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卵巢过度刺激综合征临床分析及姜黄素对模型大鼠的实验研究

作　者: 茹雪
导　师: 张昌军
学　校: 湖北中医药大学
专　业: 中西医结合临床
关键词: 卵巢过度刺激综合征毛细血管通透性姜黄素发病机理
分类号: R-332
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

卵巢过度刺激综合征(ovarian hyperstimulation syndrome, OHSS)是辅助生殖技术中常见并发症,病情发展快,来势凶猛,严重者可出现血液浓缩、血栓形成、肝肾功能损伤,甚至可危及生命。发病机制尚未完全阐明,治疗上多以预防为主,缺乏一种行之有效的治疗方法,因此探讨OHSS发病机理,寻找与OHSS发生相关的高危因素,研究一种安全、无毒的特效药物是防治OHSS的迫切需要。本论文分临床分析及实验研究两部分。1、卵巢过度刺激综合征相关因素临床分析目的：探讨不同程度OHSS发生、发展的相关因素及防治方法。方法：回顾性分析十堰市人民医院生殖医学中心自2010年1月～2012年12月期间接受辅助生殖技术助孕因发生OHSS而住院治疗的患者,根据临床表现分为轻、中、重度OHSS,对各组患者的临床资料、促排卵情况及胚胎移植情况进行差异性比较。结果：1.在近三年的3313个超排卵周期中有73例发生OHSS,发生率为2.2%,其中轻度发生率为0.81%,中度为0.99%,重度0.39%。2.三组OHSS患者的年龄无明显差异,重度OHSS患者住院时间、腹围及体重增加量较轻度OHSS患者有显著性差异(P<0.05)。虽不同程度的OHSS不孕原因分布无统计学差异(P=0.143),但PCOS患者发生重度OHSS发生率明显高于轻、中度OHSS组(P<0.05)。根据发病时间分类,早发组出现重度OHSS发生率明显高于晚发组,而晚发组倾向于发生轻、中度OHSS,中、重度OHSS发生率与OHSS发病时间有密切关系(X2=14.2,P<0.05)。3.促排卵后,中、重度OHSS组卵巢增大平均直径、中、小卵泡数及HCG日E2量明显高于轻度OHSS组(P<0.05),但三组间基础窦卵泡数、获卵数无明显差异。4.73例OHSS患者中有19例取消移植,总取消率为26.03%。OHSS各组在受精方式、优胚数、优胚率上无显著性差异(P>0.05)。妊娠组重度OHSS发生率明显高于未妊娠组(P<0.05)。结论：PCOS病史、中小卵泡数量以及HCG日E2水平、妊娠是OHSS发生的高危因素,可以预测OHSS发生及判断其严重程度,及早给予相应处理对有效预防或减轻OHSS程度有一定帮助。2、姜黄素对卵巢过度刺激综合征模型大鼠血管通透性的实验研究目的：通过观察中药成分姜黄素对OHSS模型大鼠雌二醇(E2)、血清肾素-血管紧张素系统(RAS)及卵巢组织中VEGF/VEGFR系统的影响,探讨不同浓度姜黄素治疗卵巢过度刺激综合征的疗效及降低毛细血管通透性的发生机制。方法：选择22日龄雌性SD大鼠,随机分为7组,各组分别给予Omg/kg、10mg/kg、25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg、250mg/kg浓度姜黄素灌胃,正常组则以同体积药物溶剂羧甲基纤维素钠灌服,持续用药7天,每天1次。灌胃同时除正常组外其他各组均皮下注射孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotropin, PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin, HCG)建立OHSS模型。观察各组大鼠治疗后卵巢组织形态学变化、测定腹腔毛细血管通透性和E2水平,采用ELISA法检测血清中肾素、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及卵巢组织中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、血管内皮生长因子受体(VEGFR-1、VEGFR-2)含量,Western Blot法检测VEGFR-2表达情况。结果：1.卵巢形态学观察造模各组卵巢组织肉眼观体积明显增大,重量增加近10倍。镜下可见模型组卵巢明显黄素化,呈囊样改变,卵巢内分隔规则,囊形态规则,间质水肿。姜黄素干预后,卵巢重量有所减少,黄素化程度有所减轻,黄体直径减小,间质水肿程度减轻,其中最明显的是50mg/kg姜黄素组。2.腹水及腹腔毛细血管通透性与正常组相比,Omg/kg组中腹腔回收液量、体重增加率和腹水EB含量均明显增加。经姜黄素干预后,50mg/kg浓度组中腹腔回收液量、体重增加率和腹水EB含量均低于其余浓度姜黄素组。体重增加率、腹腔回收液量与血管通透性呈正比。3.血清中E2和肾素、AngⅡ测定Omg/kg组中血清E2、肾素、AngⅡ水平均显著高于正常组(P<0.01),姜黄素干预后,血清中三者含量均有所降低,其中E2和AngⅡ含量在50mg/kg浓度时最少,治疗作用最显著(P<0.01)。血清中E2和RAS含量与卵巢重量、腹腔回收液量具有显著线性相关关系(P<0.05)。4.卵巢组织中VEGF、VEGFR-1、VEGFR-2测定造模后Omg/kg组的大鼠卵巢组织中VEGF和受体1、2的含量均高于正常组,但VEGFR-1水平与正常组比较无显著性差异(P<0.05)。经姜黄素治疗后,VEGF和VEGFR-2的含量以姜黄素在50mg/kg浓度时最少,有显著性差异(P<0.01), VEGFR-1的含量各组无显著性差异(P>0.05)。Western Blot目的蛋白表达趋势与ELISA法检测VEGFR-2的结果相符合(Omg/kg组>姜黄素组>正常组)。结论：1.姜黄素对E2存在双向调节作用,50mg/kg浓度时抗OHSS雌激素生成作用最强,而雌激素样作用最低。2.RAS与OHSS存在一定关系,姜黄素主要通过减少AngⅡ含量抑制RAS活性。不同浓度间存在生物活性差异性。3. VEGF、VEGFR-2与OHSS发生关系密切,姜黄素主要通过降低VEGFR-2表达抑制血管通透性。姜黄素对血管通透性作用具有双向调节性,在浓度为50mg/kg时,抑制血管通透性作用达到最大,过高或过低均会影响疗效。为探索姜黄素抑制血管通透性作用的最佳浓度提供了实验依据。

