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经痛愈舒对子宫内膜异位症大鼠NF-κB表达的防治作用

作　者: 杜娟
导　师: 丛慧芳
学　校: 黑龙江中医药大学
专　业: 中医妇科学
关键词: EMs 经痛愈舒 NF-κB
分类号: R285.5
类　型: 博士论文
年　份: 2014年
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内容摘要


目的：1采用自体移植法建立子宫内膜异位症(EMs)大鼠模型并动态观察其异位内膜病理学改变,确定经痛愈舒预防及治疗EMs的给药时间。2观察经痛愈舒治疗性用药对EMs大鼠异位内膜组织病理学改变的影响,及其对NF-KB蛋白、RNA表达的干预效果,探讨经痛愈舒治疗EMs的可能机制,并为其临床应用提供实验依据。3通过比较研究经痛愈舒预防性与治疗性用药干预EMs大鼠病理学表现及NF-KB蛋白、RNA表达的效果,探讨经痛愈舒预防性用药对EMs的影响及潜在作用机制。方法：1实验第一部分选用20只雌性未孕SD大鼠,随机分为5组；模型3天组、模型5天组、模型4周组、模型6周组及模型8周组,每组4只。均采用自体移植法建立EMs模型,各组分别于造模后第3天、第5天、第4周、第6周及第8周处死,苏木素伊红(HE)染色法观察异位内膜组织病理形态改变,并与正常SD大鼠子宫内膜对照2实验第二部分选用造模成功的EMs大鼠72只,随机分为模型4周组、模型8周组,经痛愈舒低、中、高剂量组及西药组,每组12只,另取12只雌性未孕SD大鼠作为正常对照。各组大鼠分别予生理盐水或对应药物灌胃。其中模型4周组于造模4周后处死,其他各组均于造模后8周处死。HE染色观察各组大鼠异位内膜病理形态改变,免疫组.化法观察异位内膜NF-KB表达,Western blot法、RT-PCR法观察异位内膜NF-κB蛋白及RNA表达。3实验第三部分选用36只EMs模型大鼠,随机分为模型组、经痛愈舒预防性用药组及经痛愈舒治疗性用药组,每组12只,另取12只雌性未孕SD大鼠作为正常对照。经痛愈舒预防性用药组于造模后5天给药,治疗性用药组于造模后5天予生理盐水,至造模后4周后再予经痛愈舒中药。各组大鼠均于造模后8周处死。HE染色观察各组大鼠异位内膜病理形态改变变化,免疫组化法、Westernblot法、RT-PCR法观察NF-κB表达。结果：1实验第一部分自体移植EMs大鼠模型造模成功率约70%。HE染色结果显示：与正常对照组比较,造模后3天异位内膜仅有少量炎性细胞侵润。造模后5天异位内膜间质结构松散、血供较差,尚未形成典型的内膜组织结构。造模后4周可观察到典型异位内膜组织形成。造模后6周及8周异位内膜病理表现与4周相似。2实验第二部分异位内膜HE染色可见：经痛愈舒高剂量组及西药组内膜上皮细胞柱状增生,内膜间质松散,较多腺体萎缩,血供明显变差。3免疫组化结果显示：模型4周组、8周组、经痛愈舒各组及西药组NF-κB表达明显高于正常对照组；经痛愈舒各组及西药组NF-κB表达明显低于模型8周组,且经痛愈舒高剂量组效果优于西药组。4Western blot结果显示：模型4周组、8周组、经痛愈舒各组及西药组NF-κB蛋白表达明显高于正常对照组；经痛愈舒各组及西药组NF-κB蛋白表达明显低于模型8周组,且经痛愈舒中、高剂量组效果优于西药组。5RT-PCR结果显示：模型4周组、模型8周组、经痛愈舒各组及西药组NF-κB RNA含量明显高于正常对照组；经痛愈舒各组及西药组NF-κB蛋白表达明显低于模型8周组,其中经痛愈舒中、高剂量组效果优于西药组。6实验第三部分HE染色结果显示：经痛愈舒预防性及治疗性用药组内膜上皮萎缩变薄,间质细胞数量减少,异位内膜组织出现萎缩退变,其中预防性用药组改变更明显。7免疫组化结果显示：模型组、经痛愈舒治疗组及预防组NF-κB表达明显高于正常对照组；经痛愈舒治疗组及预防组NF-κB表达明显低于模型组,但经痛愈舒治疗组及预防组NF-κB表达未见明显差异。8Western blot结果显示：模型组、经痛愈舒治疗组及预防组NF-κB表达明显高于正常对照组；经痛愈舒治疗组及预防组NF-κB表达明显明显低于模型组,但经痛愈舒治疗组及预防组NF-κB表达未见明显差异。9RT-PCR结果显示：模型组、经痛愈舒治疗组及预防组NF-κB表达明显高于正常对照组；经痛愈舒治疗组及预防组NF-κB表达明显明显低于模型组,但经痛愈舒治疗组及预防组NF-κB表达未见明显差异。结论：1通过自体移植法可成功建立EMs大鼠模型,造模后5天可作为预防性用药干预时间点,造模后4周可作为治疗性用药干预时间点。2经痛愈舒治疗性用药可在一定程度上促使EMs大鼠异位内膜组织萎缩退变,并抑制其NF-κB蛋白及RNA表达。3经痛愈舒预防性用药亦可在一定程度上促进EMs大鼠异位内膜组织萎缩,并抑制其NF-κB表达,但与治疗性用药比较无明显差异。

