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典型肉鸡生产链中弯曲菌耐药性调查及风险评估研究

作　者: 马立才
导　师: 吴聪明；汪洋
学　校: 中国农业大学
专　业: 基础兽医学
关键词: 弯曲菌肉鸡生产链耐药性风险评估
分类号: S858.31
类　型: 博士论文
年　份: 2014年
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内容摘要

弯曲菌是一类重要的食源性肠道病原菌,世界范围内每年弯曲菌感染病例数约4-5亿。随着抗菌药物在食品动物养殖中的大量使用,弯曲菌的耐药现状越来越严重。调查研究表明,加工和消费受到弯曲菌污染的鸡肉是人类弯曲菌感染的主要途径之一。在我国,对于弯曲菌流行和耐药性的监测还不完善,肉鸡中弯曲菌的流行和耐药性的报道也相对较少。本研究旨在了解弯曲菌在我国肉鸡生产链中的污染、传播及其抗菌药物耐药性情况,进而在已有数据的基础之上开展肉鸡源弯曲菌耐药性风险评估研究。在2012至2013年,本研究从上海和青岛的两个典型肉鸡生产链中分别采集了肉鸡盲肠样本142和118份,屠宰胴体样本135和110份,以及市售鸡肉样本128和128份,在青岛肉鸡生产链中还采集了分割鸡肉样品104份,各分离得到弯曲菌259(空肠弯曲菌：106；结肠弯曲菌：153)株和282(空肠弯曲菌：142；结肠弯曲菌：140)株。值得注意的是,肉鸡中结肠弯曲菌的分离率已经达到甚至超过了空肠弯曲菌。药敏结果显示,分离自上海和青岛肉鸡生产链的541株弯曲菌均至少耐1种抗菌药物。两地区所分离的弯曲菌对环丙沙星耐药率最高(>99.0%)；其次是对四环素的耐药率(86.0%)。另外,克林霉素、庆大霉素和红霉素的耐药率也比较高,均在62%以上；上海和青岛弯曲菌的氟苯尼考耐药率分别为20.1%和4.6%。结肠弯曲菌对四环素、克林霉素、庆大霉素和红霉素的耐药率明显高于空肠弯曲菌,氟苯尼考耐药率则相反。多重耐药情况非常严重,两地弯曲菌的多重耐药率分别达到了87.9%和73.4%,远高于其它国家等。分子分型结果显示,不同来源的弯曲菌可能具有相同PFGE谱型,这说明弯曲菌可以随着肉鸡生产链传播。基于OIE风险分析框架和FDA152号抗菌药物耐药性风险评估指南,本研究结合我国细菌耐药风险评估的现状建立了肉鸡源细菌耐药性定性风险评估模型。该模型包括：危害特征描述、释放评估、暴露评估、后果评估和风险估计五个部分,在评估过程中使用“矩阵法”和“非矩阵法”两种方法对风险参数进行整合。之后,运用所建立的评估模型对我国肉鸡源耐氟喹诺酮类药物(FQs)弯曲菌进行了评估。结果表明,我国肉鸡源耐FQs弯曲菌的释放风险“极高”；消费者因消费鸡肉而暴露于耐FQs弯曲菌的风险“较高”；弯曲菌的FQs耐药性对弯曲菌病治疗造成的影响“非常严重”。利用“矩阵法”综合上述结果得到如下结论：在我国肉鸡养殖中使用FQs所导致的耐FQs弯曲菌对我国消费者的健康构成了“高水平”的风险。本研究基于OIE风险分析框架和FDA风险评估指南,并结合我国目前开展动物源细菌耐药性风险评估所具备的基本条件建立了一个“农场-餐桌”的肉鸡源细菌耐药性随机定量风险评估模型。该模型利用统计分析软件(如@riskTM等)进行蒙特卡罗模拟获得一个包含95%置信区间的风险评估结果平均值,然后通过敏感性分析确定各模型参数对风险评估结果不确定度的影响大小。最后,运用所建立的模型评估了我国肉鸡源耐FQs弯曲菌对我国消费者健康的影响。评估结果表明,我国2010年和2011年受到肉鸡源耐FQs弯曲菌感染影响的病例数分别为：N2010=0.2630×106(95%CI:0.038-0.728)和N2011=0.2637×106(95%CI:0.039-0.728)敏感性分析结果表明,服用FQs治疗耐FQs弯曲菌感染的概率(PFQ)对模型结果Nm的不确定度的影响最大,其次为PF和PA,而参数PT的影响最小。综上所述,我国肉鸡源弯曲菌的耐药情况非常严重,多重耐药的比例远高于其它国家。结肠弯曲菌正逐渐替代空肠弯曲菌成为肉鸡中的优势弯曲菌群,且其对四环素、克林霉素、庆大霉素和红霉素的耐药率显著地高于空肠弯曲菌。PFGE分型结果表明,肉鸡源弯曲菌可以随着肉鸡的生产链传播。风险评估结果显示,我国消费者受到肉鸡源耐FQs弯曲菌影响的风险较高。总之,我国肉鸡源弯曲菌耐药性的严峻形势,以及耐药弯曲菌随着肉鸡生产链传播给消费者并对其健康造成影响的事实理应受到更多的关注。

