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黄芪四君子汤对肝癌抗癌效应及微环境免疫调控的研究

作 者: 杨欣
导 师: 李湧健
学 校: 南京中医药大学
专 业: 中医学
关键词: 健脾益气法 黄芪四君子汤 肿瘤微环境 免疫
分类号: R273
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要


目的:本课题通过观察黄芪四君子汤对肝癌荷瘤小鼠的抗癌作用、整体及局部免疫状态的影响,分析其对肿瘤微环境改善的机制,揭示健脾益气法治疗肝癌的特色,为临床肿瘤治疗的合理应用提供实验基础和依据。方法:C57BL/6小鼠肝脏原位接种1×106个Hepal-6肝癌细胞建立肝癌小鼠模型,观察:1)肝癌模型组与各重要荷瘤小鼠脾、胸腺指数及抑瘤率,分析不同剂量黄芪四君子汤对肝癌小鼠肿瘤和免疫系统的影响;2)各组荷瘤小鼠外周血、脾、肿瘤组织、癌旁肝组织中淋巴细胞及其细胞亚群CD4+、CD8+比例,以及NK1.1+细胞及Treg细胞的比例,分析不同剂量黄芪四君子汤对肝癌小鼠整体和肿瘤微环境免疫状态的影响。结果:1、黄芪四君子汤能够抑制肝癌荷瘤小鼠的实体瘤生长,且抑制率均大于30%,并具有统计学意义(P<0.05),黄芪四君子汤对肝癌荷瘤小鼠的免疫器官具有保护作用,中药组脾脏及胸腺指数明显上升,与顺铂组比有明显差异(P<0.01)。2、黄芪四君子汤在肝癌荷瘤小鼠外周血、脾脏、癌旁中CD3+CD4+T标记率、CD3+CD8+T标记率、CD4+/CD8+比值均有上升,差异具有显著性(P<0.05),提示黄芪四君子汤可以增强肝癌荷瘤小鼠整体及肝癌微环境中的特异性抗肿瘤免疫功能。3、黄芪四君子汤对肝癌荷瘤小鼠脾脏、癌旁组织中NK1.1标记率均有上升,差异具有显著性(P<0.05),提示黄芪四君子汤可以增强肝癌荷瘤小鼠整体及肝癌微环境的免疫监视功能及固有抗肿瘤免疫功能4、黄芪四君子汤对肝癌荷瘤小鼠外周血、脾脏、肝癌组织、癌旁肝组织中Treg细胞标记率均下降,差异具有显著性(P<0.05),提示黄芪四君子汤可以降低肝癌荷瘤小鼠整体及肝癌微环境中的免疫抑制状态。结论:黄芪四君子汤对肝癌有抑制作用,对免疫器官具有保护和促进发挥免疫功能的作用,肝癌荷瘤小鼠的整体与肿瘤局部微环境的免疫状态表现一致,随着药物剂量的增加,肝癌荷瘤小鼠的免疫功能逐渐增强。

全文目录


目录  5-6
中文摘要  6-7
Abstract  7-9
前言  9-11
第—部分 黄芪四君子汤对肝癌的抗癌效应及免疫微环境调控的研究  11-29
  1 实验材料  11-13
    1.1 实验动物  11
    1.2 细胞株  11
    1.3 实验用药  11
    1.4 实验用药制备  11-12
    1.5 主要试剂与仪器  12-13
  2 实验方法  13-16
    2.1 原位植入肝癌小鼠模型的建立  13-14
    2.2 分组及给药  14
    2.3 主要指标检测方法  14-16
    2.4 统计学分析  16
  3 结果  16-29
    3.1 抗癌效应  16-17
    3.2 对免疫器官的影响  17-19
    3.3 对整体免疫环境的影响  19-22
    3.4 对肿瘤微环境免疫的影响  22-25
    3.5 整体免疫与肿瘤微环境免疫状体比较  25-29
第二部分 讨论  29-34
  1 黄芪四君子汤治疗肝癌的中医理论基础  29-30
  2. 黄芪四君子汤抗肝癌机制的探讨  30-34
    2.1 黄芪四君子汤中各药的功效  30-31
    2.2 对机体免疫机能的影响  31-34
结语  34-36
  1. 结论  34
  2. 问题与展望  34-36
附录  36-41
  1 文献综述  36-40
    参考文献  38-40
  2 攻读硕士学位期间取得的学术成果  40-41
参考文献  41-43
致谢  43

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中医肿瘤科
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