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堆肥生境嗜热丝状真菌的分离与鉴定

作　者: 黄魁
导　师: 张怀强
学　校: 山东大学
专　业: 生物工程
关键词: 堆肥生境木质纤维素降解 18SrRNA测序
分类号: S141.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

我国是农业大国,2012年,我国粮食产量实现“九连增”,总产量58957万吨。与此同时,是每年各类农作物秸秆产量达77000万吨。农作物秸秆产量大、分布广、种类多,长期以来一直是农民生活和农业发展的宝贵资源。农作物秸秆目前主要有四种利用途径：饲料；肥料还田；直接或经沼化作为燃料供燃；用于造纸或板材原料等。秸秆作为有机肥料还田加以利用是目前最普遍的利用方式,同时有利于降低化肥的用量。传统堆肥方式,是利用夏秋季高温季节,把秸秆堆积,采用发酵沤制,其特点是时间长,受环境影响大,劳动强度高,产出量少,成本低廉。本文针对传统堆肥方式,初步探讨了从堆肥生境中分离得到对秸秆发酵有相关作用的菌株的方法,并对已分离到的一部分菌株进行形态学及酶学性质的研究,对菌株生长的形态、孢子形态及菌株生物质降解酶的最适温度、最适PH进行了初步分析,利用18SrRNA测序手段对已分离到的一部分菌株进行鉴定。本文通过微生物纯化技术,从堆肥生境中分离得到多种嗜热微生物,并通过微生物生长形态学观察和18SrRNA序列比对的方法,鉴定出编号2013-08-10-7和2013-08-10-8的微生物样品为疏棉状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus),经初步酶学分析,证实鉴定结果为真。通过本文,实验室已初步建立了堆肥生境微生物分离鉴定的方法,对进一步研究提供了良好的平台。研究在堆肥生境中,对秸秆发酵起作用的微生物及其特性,会对下一步改良堆肥发酵效率,利用生化快速腐熟技术制造有机肥起到推动作用。

全文目录

目录  4-6
摘要  6-7
Abstract  7-9
第1章绪论  9-13
  1.1 秸秆综合利用的现状  9-10
  1.2 堆肥  10-11
  1.3 18SrRNA序列分析  11
  1.4 立题依据  11-13
第2章堆肥生境中嗜热微生物的分离与纯化  13-27
  2.1 堆肥样品采集与保存处理  13-16
    2.1.1 试验方法  13-14
    2.1.2 试验结果  14-16
  2.2 堆肥样品嗜热微生的分离与纯化  16-26
    2.2.1 试验方法  16-20
    2.2.2 试验结果  20-26
  2.3 小结  26-27
第3章菌种样品的鉴定  27-51
  3.1 菌种样品的形态学观察  27-45
    3.1.1 试验方法  27-28
    3.1.2 试验结果  28-45
    3.1.3 分析讨论  45
  3.2 菌种样品18SrRNA序列分析  45-49
    3.2.1 试验方法  45-46
    3.2.2 试验结果  46-49
    3.2.3 分析讨论  49
  3.3 小结  49-51
第4章菌种样品的酶学性质分析  51-65
  4.1 粗酶液的制备  51-52
    4.1.1 试验方法  51-52
    4.1.2 试验结果  52
  4.2 菌种样品CMC酶及木聚糖酶存在鉴定  52-55
    4.2.1 试验方法  52-54
    4.2.2 试验结果  54
    4.2.3 分析讨论  54-55
  4.3 菌种样品的CMC酶及木聚糖酶活性电泳图谱  55-57
    4.3.1 试验方法  55-56
    4.3.2 试验结果  56-57
    4.3.3 分析讨论  57
  4.4 菌种样品CMC酶及木聚糖酶最适pH测定  57-63
    4.4.1 试验方法  57-58
    4.4.2 试验结果  58-63
    4.4.3 分析讨论  63
  4.5 小结  63-65
第5章全文总结与展望  65-67
  5.1 本实验室内部堆肥生境中嗜热微生物分离与纯化程序的确立  65-66
  5.2 堆肥生境中微生物多样性的实验室验证  66
  5.3 展望  66-67
致谢  67-68
参考文献  68-70
学位论文评阅及答辩情况表  70

堆肥生境嗜热丝状真菌的分离与鉴定

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