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不同剂量川牛膝多糖对小鼠抗氧化活性的影响

作　者: 唐静
导　师: 曾宪根
学　校: 四川农业大学
专　业: 生物物理学
关键词: 川牛膝多糖抗氧化剂量
分类号: S853.74
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

过量的自由基的产生与积累引起生物体的DNA损伤和突变,从而诱发各种生理疾病,影响机体的正常功能,给人们的健康造成严重影响。目前,自由基的危害已经越来越受到人们的关注。因而寻求毒副作用小,成本低廉的清除自由基的天然药物及功能食品成为研究热点。川牛膝作为一种重要的川产道地中药材,具有抑制肿瘤、增强免疫力、抗炎镇痛、抵抗病毒等功效。本文拟研究不同剂量川牛膝多糖对小鼠抗氧化活性的影响,为川牛膝多糖以后的开发应用提供科学依据。本试验首先选用22只健康昆明小白鼠(6～8周龄,体重25～30g)随机分为两组,每组11只。其中一组灌胃0.25ml生理盐水,连续21天,为空白对照组；另一组每天灌胃0.25ml川牛膝多糖(100mg/kg/day),连续21天,为多糖组。第22天起禁食24h后,脱颈处死,迅速摘取肝脏和脑,以测定脑和肝脏中T-AOC、T-SOD、CAT、 GSH-Px活性和MDA含量。与空白对照组相比较,多糖组均不同程度地提高了T-AOC水平、T-SOD、CAT、GSH-Px活性和降低了MDA含量(p<0.05)。结果揭示川牛膝多糖(RCP)具一定清除活性氧(ROS)和提高小鼠机体抗氧化能力。在此基础之上,研究了不同剂量川牛膝多糖对小鼠机体抗氧化活性的影响。选取77只健康雌性昆明小白鼠(6～8周龄,体重25～30g),随机分为7组,每组11只。其中第1组,每天皮下注射0.2ml生理盐水和灌胃0.25ml生理盐水,连续21天,为空白对照组；第2组,每天皮下注射0.2ml D-galactose (120mg/kg/day)和灌胃0.25ml生理盐水,连续21天,为模型组；第3组,每天皮下注射0.2ml D-galactose (120mg/kg/day)和灌胃0.25ml Vc (100mg/kg/day),连续21天,为阳性对照组(Vc组)。第4,5,6和第7组,每天分别皮下注射0.2ml D-galactose (120mg/kg/day)和灌胃0.25ml不同剂量的川牛膝多糖(分别为50mg/kg/day、100mg/kg/day、200mg/kg/day和300mg/kg/day),连续21天。第22天起禁食24h后,脱颈处死,迅速摘取肝脏和脑,以测定脑和肝脏中T-AOC、SOD、CAT、GSH-Px活性和MDA含量。与空白对照组比较,模型组小鼠脑和肝组织中总抗氧化能力(T-AOC)水平、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)的活力显著降低和MDA含量显著升高(p<0.05),揭示D-galactose致衰老模型建立成功。在脑和肝组织中,与模型组相比,灌胃不同剂量川牛膝多糖小鼠的T-SOD、CAT、 GSH-Px的活性和T-AOC的水平均有不同程度的升高。但在脑组织中,灌胃不同剂量川牛膝多糖小鼠抗氧化酶类和T-AOC水平随剂量升高而增强,MDA含量随剂量升高而下降,具有良好的剂量效应,其中300mg/kg/day剂量组小鼠的T-SOD、CAT、GSH-Px的活性和T-AOC的水平显著高于模型组(p<0.05)；在肝脏组织中,灌胃不同剂量川牛膝多糖小鼠抗氧化酶类和T-AOC水平具有一定的剂量效应,其中100mg/kg/day,200mg/kg/day,300mg/kg/day剂量组川牛膝多糖小鼠T-SOD、GSH-Px的活性和T-AOC的水平显著高于模型组(p<0.05),200mg/kg/day和300mg/kg/day川牛膝多糖剂量组小鼠CAT活性显著高于模型组(p<0.05),而灌胃川牛膝多糖(RCP)的所·有剂量组小鼠MDA的含量均显著低于模型组(p<0.05)。综上所述,川牛膝多糖(RCP)具有一定的抗氧化效果,在本研究的剂量范围内,灌胃不同剂量川牛膝多糖对小鼠机体抗氧化活性的影响,呈现出一定的剂量效应,剂量为300mg/kg/day时抗氧化效果最佳,揭示川牛膝多糖增强了小鼠抗氧化酶活性、提高了清除自由基能力,减轻和阻断脂质过氧化反应,起到一定的延缓衰老的作用,为川牛膝多糖以后的开发应用提供科学依据。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-9