全文目录

摘要  5-7
Abstract  7-9
缩略词表  9-10
目录  10-12
插图清单  12-13
附表清单  13-14
第一章绪论  14-32
  1.1 研究目的及意义  14-15
  1.2 国内外研究现状  15-30
    1.2.1 弯曲菌及弯曲菌病  15-18
    1.2.2 弯曲菌的流行与传播  18-19
    1.2.3 弯曲菌的耐药性现状  19-21
    1.2.4 细菌耐药性风险评估  21-30
  1.3 研究内容和方法  30-32
    1.3.1 研究内容  30-31
    1.3.2 研究方法  31-32
第二章肉鸡生产链中弯曲菌污染传播及耐药性的调查研究  32-66
  2.1 前言  32
  2.2 材料和方法  32-44
    2.2.1 材料  32-34
    2.2.2 方法  34-44
  2.3 结果与分析  44-60
    2.3.1 弯曲菌的菌落形态特征  44
    2.3.2 多重PCR鉴定结果  44-45
    2.3.3 弯曲菌代表株的API验证结果  45
    2.3.4 弯曲菌的分离情况  45-47
    2.3.5 弯曲菌药敏试验结果  47-55
    2.3.6 弯曲菌代表株的PFGE分型结果  55-60
  2.4 讨论  60-65
    2.4.1 样本采集与处理对弯曲菌分离的影响  60-61
    2.4.2 肉鸡生产链中弯曲菌的污染情况  61-62
    2.4.3 弯曲菌抗菌药物耐药性情况  62-64
    2.4.4 肉鸡生产链中弯曲菌污染传播的分析  64-65
  2.5 小结  65-66
第三章肉鸡养殖中使用氟喹诺酮类药物引起弯曲菌耐药性的定性风险评估  66-79
  3.1 前言  66
  3.2 材料和方法  66-68
    3.2.1 材料  66-67
    3.2.2 方法  67-68
  3.3 结果与分析  68-76
    3.3.1 危害特征描述  68-70
    3.3.2 释放评估  70-72
    3.3.3 暴露评估  72-75
    3.3.4 后果评估  75
    3.3.5 风险估计  75-76
  3.4 讨论  76-78
    3.4.1 定性风险评估模型  76
    3.4.2 数据缺陷  76-78
  3.5 小结  78-79
第四章肉鸡养殖中使用氟喹诺酮类药物引起弯曲菌耐药性的定量风险评估  79-104
  4.1 引言  79
  4.2 材料与方法  79-82
    4.2.1 材料  79-80
    4.2.2 方法  80-82
  4.3 结果与分析  82-99
    4.3.1 危害特征描述  82-86
    4.3.2 释放评估  86-88
    4.3.3 暴露评估  88-90
    4.3.4 后果评估  90-93
    4.3.5 风险估算  93-99
    4.3.6 模型参数的敏感性分析  99
  4.4 讨论  99-103
    4.4.1 定量风险评估模型  99-100
    4.4.2 肉鸡源氟喹诺酮类药物耐药弯曲菌风险评估  100-103
  4.5 小结  103-104
第五章结论  104-105
创新点  105-106
参考文献  106-122
致谢  122-124
个人简介  124

典型肉鸡生产链中弯曲菌耐药性调查及风险评估研究

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