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小蓟多糖的提纯、硫酸酯化及抗氧化活性研究

作 者: 聂倩
导 师: 闫桂琴
学 校: 山西师范大学
专 业: 生态学
关键词: 小蓟 多糖 纯化 硫酸酯化 抗氧化活性
分类号: R284
类 型: 硕士论文
年 份: 2014年
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内容摘要


小蓟是近年来新兴的一种食药兼用的野菜,因其富含多种活性成分,因而引起全世界的极大关注。由于小蓟具有多种生物活性,具有广泛的应用价值和前景,因而对其活性成分的提取分离就显得尤为重要。活性多糖分布广泛,主要来源于植物、动物、微生物等。多年来的药理研究表明多糖作为免疫调节剂,在抗肿瘤、抗病毒,抗感染、抗氧化、降血糖血脂等各个方面均有广泛的作用,而且安全低毒性,是现代医学与食品领域关注的研究热点之一。然而,目前对于小蓟多糖的研究却鲜有报道。本文以药食两用的传统中药材小蓟为实验材料,对小蓟多糖的提取、分离、纯化硫酸酯化改性及抗氧化活性进行了研究。主要的结论如下:1.采用索氏回流法对小蓟粉末进行脱脂,利用热水-超声辅助法进行粗多糖的提取,并通过蒽酮-浓硫酸法测定其含量,结果:脱脂率为7.925%,小蓟多糖的含量为6.43%。并以脱蛋白率及多糖损失率为指标,分别考察了Sevag法与TCA法对小蓟叶片多糖的脱除蛋白效果,结果表明:Sevag法与TCA法脱除蛋白率分别为70.52%、73.01%,多糖损失率分别为16.29%、29.74%,Sevag法为小蓟叶片多糖脱除蛋白的优选方法。利用55%、75%、95%的乙醇分别对小蓟粗多糖进行沉淀,获得了三种级分的多糖(CSPS-Ⅰ、CSPS-Ⅱ、CSPS-Ⅲ),多糖得率分别为5.75%、7.01%、8.67%。2.以静态吸附法和动态吸附法分别考察了D101、D4020、AB-8、X-5四种大孔吸附树脂对小蓟多糖吸附和解析的纯化效果,结果显示:四种树脂对小蓟多糖的纯化效果以AB-8树脂纯化为最优,且动态吸附法的吸附率与解析率明显优于静态吸附法。在以上筛选实验的基础上,通过单因素实验和正交实验优化了AB-8树脂动态吸附纯化小蓟多糖工艺条件,最佳条件为:上样液浓度为2mg/mL,上样量为20mL,流速为2.0mL/min,洗脱剂pH值为7。3.采用浓硫酸法分别对CSPS-Ⅰp、CSPS-Ⅱp、CSPS-Ⅲp进行了硫酸酯化的修饰,得酯化产物为CSPS-Ⅰps、CSPS-Ⅱps、CSPS-Ⅲps,取代度分别为0.47、0.43、0.54。并且将酯化后多糖与粗多糖和纯多糖进行了清除·OH、O--2、NO2的体外抗氧化的对比研究,结果表明小蓟多糖具有一定的清除自由基的能力,对于不同的自由基,效果不尽相同,且呈一定的量效关系。一方面,硫酸酯化多糖对·OH和NO-2的清除率较粗多糖、纯多糖有明显提高,其次为纯多糖,粗多糖的清除率最低。而硫酸酯化多糖对O-2的清除率较粗多糖、纯多糖并没有明显的提高,相比较下,纯多糖的清除率高于粗多糖的清除率。另一方面,95%乙醇醇沉多糖抗氧化活性高于75%的级分,而55%级分的抗氧化活性最低。

全文目录


摘要  3-5
Abstract  5-11
1 引言  11-29
  1.1 小蓟  11-13
    1.1.1 小蓟概述  11
    1.1.2 小蓟化学成分研究的现状  11-12
    1.1.3 小蓟营养保健及药用价值  12-13
  1.2 多糖的研究现状  13-27
    1.2.1 多糖的概述  13-15
    1.2.2 多糖的提取、分离和纯化  15-20
    1.2.3 多糖的结构研究  20-24
    1.2.4 多糖的生物活性  24-27
  1.3 论文的研究目的及意义  27-28
  1.4 论文的研究内容  28-29
2 实验材料与方法  29-38
  2.1 实验材料、试剂与仪器  29-30
    2.1.1 实验材料  29
    2.1.2 实验试剂  29
    2.1.3 实验仪器  29-30
  2.2 实验方法  30-38
    2.2.1 小蓟多糖的提取、分离与纯化  30-34
    2.2.2 小蓟多糖的硫酸酯化修饰  34-36
    2.2.3 小蓟多糖抗氧化活性的比较研究  36-38
3 结果与讨论  38-55
  3.1 小蓟多糖的提取、分离与纯化  38-47
    3.1.1 小蓟多糖含量的测定  38
    3.1.2 小蓟多糖的分离纯化  38-47
  3.2 小蓟多糖的硫酸酯化修饰  47-50
    3.2.1 小蓟多糖硫酸酯化的定性分析  47-49
    3.2.2 小蓟多糖硫酸酯化的定量分析  49-50
    3.2.3 理化性质的测定  50
  3.3 小蓟多糖抗氧化活性的比较研究  50-55
    3.3.1 小蓟多糖对羟基自由基的清除效果  50-52
    3.3.2 小蓟多糖对超氧阴离子的清除效果  52-54
    3.3.3 小蓟多糖对亚硝酸根的清除效果  54-55
4 结论  55-57
致谢  57-59
参考文献  59-67
附录  67

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学
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