符号说明  9-12
第一章文献综述  12-25
  1.0 自由基及来源  12
  1.1 自由基与机体内的抗氧化系统及致衰老的作用机制  12-16
    1.1.1 超氧化物歧化酶(SOD)  13-14
    1.1.2 谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)  14-15
    1.1.3 过氧化氢酶(CAT)  15-16
  1.2 多糖的抗氧化功能  16-22
    1.2.1 植物多糖的研究  17-19
    1.2.2 真菌多糖的研究  19-21
    1.2.3 海藻多糖的研究  21-22
  1.3 多糖的抗氧化作用机理  22
  1.4 川牛膝的研究  22-24
    1.4.1 川牛膝及其成份  23
    1.4.2 川牛膝的药理作用  23-24
  1.5 本研究的目的和意义  24-25
第二章川牛膝多糖对小鼠抗氧化活性的影响  25-34
  2.1 材料与方法  25-26
    2.1.1 试验材料  25
    2.1.2 主要试验仪器  25
    2.1.3 主要试剂盒和药品  25-26
    2.1.4 主要溶液配制  26
  2.2 试验方法  26-29
    2.2.1 川牛膝多糖的制备  26
    2.2.2 试验动物、分组及处理  26-27
    2.2.3 样本采集及处理  27
    2.2.4 总蛋白含量的测定  27
    2.2.5 总抗氧化能力水平的测定  27
    2.2.6 总超氧化物歧化酶活性的测定  27-28
    2.2.7 过氧化氢酶活性的测定  28
    2.2.8 谷胱甘肽过氧化物酶活性测定  28-29
    2.2.9 丙二醛含量的测定  29
  2.3 结果与分析  29-33
    2.3.1 川牛膝多糖对小鼠脑和肝脏组织抗氧化活性的影响  29-33
  2.4 小结  33-34
第三章不同剂量川牛膝多糖对小鼠抗氧化活性的影响  34-44
  3.1 材料与方法  34-35
    3.1.1 试验材料  34
    3.1.2 主要试验仪器  34
    3.1.3 主要试剂盒和药品  34-35
    3.1.4 主要溶液配制  35
  3.2 试验方法  35-37
    3.2.1 川牛膝多糖  35
    3.2.2 试验动物、分组及处理  35-36
    3.2.3 样本采集及处理  36
    3.2.4 总蛋白含量的测定  36
    3.2.5 总抗氧化能力水平的测定  36
    3.2.6 超氧化物歧化酶活性的测定  36
    3.2.7 过氧化氢酶活性的测定  36
    3.2.8 谷胱甘肽过氧化物酶活性测定  36
    3.2.9 丙二醛含量的测定  36-37
  3.3 结果与分析  37-43
    3.3.1 不同剂量川牛膝多糖对小鼠脑和肝脏组织抗氧化活性的影响  37-43
  3.4 小结  43-44
第四章讨论与结论  44-47
  4.1 讨论  44-46
  4.2 结论  46-47
参考文献  47-54
致谢  54-55
攻读学位期间发表的学术论文  55

不同剂量川牛膝多糖对小鼠抗氧化活性的影响

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