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抗白灵霜组分对小鼠B16黑素瘤细胞TYR、MITF的mRNA及相应蛋白表达的影响

作　者: 徐漫远
导　师: 闵仲生
学　校: 南京中医药大学
专　业: 中医学
关键词: 抗白灵霜(KBL) 小鼠B16黑素瘤细胞酪氨酸酶(TYR) 小眼畸形相关转录因子(MITF) 黑素合成
分类号: R273
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

研究目的通过了解抗白灵霜(Kang Bai Ling,简称KBL)组分对酪氨酸酶(TYR)、小眼畸形相关转录因子(MITF)的mRNA及相应蛋白表达的影响,探讨KBL促黑素合成的可能作用机制,进而阐明抗白灵霜治疗白癜风的分子生物学理论基础,从而为临床应用提供依据。研究方法体外培养的小鼠B16黑素瘤细胞,用5mg/ml、15mg/ml、25mg/ml三个浓度的抗白灵霜组分的水提浸膏、醇提浸膏及空白对照组(未加药物)分别作用于小鼠B16黑素瘤细胞24h,应用Real time-PCR及Western Blot法,检测不同药物干预和浓度对TYR、MITF的mRNA及相应蛋白表达的影响。研究结果1.抗白灵霜组分水提浸膏的三个浓度作用下,TYR mRNA表达水平均提高(P<0.05),抗白灵霜组分水提浸膏的三个浓度对TYR蛋白均有显著性上调作用(P<0.01),呈浓度依赖(P<0.01)。2.抗白灵霜组分醇提浸膏的三个浓度对TYR的mRNA和蛋白水平均有显著性上调作用(P<0.01),呈浓度依赖(P<0.01)。3.抗白灵霜组分水提浸膏的三个浓度作用下,MITF mRNA表达水平均提高(P<0.05),抗白灵霜组分水提浸膏的三个浓度对MITF蛋白亦有显著性上调作用(P<0.01),呈浓度依赖(P<0.01)。4.抗白灵霜醇组分的醇提浸膏三个浓度对MITF的mRNA和蛋白水平亦有显著性上调作用(P<0.01),呈浓度依赖(P<0.01)。研究结论基于前期研究和本研究结果,我们推测：抗白灵霜组分促黑素合成可能与上调酪酪氨酸酶表达水平、增加其活性相关,同时也可能通过直接调节核转录因子MITF的基因转录和表达,继而介导激活酪氨酸酶家族成员启动子,激活多种参与黑素合成的酶(如TYR)以促黑素合成。实验结果为中药抗白灵霜临床应用于治疗白癜风提供了理论基础和实验依据,从而进一步指导临床用药。

全文目录

目录  5-7
摘要  7-8
Abstract  8-9
前言  9-10
第一章理论研究  10-17
  1 白瘢风的中医研究进展  10-13
    1.1 古代文献对白癜风病名的阐述  10
    1.2 白癜风病因病机的认识  10
    1.3 白癜风中医药治疗进展  10-13
  2 白癜风的西医研究进展  13-17
    2.1 发病机制  13
    2.2 药物治疗  13-14
    2.3 紫外线光疗治疗  14-15
    2.4 联合治疗  15-16
    2.5 外科治疗  16-17
第二章导师闵仲生主任治疗白癜风临床经验总结  17-19
  1 白癜风辨证  17
    1.1 强调辨证分型  17
    1.2 重视脏腑辨证  17
  2 白癜风临床治疗  17-19
    2.1 药物治疗  17-18
    2.2 光疗与外科治疗  18
    2.3 健康宣教及心理治疗  18-19
第三章实验研究  19-37
  1 前期体外实验研究  19
  2 KBL组分促黑素合成涉及调节酪氨酸酶  19-28
    2.1 仪器与材料  19-21
    2.2 实验方法  21-26
    2.3 实验结果  26-28
  3 KBL组分在黑素合成中对MITF的调节作用  28-32
    3.1 仪器与材料  28
    3.2. 实验方法  28-29
    3.3 实验结果  29-32
  4 讨论  32-37
    4.1 抗白灵霜药物组分  32
    4.2 白癜风发病与酪氨酸酶家族及MITF关系  32-33
    4.3 实验方法学的选择  33-34
    4.4 本课题研究结果的分析  34
    4.5 本课题与相关体外研究的分析  34-35
    4.6 不足与展望  35-37
结语  37-38
参考文献  38-42
攻读硕士学位期间取得的学术成果  42-43
致谢  43

抗白灵霜组分对小鼠B16黑素瘤细胞TYR、MITF的mRNA及相应蛋白表达的影响

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