脏系数  48-49
    3.3.4 肝脏中 Cd2+、Zn2+含量  49-52
    3.3.5 GSH 含量测定  52
    3.3.6 样品 SOD 含量测定  52-53
    3.3.7 样品 CAT 含量测定  53-54
    3.3.8 一氧化氮含量测定  54
    3.3.9 PCO 含量测定  54-55
    3.3.10 MDA 含量测定  55-56
    3.3.11 组织形态学观察  56
    3.3.12 DNA 损伤检测  56-58
  3.4 小结  58-60
4 讨论  60-63
  4.1 花青素可以清除自由基、提高机体抗氧化能力  60-61
  4.2 花青素可以抑制 NO 等炎症因子的释放  61-62
  4.3 花青素可以螯合 Cd~（2+)，促进镉排出  62-63
5 结论  63-64
  5.1 结论  63
  5.2 创新点  63-64
致谢  64-65
参考文献  65-74
攻读学位期间发表的学术论文目录  74-75

相似论文

  1. 羟基化锌催化臭氧化去除水中2-MIB的研究,X703
  2. 葡萄籽原花青素制备工艺及真菌毒素检测,TQ461
  3. 基于导师临床经验的中医药治疗慢性肾脏病蛋白尿的研究,R277.5
  4. 调和玉米油对肉仔鸡抗氧化应激、脂质代谢酶及免疫基因表达的影响,S831.5
  5. 牡蛎中重金属镉、铅的富集及脱除方法的研究,X174
  6. 高性能聚丙烯腈的合成与表征,O631.3
  7. GMA的ATRP聚合及立构规整性的研究,O631.3
  8. 镉、铬及铅在日本无刺楤木中积累、分配及其对叶片抗氧化系统的影响,S792
  9. 海芋（Alocasiamacrorrhiza）对水分胁迫及污染物暴露的响应,X52
  10. 一些与生物相关分子作用的荧光猝灭光谱分析,X832
  11. 萝卜镉胁迫响应相关基因克隆及其表达分析,S631.1
  12. 镉胁迫及缺硫对水稻非蛋白巯基物质含量和谷胱甘肽硫转移酶活性的影响,S511
  13. 外加秸秆与柠檬酸对土壤中铜和镉有效性的影响,X131.3
  14. 血红素加氧酶-1参与水杨酸对镉诱导的紫花苜蓿根部氧化胁迫的调节作用,S541.9
  15. 光强对罗勒叶中花青素含量及光合特性的影响,S636.9
  16. 葡萄籽原花青素对肾血管性高血压大鼠血压的影响及其机制研究,R544.1
  17. 外源抗坏血酸对镉胁迫下油菜生长及产量影响,S565.4
  18. 花生中镉的检测技术研究和镉分布的初步探索,S565.2
  19. 镉在鱼虾体内的富集及其对生长、消化酶活性的影响,S917.4
  20. 窖蛋白-1在波动性高糖诱导的内皮细胞氧化应激损伤中的作用及机制,R587.1
  21. 蓝莓及活性物质对肠道菌群失衡及肠癌作用的初步研究,R735.3

中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
© 2012 www.xueweilunwen.com