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通过观察VEGF、BGP与AKP指标变化及关系研究通络补肾法治疗激素性股骨头坏死

作　者: 韩振华
导　师: 江蓉星
学　校: 成都中医药大学
专　业: 中医骨伤
关键词: 通络补肾法 激素性股骨头缺血性坏死 血管内皮细胞生长因子 碱性磷酸酶 骨钙素
分类号: R274.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


目的：通过观察VEGF、BGP与AKP指标变化及关系研究通络补肾法治疗激素性股骨头缺血性坏死,为通络补肾法防治激素性股骨头坏死提供理论依据。方法：96只日本大耳兔分为两组,正常组24只,造模组72只,贺氏造模法制造激素性股骨头坏死模型,6周造模后,每组随机抽取8只兔子,检测,造模成功。造模组随机分组4组(高、中、低剂量,模型组),共5组。治疗组灌服活血通络汤混悬液,模型组、正常组蒸馏水灌服。给药的第6、8周每组随机抽取8只兔子进行血浆VEGF定量分析、AKP活性及BGP水平及股骨头VEGFmRNA基因表达的定位定量、AKP含量、BGP含量检测与分析,股骨头病理切片、电镜形态的观察。结果：1、给药后第6、8周,与正常组比较,模型组家兔血浆AKP含量极显著增大(P<0.01),股骨头空骨陷窝率明显升高(P<0.01)。与模型组比较,活血通络汤组家兔血浆AKP含量极显著降低(P<0.01),股骨头空骨陷窝率降低(P<0.05)；高、中、低剂量组间比较差异显著(P<0.05)2、给药后第6、8周,与正常组比较,模型组家兔血浆BGP含量极显著减小(P<0.01),股骨头空骨陷窝率明显升高(P<0.01)。与模型组比较,活血通络汤组家兔血浆BGP含量均有显著升高(P<0.05),股骨头空骨陷窝率降低(P<0.05)；高、中、低剂量组间比较差异显著(P<0.05)3、给药后第6、8周,与正常组比较,模型组家兔血浆VEGF含量极显著增大(P<0.01),股骨头空骨陷窝率明显升高(P<0.01)。与模型组比较,活血通络汤组家兔血浆VEGF含量均有显著降低(P<0.05),股骨头空骨陷窝率降低(P<0.05)；高、中、低剂量组间比较差异显著(P<0.05)结论：活血通络汤能够明显降低SANFH家兔的血浆和股骨头组织VEGF、AKP含量及空骨陷窝率；能够明显升高血浆和股骨头组织的BGP含量；促进SANFH家兔股骨头的坏死骨的修复和股骨头的新生骨的生成,且与剂量、时间呈正相关；VEGF的表达水平与AKP的表达水平是呈正相关,与BGP的表达水平是呈负相关。

全文目录


摘要  4-5
ABSTRACT  5-7
英文缩略词对照表  7-8
前言  8-9
上篇 文献研究  9-21
  1. 传统医学对该病的认识  9-11
    1.1 萌芽时期  9
    1.2 酝酿时期  9-10
    1.3 形成时期  10
    1.4 集大成时期  10-11
    1.5 现代中医学者的认识  11
  2. 现代医家对该病的认识  11-14
    2.1 血管病变学说  11-12
    2.2 代谢紊乱学说  12
    2.3 血液高凝状态学说  12-13
    2.4 骨丢失学说  13
    2.5 骨内高压学说  13
    2.6 骨细胞死亡学说  13-14
  3. 观察指标的确立  14-16
    3.1 血管内皮细胞生长因子(VEGF)  14-15
    3.2 碱性磷酸酶(AKP)  15-16
    3.3 骨钙素(BGP)  16
  4. 动物模型的建立  16-18
  5. 活血通络汤方义分析及药理研究  18-21
下篇 实验研究  21-48
  1. 实验动物、药物及器材  21-23
    1.1 动物来源  21
    1.2 受试药物来源  21-22
    1.3 实验器材来源  22-23
      1.3.1 化学药品  22
      1.3.2 检测试剂盒  22-23
      1.3.3 实验仪器  23
  2. 实验分组及方法步骤  23-26
    2.1 动物分组  23
    2.2 造模方法  23-24
    2.3 造模后指标检测  24
    2.4 给药方法  24
    2.5 给药后指标检测  24-25
    2.6 统计方法  25-26
  3. 指标的检测  26-32
    3.1 血浆AKP、BGP及VEGF含量检测  26
      3.1.1 血液处理  26
      3.1.2 指标检测  26
    3.2 股骨头组织形态学及电镜观察  26-27
    3.3 股骨头VEGFmRNA基因表达、AKP及BGP含量检测  27-32
      3.3.1 免疫组化操作步骤  27-28
      3.3.2 股骨头VEGFmRNA表达  28-32
  4. 实验观察结果  32-45
    4.1 动物情况  32
    4.2 股骨头空骨陷窝率对比  32-34
    4.3 股骨头病理形态学观察  34-36
      4.3.1 给药第6周各实验组家兔股骨头病理形态  34-35
      4.3.2 给药第8周各实验组家兔股骨头病理形态  35-36
    4.4 血浆AKP水平及股骨头AKP免疫组化积分光密度对比  36-39
    4.5 血浆BGP水平及股骨头BGP免疫组化积分光密度对比  39-42
    4.6 血浆VEGF含量及股骨头VEGFmRNA含量对比  42-45
  5 实验结果讨论  45-48
    5.1 模型建立是否成功的讨论  45-46
    5.2 空骨陷窝率结果讨论  46
    5.3 AKP结果讨论  46-48
    5.4 VEGF、BGP、AKP三者之间的关系  48
结论  48-49
问题与展望  49-51
附图  51-56
  1、给药6周股骨头AKP免疫组化积分光密度观察图片  51-52
  2、给药8周股骨头AKP免疫组化积分光密度观察图片  52-53
  3、给药6周股骨头空骨陷窝电镜观察图片  53-54
  4、给药8周股骨头空骨陷窝电镜观察图片  54-56
参考文献  56-60
附录：综述  60-66
  参考文献  64-66
致谢  66-67
在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果  67-68

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中医骨伤科 > 现代医学骨伤科疾病
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