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杜仲中化学成分的提取、分离、纯化与测定
作 者: 冯薇薇
导 师: 郭方遒
学 校: 中南大学
专 业: 分析化学
关键词: 杜仲 丁香脂素二葡萄糖苷 高效液相色谱 黄酮类化合物
分类号: R284.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要
随着杜仲的应用越来越广,很多学者开始研究杜仲中的化学成分。本论文对杜仲中有效活性成分进行了大致的研究。本论文主要工作共分为三个部分:第一部分实验中,对杜仲浸膏进行有机溶剂多步萃取后,用柱层析色谱方法分离氯仿层萃取液,实验中考察了硅胶的规格、用量和展开剂的选择等相关因素。样品过两次硅胶柱后,分离得到了一个高纯度的物质,经过常规化学分析,紫外光谱图对照和核磁共振结构鉴定,确定此化合物为丁香脂素二葡萄糖苷,纯度为94.37%,以杜仲浸膏计算得率为0.58%。第二部分实验是采用多波长高效液相色谱法对杜仲中三类有效成分进行同时测定,试验中对杜仲提取条件和色谱条件进行了考察,最终确定采用210nm、240nm、280nm和320nm四个波长对桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、松脂醇二葡萄苷和绿原酸这四种物质同时进行检测。实验中还对检验方法进行了验证,数据表明此方法线性关系、重现性和稳定性都较好。第三部分实验以芦丁为标准物测定四种不同提取方法下的总黄酮得率,确定采用回流提取法。实验还采用正交实验设计对提取方法进行优化,得出最优条件为:料液比1:12(g/mL),乙醇浓度60%,提取2次,每次1.5小时。应用高效液相色谱法对各个地方的杜仲黄酮进行测定,并作主成分分析,结果表明不同产地的杜仲存在一定的差异性,且该方法可用于真假杜仲的鉴别。
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全文目录
摘要 4-5 Abstract 5-10 1 绪论 10-23 1.1 概述 10-11 1.2 杜仲的化学成分分析 11-15 1.2.1 木脂素类 13 1.2.2 环烯醚萜类 13 1.2.3 苯丙素类化合物 13 1.2.4 黄酮类化合物 13-14 1.2.5 杜仲胶 14 1.2.6 多糖 14 1.2.7 抗真菌蛋白 14-15 1.2.8 氨基酸、维生素和微量元素 15 1.3 杜仲中活性成分提取分离研究进展 15-19 1.3.1 有机溶剂提取 16 1.3.2 系统溶剂提取法 16 1.3.3 溶剂固相萃取法 16-17 1.3.4 超声提取法 17 1.3.5 微波提取法 17-18 1.3.6 酶解法 18 1.3.7 大孔树脂分离法 18-19 1.3.8 硅胶柱色谱分离法 19 1.3.9 高速逆流色谱技术 19 1.4 杜仲活性成分分析检测研究进展 19-21 1.4.1 分光光度法 20 1.4.2 薄层色谱法 20-21 1.4.3 高效液相色谱法 21 1.4.4 气相色谱 21 1.5 本论文的内容与意义 21-23 2 杜仲中丁香脂素二葡萄糖苷的分离纯化及结构表征 23-34 2.1 引言 23 2.2 实验部分 23-27 2.2.1 仪器与试剂 23-24 2.2.2 杜仲的初步分离 24-25 2.2.3 氯仿萃取液的处理 25-27 2.3 实验结果与讨论 27-33 2.3.1 展开剂的选择结果分析 27-28 2.3.2 硅胶柱色谱分离条件的分析 28-29 2.3.3 薄层色谱监测结果分析 29-30 2.3.4 高效液相色谱检测分析 30-32 2.3.5 一号③样的定性及结构鉴定 32-33 2.4 总结 33-34 3 多波长HPLC法同时测定杜仲中三类有效成分 34-43 3.1 引言 34 3.2 实验部分 34-36 3.2.1 仪器与试剂 34-35 3.2.2 色谱条件 35 3.2.3 对照品溶液的制备 35-36 3.2.4 供试品溶液的制备 36 3.3 结果与讨论 36-40 3.3.1 色谱条件的确定 36-38 3.3.2 提取条件优化 38-39 3.3.3 检验方法的验证 39-40 3.4 杜仲样品测定 40-41 3.5 本章小结 41-43 4 不同产地杜仲中的黄酮类化合物含量的差异研究 43-51 4.1 引言 43 4.2 实验部分 43-46 4.2.1 仪器与试剂 43-44 4.2.2 杜仲中黄酮的提取 44-45 4.2.3 总黄酮的测定 45 4.2.4 HPLC法测定各黄酮化合物 45-46 4.3 结果与讨论 46-50 4.3.1 杜仲提取条件的优化 46-48 4.3.2 色谱条件的优化 48-49 4.3.3 不同产地杜仲黄酮类化合物的测定 49 4.3.4 不同产地杜仲的PCA分析比较 49-50 4.4 小结 50-51 5 总结 51-52 参考文献 52-61 攻读学位期间发表的学术论文情况 61-62 致谢 62
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学 > 有效成分的分离与提取
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