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硫丹对罗氏沼虾的毒性作用
作 者: 熊昭娣
导 师: 戴习林
学 校: 上海海洋大学
专 业: 水产养殖
关键词: 硫丹 罗氏沼虾 急性毒性 慢性毒性 酶活性 恢复
分类号: S945.41
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要
当今,养殖水环境的污染问题日益突出,农药对养殖水体的污染成为大家关注的焦点。硫丹是一种有机氯杀虫剂,国外内外学者相继报道硫丹对水生生物的高致毒性,然而国内尚无学者深入研究此种农药对淡水养殖虾类罗氏沼虾的毒性作用。基于此,本试验先后探讨了静水条件中硫丹对罗氏沼虾溞状幼体、仔虾及不同规格幼虾的急性毒性作用,并借助组织切片技术探讨了硫丹对罗氏沼虾的慢性毒性作用;此外初步分析了硫丹在罗氏沼虾体内的富集和降解情况。研究结果如下:1.硫丹对罗氏沼虾溞状幼体及仔虾的急性毒性作用硫丹对Z5、Z7、Z9的24h、48hLC50和安全浓度依次分别为:2.09、0.39和0.004mg/L;2.99、0.84和0.02mg/L;4.43、2.00和0.12mg/L;对仔虾的24h、48h、72h和96hLC50依次分别为:5.49、1.85、0.62和0.47mg/L; Z5、Z7、Z9及仔虾对硫丹的安全浓度依次为:SCZ5<SCZ7<SCP4<SCZ9。硫丹对罗氏沼虾仔虾体内Na~+/K~+-ATPase酶活性的影响较显著,但对其体内AKP酶和ACP酶活性的影响不大。2.硫丹对罗氏沼虾的急性毒性作用硫丹对1.5cm、4cm和7cm长罗氏沼虾的96hLC50分别为:1.86、4.53和6.09mg/L;其安全浓度大小依次为:SC1.5cm<SC4cm<SC7cm。1.5cm和7cm长罗氏沼虾肝胰腺中AKP和ACP酶活性的变化规律不明显,其中0.12mg/L和199.89mg/L组中受试虾的肝胰腺中ACP酶活性显著低于对照组(P<0.05);但4cm长受试虾的肝胰腺中AKP和ACP酶活性均要低于对照组。不同体长的罗氏沼虾肝胰腺中AChE酶活性均显著低于对照组(P <0.01);0.12mg/L和0.43mg/L组中1.5cm长幼虾体内的POD酶活性显著低于对照组(P<0.05);4cm长受试虾肝胰脏中的POD酶活性比对照组分别降低64.7%、78.1%、98.5%、56.1%、67.0%、59.3%和48.0%(P <0.01);7cm长受试虾体内的POD酶活性分别为对照组的47.2%、39.7%、22.0%、60.9%、9.9%、1.3%和58.4%。0.01、0.43、1.51、5.31和18.62mg/L组中1.5cm长幼虾的肝胰腺中Na~+/K~+-ATPase酶活性要低于对照组;0.01mg/L组中4cm长幼虾的肝胰腺中Na~+/K~+-ATPase酶活性要高于对照组,但与对照组差异不显著(P>0.05);7cm长沼虾的肝胰腺中Na~+/K~+-ATPase酶活性与对照组相比分别降低了49.3%、73.6%、40.3%、37.4%、6.1%和46.4%(P <0.01)。3.硫丹对罗氏沼虾的慢性毒性及中肠腺组织病理研究在硫丹的毒性胁迫下,各试验组中受试虾的存活率随暴露浓度的增加呈下降趋势;然而,各试验组中受试虾的体长增长率和体重增重率与对照组差异不显著(P<0.05)。暴露50d后,各试验组中受试虾的肝胰腺中LSZ酶活性显著低于对照组(P<0.01);0.60mg/L组中受试虾的肝胰腺中ACP酶活性最低,且与对照组差异极为显著(P<0.01);0.05mg/L组中受试虾的肝胰腺中AKP酶活性显著高于对照组(P<0.01);0.05mg/L、0.16mg/L、0.27mg/L和0.49mg/L组受试虾的肝胰腺中MDA含量显著高于对照组差异显著(P<0.05);0.05mg/L和0.16mg/L组中受试虾的肝胰腺中GPX酶活性升高,0.27mg/L、0.49mg/L和0.60mg/L组中受试虾的肝胰腺中GPX活性均降低。受试虾中肠腺组织切片观察到肝小管管腔形状改变,基膜破裂与消融,肝小管间隙中血细胞渗透,肝细胞坏死,嗜伊红物质和棕色颗粒等病理变化。4.慢性中毒罗氏沼虾幼虾的恢复研究经60d的富集后,0.25mg/L、1.00mg/L和4.00mg/L组受试虾的肌肉样本中总硫丹含量分别为:1.57pg/g、1.72pg/g和1.95pg/g,均以α-硫丹为主,生物富集系数均值为2.83;清水中饲养7d后,0.25mg/L组、1.00mg/L组和4.00mg/L组受试虾的肌肉样本中的总硫丹含量分别为1.84pg/g、1.84pg/g和1.95pg/g;苯巴比妥溶液中饲养7d后,0.25mg/L组和4.00mg/L组受试虾的肌肉样本中的总硫丹含量分别为1.38pg/g和1.73pg/g;清水中饲养30d后,各试验组受试虾的肌肉样本中均检测不到硫丹;所有的肌肉样本中均未检测出硫丹硫酸酯。