全文目录

摘要  5-8
Abstract  8-13
英文缩略语  13-14
前言  14-16
实验一卵巢过度刺激综合征相关因素临床分析  16-31
  材料与方法  16-17
    1. 研究对象和方法  16-17
    2. 标本测定  17
    3. 统计方法  17
  结果  17-20
    1. 临床资料  17-18
    2. 促排卵与OHSS发生的相关性  18-19
    3. 体外受精胚胎移植与OHSS发生的相关性  19
    4. 妊娠对OHSS程度的影响  19-20
  讨论  20-25
    1. OHSS发病机制  20-23
    2. OHSS发生的高危因素  23-24
    3. OHSS治疗  24-25
  结论  25-27
  参考文献  27-31
实验二姜黄素对卵巢过度刺激综合征模型大鼠血管血管通透性的实验研究  31-51
  材料与方法  31-38
    1. 材料  31-33
    2. 实验方法  33-38
    3. 统计学分析  38
  结果  38-42
    1. 一般情况  38
    2. 卵巢形态学  38-39
    3. 腹水和腹腔通透性  39
    4. 姜黄素对血清中E_2和RAS系统影响  39-40
    5. 姜黄素对卵巢组织中VEGF/VEGFR系统影响  40-42
    6. 各检测指标与血管通透性关系  42
  讨论  42-47
    1. OHSS动物模型  42-43
    2. 中药成分姜黄素对OHSS的治疗作用  43-47
  结论  47-48
  参考文献  48-51
结语与展望  51-52
附录  52-64
  附图  52-55
  综述  55-63
    参考文献  60-63
  在校期间发表论文  63-64
致谢  64

卵巢过度刺激综合征临床分析及姜黄素对模型大鼠的实验研究

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