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小蓟多糖的提纯、硫酸酯化及抗氧化活性研究
作 者: 聂倩
导 师: 闫桂琴
学 校: 山西师范大学
专 业: 生态学
关键词: 小蓟 多糖 纯化 硫酸酯化 抗氧化活性
分类号: R284
类 型: 硕士论文
年 份: 2014年
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内容摘要
小蓟是近年来新兴的一种食药兼用的野菜,因其富含多种活性成分,因而引起全世界的极大关注。由于小蓟具有多种生物活性,具有广泛的应用价值和前景,因而对其活性成分的提取分离就显得尤为重要。活性多糖分布广泛,主要来源于植物、动物、微生物等。多年来的药理研究表明多糖作为免疫调节剂,在抗肿瘤、抗病毒,抗感染、抗氧化、降血糖血脂等各个方面均有广泛的作用,而且安全低毒性,是现代医学与食品领域关注的研究热点之一。然而,目前对于小蓟多糖的研究却鲜有报道。本文以药食两用的传统中药材小蓟为实验材料,对小蓟多糖的提取、分离、纯化、硫酸酯化改性及抗氧化活性进行了研究。主要的结论如下:1.采用索氏回流法对小蓟粉末进行脱脂,利用热水-超声辅助法进行粗多糖的提取,并通过蒽酮-浓硫酸法测定其含量,结果:脱脂率为7.925%,小蓟多糖的含量为6.43%。并以脱蛋白率及多糖损失率为指标,分别考察了Sevag法与TCA法对小蓟叶片多糖的脱除蛋白效果,结果表明:Sevag法与TCA法脱除蛋白率分别为70.52%、73.01%,多糖损失率分别为16.29%、29.74%,Sevag法为小蓟叶片多糖脱除蛋白的优选方法。利用55%、75%、95%的乙醇分别对小蓟粗多糖进行沉淀,获得了三种级分的多糖(CSPS-Ⅰ、CSPS-Ⅱ、CSPS-Ⅲ),多糖得率分别为5.75%、7.01%、8.67%。2.以静态吸附法和动态吸附法分别考察了D101、D4020、AB-8、X-5四种大孔吸附树脂对小蓟多糖吸附和解析的纯化效果,结果显示:四种树脂对小蓟多糖的纯化效果以AB-8树脂纯化为最优,且动态吸附法的吸附率与解析率明显优于静态吸附法。在以上筛选实验的基础上,通过单因素实验和正交实验优化了AB-8树脂动态吸附纯化小蓟多糖工艺条件,最佳条件为:上样液浓度为2mg/mL,上样量为20mL,流速为2.0mL/min,洗脱剂pH值为7。3.采用浓硫酸法分别对CSPS-Ⅰp、CSPS-Ⅱp、CSPS-Ⅲp进行了硫酸酯化的修饰,得酯化产物为CSPS-Ⅰps、CSPS-Ⅱps、CSPS-Ⅲps,取代度分别为0.47、0.43、0.54。并且将酯化后多糖与粗多糖和纯多糖进行了清除·OH、O--2、NO2的体外抗氧化的对比研究,结果表明小蓟多糖具有一定的清除自由基的能力,对于不同的自由基,效果不尽相同,且呈一定的量效关系。一方面,硫酸酯化多糖对·OH和NO-2的清除率较粗多糖、纯多糖有明显提高,其次为纯多糖,粗多糖的清除率最低。而硫酸酯化多糖对O-2的清除率较粗多糖、纯多糖并没有明显的提高,相比较下,纯多糖的清除率高于粗多糖的清除率。另一方面,95%乙醇醇沉多糖抗氧化活性高于75%的级分,而55%级分的抗氧化活性最低。
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全文目录
摘要 3-5 Abstract 5-11 1 引言 11-29 1.1 小蓟 11-13 1.1.1 小蓟概述 11 1.1.2 小蓟化学成分研究的现状 11-12 1.1.3 小蓟营养保健及药用价值 12-13 1.2 多糖的研究现状 13-27 1.2.1 多糖的概述 13-15 1.2.2 多糖的提取、分离和纯化 15-20 1.2.3 多糖的结构研究 20-24 1.2.4 多糖的生物活性 24-27 1.3 论文的研究目的及意义 27-28 1.4 论文的研究内容 28-29 2 实验材料与方法 29-38 2.1 实验材料、试剂与仪器 29-30 2.1.1 实验材料 29 2.1.2 实验试剂 29 2.1.3 实验仪器 29-30 2.2 实验方法 30-38 2.2.1 小蓟多糖的提取、分离与纯化 30-34 2.2.2 小蓟多糖的硫酸酯化修饰 34-36 2.2.3 小蓟多糖抗氧化活性的比较研究 36-38 3 结果与讨论 38-55 3.1 小蓟多糖的提取、分离与纯化 38-47 3.1.1 小蓟多糖含量的测定 38 3.1.2 小蓟多糖的分离纯化 38-47 3.2 小蓟多糖的硫酸酯化修饰 47-50 3.2.1 小蓟多糖硫酸酯化的定性分析 47-49 3.2.2 小蓟多糖硫酸酯化的定量分析 49-50 3.2.3 理化性质的测定 50 3.3 小蓟多糖抗氧化活性的比较研究 50-55 3.3.1 小蓟多糖对羟基自由基的清除效果 50-52 3.3.2 小蓟多糖对超氧阴离子的清除效果 52-54 3.3.3 小蓟多糖对亚硝酸根的清除效果 54-55 4 结论 55-57 致谢 57-59 参考文献 59-67 附录 67
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学
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