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黄曲霉毒素B1对雏鸡免疫器官影响的研究

作　者: 陈瑾
导　师: 彭西
学　校: 四川农业大学
专　业: 基础兽医学
关键词: AFB1 雏鸡 免疫器官 流式细胞术 细胞凋亡 氧化应激
分类号: S858.31
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 24次
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内容摘要


本研究选用1日龄艾维茵公雏180只,随机分为4组,分别饲喂对照组日粮(玉米-豆粕型基础日粮)和AFB1日粮(AFB1、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组日粮中AFB1添加量分别为0.15mg/kg.0.3mg/kg和0.6mg/kg)。试验期21天,采样点为实验第7、14和21天,采用组织病理学方法、流式细胞术法、生物化学法和ELISA法观察AFB1对胸腺、法氏囊和脾脏的影响。研究结果显示：与对照组比较,AFB1Ⅱ、Ⅲ组雏鸡料肉比增高,免疫器官脏器指数下降。光镜下,AFB1Ⅱ、Ⅲ组胸腺髓质区淤血,皮质区多数网状细胞核形态不清晰,周围均见有较多细胞核碎片；法氏囊滤泡髓质区淋巴细胞明显减少,皮质及髓质均出现大量小空洞,空洞内细胞核碎片显著增多；脾脏红髓区淤血,脾小结及动脉周围淋巴鞘出现一定量空洞,细胞核碎片增多。电镜下,AFB1Ⅲ组胸腺细胞核周隙扩张,线粒呈空泡状,凋亡细胞增多,并常位于网状细胞附近或网状细胞胞浆内；法氏囊凋亡细胞数量增多,部分凋亡细胞被网状细胞吞噬；脾脏细胞核周隙扩张,线粒体肿胀,凋亡细胞数量增多。AFB1Ⅱ、Ⅲ组雏鸡脾脏非酶抗氧化物GSH含量降低,抗氧化酶GSH-Px、GR和CAT活性下降,脂质过氧化产物MDA含量升高。流式细胞术与TUNEL染色法显示AFB1Ⅱ、Ⅲ组雏鸡胸腺、法氏囊和脾脏细胞凋亡率增加,脾脏和血液中CD3+、CD3+CD4+和CD3+CD8+T细胞的比例不同程度下降,胸腺中凋亡蛋白Bax和Caspase-3表达增加,Bcl-2表达减少；法氏囊中仅Caspase-3的表达量增加；而脾脏中3种凋亡蛋白的表达均微量。AFB1Ⅱ、Ⅲ组血清IL-2、IFN-γ及IgG、IgA和IgM的含量减少。研究结果表明：日粮中AFB1含量为0.3mg/kg及0.6mg/kg时,雏鸡胸腺、法氏囊和脾脏出现不同程度的病理损伤；雏鸡脾脏抗氧化能力下降,脂质过氧化产物增多,导致过氧化损伤；雏鸡胸腺、法氏囊和脾脏凋亡细胞增多,凋亡上调的机制与促凋亡蛋白的过表达有关,且3个免疫器官的凋亡调节机制存在差异；雏鸡血液和脾脏中成熟T淋巴细胞的比例降低,血清IL-2和IFN-γ的含量减少,与胸腺结构和功能的损伤密切相关；雏鸡血清IgG、IgA和IgM的含量减少,与法氏囊和脾脏的结构和功能受损密切相关。

全文目录


摘要  4-5
ABSTRACT  5-10
1 文献综述  10-20
  1.1 黄曲霉毒素污染概况  10
  1.2 AFB_1的理化性质  10-11
  1.3 AFB_1在动物机体内的吸收和代谢  11-12
    1.3.1 AFB_1的吸收及分布  11
    1.3.2 AFB_1的代谢  11-12
  1.4 AFB_1中毒  12-13
    1.4.1 中毒剂量  12
    1.4.2 临床中毒表现  12-13
  1.5 AFB_1对动物机体的危害  13-19
    1.5.1 抑制生长发育  13
    1.5.2 影响胃肠道消化吸收  13
    1.5.3 AFB_1对血液的影响  13-14
    1.5.4 AFB_1的肝肾毒性  14-15
    1.5.5 AFB_1对免疫系统的影响  15-19
    1.5.6 对生殖机能的影响  19
  1.6 AFB_1的检测及去毒方法  19-20
    1.6.1 AFB_1的检测  19-20
    1.6.2 去毒方法  20
2 选题背景、研究目的及技术路线  20-22
  2.1 选题背景  20-21
  2.2 研究目的  21-22
  2.3 技术路线  22
3 实验材料和方法  22-27
  3.1 实验材料  22-24
    3.1.1 实验动物  22
    3.1.2 实验日粮  22-23
    3.1.3 主要试剂和仪器  23-24
  3.2 实验方法  24-27
    3.2.1 动物分组及饲养管理  24
    3.2.2 临床观察  24
    3.2.3 病理学观察  24-25
    3.2.4 脾脏抗氧化指标检测  25
    3.2.5 免疫器官细胞凋亡检测  25-26
    3.2.6 T淋巴细胞亚群检测  26-27
    3.2.7 血清IL-2、IFN-γ含量检测  27
    3.2.8 血清免疫球蛋白含量检测  27
    3.2.9 数据处理  27
4 结果  27-42
  4.1 临床观察  27-28
    4.1.1 临床症状  27
    4.1.2 体重及料肉比变化  27-28
  4.2 病理形态学变化  28-30
    4.2.1 剖检变化及免疫器官脏器指数  28-30
    4.2.2 病理组织学变化  30
    4.2.3 超微结构变化  30
  4.3 脾脏抗氧化指标的变化  30-32
  4.4 免疫器官细胞凋亡的变化  32-37
    4.4.1 FCM检测免疫器官细胞凋亡率的变化  32-34
    4.4.2 TUNEL染色法检测凋亡细胞  34-36
    4.4.3 免疫器官Bax、Bcl-2及Caspase-3凋亡蛋白的变化  36-37
  4.5 T淋巴细胞亚群的变化  37-40
    4.5.1 脾脏T淋巴细胞亚群的变化  37-39
    4.5.2 外周血T淋巴细胞亚群的变化  39-40
  4.6 血清IL-2、IFN-γ含量的变化  40-41
  4.7 血清Ig含量的变化  41-42
5 讨论  42-47
  5.1 雏鸡生长状况及临床症状观察  42
  5.2 AFB_1对雏鸡免疫器官的影响  42-45
    5.2.1 AFB_1对雏鸡免疫器官的形态学损伤  42-43
    5.2.2 AFB_1对雏鸡脾脏生化指标的影响  43-44
    5.2.3 AFB_1对雏鸡免疫器官凋亡的影响  44-45
  5.3 AFB_1对雏鸡T细胞亚群、细胞因子及免疫球蛋白的影响  45-47
    5.3.1 AFB_1对雏鸡T细胞亚群及细胞因子的影响  45-46
    5.3.2 AFB_1对雏鸡IgG、IgA及IgM的影响  46-47
6 结论与创新点  47-48
参考文献  48-59
版图及说明  59-66
致谢  66-67
攻读学位期间参与发表论文  67

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 动物医学（兽医学） > 各种家畜、家禽、野生动物的疾 > 家禽 > 鸡
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