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全文目录
摘要 7-9 ABSTRACT 9-12 第一章 引言 12-18 1.1 我国罗氏沼虾养殖现状 12-13 1.2 硫丹对水生生物的毒性 13-16 1.2.1 硫丹基本特征 13-14 1.2.2 硫丹的毒性作用机制 14 1.2.3 硫丹的毒理学特点 14-16 1.3 生态危害 16-17 1.4 硫丹残留限量的相关规定 17 1.5 本文的研究内容和意义 17-18 第二章 硫丹对罗氏沼虾溞状幼体及仔虾的急性毒性作用 18-26 2.1 前言 18 2.2 材料与方法 18-21 2.2.1 试验用虾 18-19 2.2.2 试验药物 19 2.2.3 试验用水与试验容器 19 2.2.4 急性毒性试验方法 19-20 2.2.5 样品前处理 20 2.2.6 数据处理 20-21 2.3 结果与分析 21-23 2.3.1 硫丹对罗氏沼虾溞状幼体及仔虾的急性毒性效应 21-22 2.3.2 硫丹对仔虾 ACP、AKP 酶活性影响 22-23 2.3.3 硫丹对仔虾 Na~+/K~+-ATPase 酶活性影响 23 2.4 讨论 23-26 2.4.1 硫丹对溞状幼体及仔虾的毒性效应 23-24 2.4.2 硫丹对 ACP、AKP 和 Na~+/K~+-ATPase 酶活性的影响 24-25 2.4.3 安全浓度 25-26 第三章 硫丹对罗氏沼虾的急性毒性作用 26-39 3.1 前言 26 3.2 材料与方法 26-28 3.2.1 试验材料 26-27 3.2.2 急性毒性试验方法 27 3.2.3 酶活性分析 27 3.2.4 数据处理 27-28 3.3 结果与分析 28-34 3.3.1 硫丹对罗氏沼虾的急性毒性效应 28-29 3.3.2 硫丹对 AKP 和 ACP 酶活性的影响 29-30 3.3.3 硫丹对 POD 和 AChE 酶活性的影响 30-32 3.3.4 硫丹对 Na~+/K~+-ATPase 酶活性的影响 32-34 3.4 讨论 34-39 3.4.1 硫丹对罗氏沼虾幼虾的急性毒性影响 34-35 3.4.2 硫丹对 AKP 和 ACP 酶活性的影响 35-36 3.4.3 硫丹对 POD 和 AChE 酶活性的影响 36-37 3.4.4 硫丹对 Na~+/K~+-ATPase 酶活性的影响 37-38 3.4.5 硫丹对罗氏沼虾行为的影响 38-39 第四章 硫丹对罗氏沼虾的慢性毒性及中肠腺病理研究 39-53 4.1 前言 39 4.2 材料与方法 39-43 4.2.1 受试动物 39-40 4.2.2 试剂 40 4.2.3 仪器 40 4.2.4 亚急性毒性试验方法 40 4.2.5 样本的采集和保存 40-41 4.2.6 样本前处理 41 4.2.7 总蛋白的测定 41 4.2.8 LSZ 活性的测定 41 4.2.9 ACP 和 AKP 活性的测定 41-42 4.2.10 MDA 含量的测定 42 4.2.11 GPX 活性的测定 42 4.2.12 组织切片的制备及观擦 42-43 4.2.13 生长指标的测定 43 4.2.14 数据处理 43 4.3 结果 43-50 4.3.1 生长影响 43-44 4.3.2 LSZ 活性影响 44-45 4.3.3 ACP 和 AKP 活性影响 45-46 4.3.4 MDA 含量变化 46 4.3.5 GPX 活性影响 46-47 4.3.6 中肠腺组织病理变化 47-50 4.4 讨论 50-53 第五章 慢性中毒罗氏沼虾幼虾的恢复研究 53-58 5.1 前言 53 5.2 材料与方法 53-55 5.2.1 受试生物和药物 53 5.2.2 暴露试验 53-54 5.2.3 解毒试验 54 5.2.4 罗氏沼虾肌肉中硫丹含量的测定 54 5.2.5 富集系数 54-55 5.3 结果 55-56 5.4 讨论 56-58 小结 58-59 参考文献 59-75 致谢 75
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中图分类: > 农业科学 > 水产、渔业 > 水产保护学 > 甲壳类病虫害及其防治 > 各种虾的病虫害及其防治 > 罗氏沼虾
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