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内蒙古地区奶牛子宫内膜炎致病葡萄球菌超抗原基因分布情况及耐药性研究
作 者: 李志芳
导 师: 李培锋
学 校: 内蒙古农业大学
专 业: 基础兽医学
关键词: 奶牛 致病葡萄球菌 超抗原基因 耐药性 内蒙古地区
分类号: S858.23
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要
目的:了解内蒙古地区奶牛子宫内膜炎致病葡萄球菌超抗原基因的分布及其耐药情况,为指导该地区有效治疗奶牛子宫内膜炎提供可靠的科学依据。方法:本研究对从内蒙古呼和浩特、包头、赤峰、乌兰察布等地奶牛养殖场患子宫内膜炎的奶牛中采集到的100份子宫分泌物进行了葡萄球菌分离试验,在此基础上,采用形态学观察和分子生物学方法,对其进行了鉴定;采用PCR技术检测了分离葡萄球菌的超抗原基因分布情况;采用微量肉汤稀释法和PCR技术分析了分离葡萄球菌的耐药性。结果:1.本试验共分离到60株(60%)葡萄球菌,其中金黄色葡萄球菌32株(53.3%),凝固酶阴性葡萄球菌28株(46.7%)。在凝固酶阴性葡萄球菌中,产色葡萄球菌11株(18.3%),腐生葡萄球菌7株(11.7%),表皮葡萄球菌3株(5.0%),松鼠葡萄球菌2株(3.3%),头葡萄球菌2株(3.3%),溶血葡萄球菌2株(3.3%),福氏葡萄球菌1株(1.7%)。2.在检测的12种肠毒素中,SEJ的携带率最高(37/61.7%);SEA(2/3.3%).SEB(2/3.3%)及SEE(2/3.3%)的携带率最低。60株葡萄球菌分离株中,新型肠毒素的平均携带率(63.3%)与传统肠毒素的平均携带率(15.0%)相比差异极显著(p<0.01)。60株葡萄球菌分离株中多呈现一株菌同时携带多种超抗原基因,在32株金黄色葡萄球菌中,一株菌最多携带7种超抗原基因,携带率为12.5%;在28株凝固酶阴性葡萄球菌中,一株菌最多携带4种超抗原基因,携带率为25%。3.分离到的葡萄球菌对青霉素耐药率最高(96.7%),对万古霉素最敏感(0%),有多重耐药菌株检出,范围在2耐~13耐之间;分离菌中BlaZ携带率达98%,金黄色葡萄球菌中未检出mecA,但凝固酶阴性葡萄球菌中mecA携带率为53.6%。结论:内蒙古地区奶牛子宫内膜炎致病葡萄球菌有12种肠毒素及eta,etb, TSST-1检出,其中SEJ的携带率最高;奶牛子宫内膜炎葡萄球菌对临床常用抗菌药物均有不同程度的耐药性,且葡萄球菌对p-内酰胺类耐药率较高,多重耐药性现象极其严重。
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全文目录
摘要 3-4 Abstract 4-6 目录 6-8 插图和附表清单 8-9 1 引言 9-17 1.1 奶牛子宫内膜炎的主要病因 9-10 1.2 奶牛子宫内膜炎的危害 10-11 1.3 奶牛子宫内膜炎的诊断 11 1.4 奶牛子宫内膜炎的治疗 11-12 1.4.1 子宫内疗法 11 1.4.2 全身疗法 11-12 1.4.3 激素疗法 12 1.4.4 生物学疗法 12 1.4.5 中药疗法 12 1.5 葡萄球菌的研究概况 12-16 1.5.1 葡萄球菌的特性及分类 12-14 1.5.2 葡萄球菌致病性的研究进展 14-15 1.5.3 葡萄球菌耐药性研究进展 15-16 1.6 本研究的目的与意义 16-17 2 实验材料与方法 17-25 2.1 实验材料 17-18 2.1.1 试验动物 17 2.1.2 药品与试剂 17-18 2.1.3 主要仪器 18 2.2 试验方法 18-25 2.2.1 病料采集 18 2.2.2 葡萄球菌的分离及鉴定 18-21 2.2.3 葡萄球菌分离株超抗原基因分布情况检测 21-22 2.2.4 奶牛子宫内膜炎葡萄球菌分离株耐药性研究 22-25 2.2.5 数据处理及测序结果分析 25 3 实验结果 25-39 3.1 葡萄球菌分离鉴定结果 25-27 3.1.1 葡萄球菌分离与初步鉴定结果 25-26 3.1.2 葡萄球菌PCR方法鉴定结果 26-27 3.2 葡萄球菌分离株超抗原基因分布结果 27-32 3.3 耐药表型研究结果 32-35 3.4 葡萄球菌多重耐药情况 35-36 3.5 分离菌β-内酰胺类耐药基因测定结果 36-38 3.6 mecA基因、BlaZ基因与β-内酰胺类抗生素耐药表型符合度 38-39 4 讨论 39-44 4.1 葡萄球菌的分离鉴定 39-40 4.2 葡萄球菌分离株超抗原基因分布情况分析 40-42 4.3 葡萄球菌耐药性分析 42-44 5 结论 44-45 致谢 45-46 参考文献 46-51 作者介绍 51
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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 动物医学(兽医学) > 各种家畜、家禽、野生动物的疾 > 家畜 > 牛
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