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不同产地连钱草药材质量分析和比较的研究

作　者: 黄天赐
导　师: 张立群
学　校: 湖北中医药大学
专　业: 中药学
关键词: 连钱草 黄酮 有机酸 三萜酸 挥发性成分
分类号: R282.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


连钱草药材为为唇形科多年生草本植物活血丹Glechoma longituba (Nakai) Kupr.的干燥地上部分,味辛、微苦,性微寒,归肝、肾、膀胱经。功擅利湿通淋,清热解毒,散瘀消肿。适用于热淋、石淋、湿热黄疸、疮痈肿痛、跌打损伤。目前对不同产地不同部位连钱草药材中黄酮、有机酸多组分含量同时测定的研究尚未见报道,不同产地不同部位三萜酸类成分的比较研究也较少,挥发性成分的研究有报道,但尚未见多个不同产地挥发性化学成分的GC-MS比较研究。因此本课题对多个不同产地不同部位连钱草药材黄酮、有机酸、三萜酸类成分进行系统的比较研究,对多个不同产地的连钱草药材挥发性成分进行比较研究。本课题是在连钱草相关化学成份研究相对较完整后,以南昌桑海产连钱草药材为研究对象,对其中主要所含的黄酮、有机酸类成分进行液质验证与峰的归属,再以黄酮、有机酸类成分的提取效率为指标,先用单因素实验进行试验,以明确其中黄酮、有机酸类成分的变化规律,再采用L9(34)正交实验法进行研究,最终确定连钱草药材中黄酮,有机酸类成分的最佳前处理方法为用80%甲醇,30倍体积,提取45分钟,提取一次。采用HPLC法测定了13个不同产地不同部位连钱草药材中黄酮、有机酸类的含量,发现同一成分在各个不同产地里面含量差异较大；在测定不同部位含量时,发现叶中黄酮、有机酸类成份的含量比茎高,同时对13个产地的色谱图进行系统分析,通过方法学考察,建立了连钱草药材黄酮、有机酸类成分的指纹图谱。通过单因素实验对连钱草中主要所含的三萜酸类成分—齐墩果酸、熊果酸进行提取条件的考察,确定的最佳提取条件为用乙醇20ml,超声60min提取一次即可。采用HPLC法测定了齐墩果酸、熊果酸在各个不同产地的含量,结果发现,与黄酮、有机酸相类似,含量差别较大；在对各个不同产地不同部位连钱草中齐墩果酸、熊果酸测定时发现：同样也是在叶中齐墩果酸,熊果酸的含量比其在茎中的含量高。最后,我们采用了直接简便的水蒸气蒸馏法提取连钱草中的挥发性成分,对13个不同产地的连钱草药材挥发性成分进行了系统GC-MS的比较研究,结果发现,在各个产地的连钱草药材中,挥发性化学成分种类基本相似,但也有差异,在其面积百分含量上差别也较大,可能是不同采收时期,不同产地,不同的保存环境等造成,其中棕榈酸(n-Hexadecanoic acid)在各个产地中所占的比例都比较大,是其挥发性成分中的主要部分。本课题系统地研究了不同产地不同部位连钱草药材中黄酮、有机酸、三萜酸类成分的含量,对连钱草中挥发性成分也进行了比较研究,为为其药材产地鉴别,资源的评价与合理利用,药材的临床使用及后期的研究,提供了科学依据。