全文目录


缩略语表  5-7
中文摘要  7-10
Abstract  10-14
前言  14-16
文献综述  16-46
  综述一 现代医学对子宫内膜异位症及NF-κB的相关认识  16-31
  综述二 EMs中医证治研究进展  31-36
  参考文献  36-46
第一部分 自体移植法建立EMs大鼠模型及异位内膜组织的动态观察  46-59
  材料与方法  46-51
    1 实验动物  46
    2 实验试剂  46-47
    3 实验仪器  47
    4 EMs大鼠模型建立方法  47-49
    5 分组与取材  49
    6 异位内膜组织石蜡包埋固定  49
    7 HE染色动态观察EMs大鼠异位内膜组织病理形态改变  49-51
  结果  51-53
    1 EMs造模情况  51
    2 动态观察EMs大鼠异位内膜组织病理形态改变  51-53
  讨论  53-56
    1 EMs模型的建立  53-55
    2 EMs给药时机的选择  55-56
  结论  56-57
  参考文献  57-59
第二部分 经痛愈舒治疗性用药干预EMs大鼠异位内膜NF-κB表达的研究  59-84
  材料与方法  59-71
    1 实验动物与分组  59
    2 实验药品与试剂  59-61
    3 实验仪器  61-62
    4 分组与给药  62
    5 取材  62
    6 测定方法  62-70
    7 统计方法  70-71
    8 技术路线图  71
  结果  71-80
    1 经痛愈舒治疗性用药干预EMs大鼠异位内膜组织病理形态改变  71-74
    2 经痛愈舒治疗性用药干预EMs大鼠异位内膜组织NF-κB表达  74-77
    3 经痛愈舒治疗性用药干预EMs大鼠异位内膜组织NF-κB蛋白表达  77-78
    4 经痛愈舒治疗性用药干预EMs大鼠异位内膜NF-κB RNA表达  78-80
  讨论  80-82
  结论  82-83
  参考文献  83-84
第三部分 经痛愈舒预防性用药干预EMs大鼠异位内膜NF-κB表达的研究  84-97
  材料与方法  84-86
    1 实验动物与分组  84
    2 实验药品与试剂  84
    3 实验仪器  84
    4 分组与给药  84
    5 取材  84-85
    6 测定方法  85
    7 统计方法  85-86
    8 技术路线图  86
  结果  86-92
    1 经痛愈舒预防性用药干预EMs大鼠异位内膜组织病理形态改变  86-87
    2 经痛愈舒预防性用药干预EMs大鼠异位内膜NF-κB表达  87-89
    3 经痛愈舒预防性用药干预EMs大鼠异位内膜NF-κB蛋白表达  89-90
    4 经痛愈舒预防性用药干预EMs大鼠异位内膜NF-κB RNA表达  90-92
  讨论  92-96
    1 伏寒致瘀理论辨治EMs学术思想研究  92-93
    2 经痛愈舒组方理论探讨  93-94
    3 经痛愈舒预防性用药干预EMs异位内膜组织NF-κB表达  94-96
  结论  96-97
全文总结  97-99
  1 结论  97
  2 创新点  97-98
  3 展望  98-99
致谢  99-101
个人简历  101

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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