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镉暴露对未成年雄性小鼠的生殖毒性研究
作 者: 李颖超
导 师: 唐小江
学 校: 山西医科大学
专 业: 劳动卫生与环境卫生学
关键词: 镉 小鼠 生殖毒性 生育能力 睾丸 胎鼠
分类号: R114
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要
目的探索镉染毒对未成年雄性小鼠生殖系统的损伤及生育能力的影响,为进一步研究镉的生殖毒性积累基础资料。方法96只四周龄SPF级雄性NIH小鼠随机分为正常对照组,低、中、高剂量组,每组24只。按照总剂量分别为0、0.84、1.68、3.36mg Cd/kg体重腹腔注射生理盐水或氯化镉(CdCl2)和β-巯基乙醇(ME)的混合溶液(二者浓度比为1:20),1次/天,连续5天。给药结束后的第30,60,90,120天,各组分别随机取6只动物,进行如下处理:1.交配能力检测:将雌雄小鼠按1:1合笼,雌鼠放入后,记录雄鼠首次捕捉雌鼠的时间即捕捉潜伏期及20min内雄鼠捕捉雌鼠的次数。2.雄鼠生殖毒性检测:①采血,离心取血清,测定血清睾酮(T)。②解剖取脑、心、肺、肝、脾、肾、睾丸,测脏器系数。③留取右肾、右睾丸和部分肝,用原子吸收光谱仪(AAS)测定其中的镉含量。④取右侧附睾观察精子畸形率。⑤固定肝脏、脾脏、左肾、左睾丸和左附睾进行病理检查。3.雌鼠交配率和受孕率检测:将雄鼠与雌鼠按1:2合笼,发现阴道栓当天记为妊娠第0天(GDO),合笼12d后计算雌鼠交配率,在GD14,确定成功怀孕雌鼠的数量,计算受孕率。4.胎鼠检测:每组随机取一半受孕雌鼠,于GD17处死取出胎鼠。进行一般观察,并测量体长、尾长及体重。再对胎鼠分别进行骨骼畸形和内脏畸形检查。5.仔鼠检测:让每组另一半受孕雌鼠自然分娩,仔鼠21日龄时称重,并观察性别。6.窝平均活胎数统计:对各批次各组孕鼠的窝平均活胎数(包括胎鼠和仔鼠)进行统计。结果1.交配能力检测结果:30,60,90,120d批次染镉雄鼠的交配能力与对照组相比未出现显著变化。2.雄鼠生殖毒性检测结果:①血清T检测结果:30d,60d,120d批次的1.68、3.36mg Cd/kg组雄鼠的血清T含量显著低于正常对照(P<0.05),90d批次的所有染镉雄鼠血清T含量均显著低于正常对照组(P<0.05)。②120d批次的0.84mg Cd/kg组肝脏、肺脏,1.68mg Cd/kg组肝脏的脏器系数较正常对照组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。③脏器镉含量测定结果:各批次染镉雄鼠肝、肾、睾丸镉含量均显著高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。④精子畸形率:各批次染镉雄鼠精子畸形率与正常对照组相比,均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。⑤脏器病理检查结果:染镉动物肾脏病理变化主要以间质炎细胞浸润,肾小管上皮细胞变性,慢性肾盂肾炎为主。肝脏的病理改变主要有:局灶性炎细胞浸润,肝脏髓外造血,肝细胞核肿胀等。脾脏也出现了髓外造血。睾丸的病理改变主要以部分生精小管萎缩,部分动物睾丸组织坏死为主。附睾的病理改变主要有:附睾管内精子消失,部分附睾管内可见脱落生精细胞。3.雌鼠交配率和受孕率检测结果:各批次染镉组雌鼠的交配率和受孕率与对照组相比均未出现显著变化。4.胎鼠检测结果:各批次染镉组胎鼠的体长、尾长、体重与正常对照组相比未出现显著变化。120d批次的3.36mg Cd/kg组个别胎鼠出现趾骨骨化不全,颈椎椎体骨化不全或未骨化。所有胎鼠均未发现内脏畸形。5.仔鼠检测结果:120d批次的3.36mg Cd/kg组的仔鼠体重与对照组相比明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。其他批次染镉组仔鼠体重与正常对照组相比未出现明显变化,各批次中所有组别的雌性仔鼠占仔鼠总数的比例均无明显差异(P>0.05)。6.窝平均活胎数统计结果:各批次各组别孕鼠的窝平均活胎鼠之间的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论未成年雄性小鼠在连续多次短时间染镉后,其成年后体内雄激素水平下降,精子畸形率升高,睾丸镉蓄积明显并随时间延长而缓慢下降,附睾和睾丸病理学改变增加,此外,子代的体型和骨骼可出现发育延迟。
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全文目录
摘要 7-10 ABSTRACT 10-14 前言 14-25 1 镉的一般理化性质及应用 14 2 国内外的镉污染现状 14-15 3 镉的危害 15-22 3.1 镉对生殖系统的毒作用 16-17 3.2 镉对肾脏的毒作用 17-19 3.3 镉对肝脏的毒作用 19-20 3.4 镉对骨骼的毒作用 20-21 3.5 镉的致癌性 21-22 3.6 镉的其他毒性作用 22 4 镉的毒性作用机制 22-25 材料与方法 25-38 1 试剂 25-26 2 仪器设备 26 3 实验用具前处理 26 4 试剂配制 26-29 5 实验动物 29 6 动物的识别方法及检疫 29 7 动物的饲养管理 29 8 实验动物分组、染毒及染毒后处理方法 29-31 9 实验中的检测项目及检测方法 31-38 9.1 雄鼠的一般状况及脏器大体解剖观察 31 9.2 雄鼠的体重及脏器系数 31 9.3 雄鼠交配能力 31 9.4 雄鼠血清睾酮的测定 31 9.5 雄鼠精子畸形检测 31-32 9.6 脏器镉含量检测 32-33 9.7 胎鼠检测 33-35 9.8 仔鼠检测 35 9.9 雌鼠交配、受孕情况和窝平均活胎数统计 35-36 9.10 雄鼠脏器病理检查 36 9.11 统计分析 36-38 结果 38-64 1 雄鼠一般状况及脏器大体观察结果 38 2 雄鼠体重变化情况及脏器系数测定结果 38-42 3 雄鼠交配能力检测结果 42 4 雄鼠血清睾酮测定结果 42-44 5 雄鼠精子畸形检测结果 44-45 6 雄鼠脏器镉含量检测结果 45-48 7 胎鼠情况检查结果 48-50 8 仔鼠检测结果 50-52 9 雌鼠交配结果及窝平均活胎数情况统计结果 52-54 10 雄鼠脏器病理检查结果 54-64 讨论 64-72 结论 72-73 创新、不足与展望 73-74 参考文献 74-82 综述 镉的雄性生殖毒性研究进展 82-92 参考文献 87-92 附录 92-93 攻读学位期间发表文章情况 93-94 致谢 94-96 个人简介 96
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中图分类: > 医药、卫生 > 预防医学、卫生学 > 卫生基础科学 > 卫生毒理
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