全文目录


摘要  9-11
ABSTRACT  11-14
前言  14-15
第一部分 连钱草药材黄酮、有机酸类成份的研究  15-59
  第一节 液质联用技术定性分析连钱草中的化学成份  15-22
    1 仪器与试药  15-16
      1.1 仪器  15
      1.2 试药  15-16
    2 方法与结果  16-21
      2.1 色谱条件  16
      2.2 溶液的制备  16-17
        2.2.1 对照品溶液的制备  16
        2.2.2 样品溶液的制备  16-17
      2.3 连钱草中化学成分定性分析结果  17-21
    3. 讨论  21-22
  第二节 连钱草药材黄酮、有机酸类成分前处理的研究  22-31
    1 仪器与试药  22-23
      1.1 仪器  22
      1.2 试药  22-23
    2 方法与结果  23-30
      2.1 色谱条件  23
      2.2 连钱草药材前处理方法的考察  23-30
        2.2.1 单因素试验初步考察药材的前处理方法  23-27
        2.2.2 正交实验优化药材前处理方法的考察  27-29
        2.2.3 前处理考察结果  29-30
    3 讨论  30-31
  第三节 HPLC法测定连钱草中黄酮、有机酸类成份的含量  31-44
    1 仪器与试药  31
      1.1 仪器  31
      1.2 试药  31
    2 方法与结果  31-40
      2.1 色谱条件  31-32
      2.2 溶液的制备  32-33
        2.2.1 新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、木犀草苷、木犀草素、芹菜素对照品溶液的制备  32
        2.2.2 迷迭香酸对照品溶液的制备  32
        2.2.3 样品溶液的制备  32-33
      2.3 方法学考察  33-38
        2.3.1 线性关系考察  33-36
        2.3.2 精密度试验  36
        2.3.3 稳定性试验  36-37
        2.3.4 重现性试验  37
        2.3.5 加样回收试验  37-38
      2.4 样品测定  38-40
        2.4.1 药材全草测定  39
        2.4.2 叶的测定  39-40
        2.4.3 茎的测定  40
    3 讨论  40-44
  第四节 连钱草药材黄酮、有机酸类成份HPLC指纹图谱的的研究  44-59
    1. 仪器与试药  45
      1.1 仪器  45
      1.2 试药  45
    2. 方法与结果  45-57
      2.1 色谱条件  45-46
      2.2 对照品溶液的制备  46
      2.3 药材样品溶液的制备  46
      2.4 方法学考察  46-50
        2.4.1 稳定性试验  47
        2.4.2 精密度试验  47-49
        2.4.3 重复性试验  49-50
      2.5 指纹图谱的建立及分析  50-57
        2.5.1 指纹图谱的采集  50-54
        2.5.2 共有指纹峰的标定  54-56
        2.5.3 共有峰的归属  56
        2.5.4 相似度评价  56-57
    3 讨论  57-59
第二部分 连钱草中三萜酸类成份HPLC含量测定的研究  59-70
  第一节 三萜酸类成分前处理的研究  59-64
    1. 仪器与试药  59-60
      1.1 仪器  59
      1.2 试药  59-60
    2. 方法与结果  60-62
      2.1 色谱条件  60-61
      2.2 前处理方法的考察  61-62
        2.2.1 提取方法与提取溶剂的确定  61
        2.2.2 浸泡时间的考察  61-62
        2.2.3 超声时间的考察  62
        2.2.4 提取溶剂用量的确定  62
    3 讨论  62-64
  第二节 HPLC法测定连钱草中三萜酸类的含量  64-70
    1. 仪器与试药  64
      1.1 仪器  64
      1.2 试药  64
    2. 方法与结果  64-68
      2.1 色谱条件  64
      2.2 溶液的制备  64
        2.2.1 齐墩果酸、熊果酸混合对照品溶液的制备  64
        2.2.2 供试品溶液的制备  64
      2.3 方法学考察  64-67
        2.3.1 线性关系考察  64-65
        2.3.2 精密度试验  65-66
        2.3.3 稳定性试验  66
        2.3.4 重复性试验  66
        2.3.5 回收率试验  66-67
      2.4 样品含量测定  67-68
        2.4.1 药材全草测定  67
        2.4.2 茎的测定  67
        2.4.3 叶的测定  67-68
    3 讨论  68-70
第三部分 连钱草药材中挥发性成份GC-MS的研究  70-93
  1. 仪器与试药  70
    1.1 仪器  70
    1.2 试药  70
  2. 方法与结果  70-91
    2.1 供试品溶液的制备  70
    2.2 色谱条件  70-71
    2.3 结果  71-91
  3 讨论  91-93
讨论  93-96
  1. 选题依据  93-94
  2. 关于黄酮、有机酸类成分的讨论  94
  3. 关于三萜酸类成分研究的讨论  94-95
  4. 关于挥发油类成分的研究  95-96
结语  96-97
参考文献  97-101
附录  101-111
攻读硕士期间发表论文情况  111-112
致谢  112

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药材 > 药材鉴定
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