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夏秋绿茶中茶氨酸的提取分离纯化及对肠道微生态的影响

作　者: 葛艳
导　师: 叶红
学　校: 南京农业大学
专　业: 食品工程
关键词: 夏秋绿茶 茶氨酸 提取 分离纯化 肠道微生态
分类号: TS272.51
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


茶氨酸是茶叶中特有的氨基酸,具有抗肿瘤,增强记忆力等多种活性,在功能食品方面有很大的应用前景。中国夏秋绿茶产量高,但年年积压严重,资源利用率低。从夏秋绿茶中直接提取,分离茶氨酸,能更好的保证其天然性质,是最直接,安全和有效的生产途径。本研究拟在前人研究的基础上,采用提取优化,超滤,静态吸附,动态层析结合的方法,建立一套纯度高,成本低,工业可行的茶氨酸提取分离和纯化的工艺,并研究该工艺制备得到的茶氨酸对肠道微生态的影响。主要研究结果如下1.利用正交试验优化得出茶氨酸提取的最佳条件为：提取料液比1：20,提取温度95℃,提取时间45min。2.直接水提的茶汤中含有大分子蛋白质,高分子多糖及絮状沉淀,需经过超滤处理。通过比较选择10K孔径的膜,操作压力为0.3MPa,溶液温度35℃时具有最佳的效果。经过超滤处理后的茶汤澄澈明净,大分子蛋白质和絮状沉淀基本去除,茶多糖除掉40%以上,茶多酚去除率达到30%,而咖啡碱和茶氨酸的量处理前后改变不大。3.吸附能进一步除去茶汤中的茶多酚等物质,本研究表明PA树脂对茶多酚的选择吸附量达到了76.36mg/g,且回收率高,对茶酸吸附量很少,利用PA树脂静态吸附可以很好的分离和富集茶多酚。4.分离茶氨酸和咖啡碱用的是NKA-Ⅱ树脂动态层析,上样后用蒸馏水以1BV/h的流速洗脱得到纯度99.12%的茶氨酸,一次得率59.26%,1.5-2.5BV之间的洗脱液浓缩后再次上样,茶氨酸的得率可提高至75.12%,之后用80%乙醇洗脱层析柱可得到纯度99%的咖啡碱副产品。NKA-Ⅱ树脂使用五次后分离效果没有明显的改变,具有很好的工业应用前景。5.采用体外厌氧粪样混合培养的方式对茶氨酸产品进行发酵培养,通过FISH技术对24小时内有益菌群、有害菌群以及总菌群的数量变化进行测定,运用HPLC(?)定24h内肠道短链脂肪酸的变化。结果发现茶氨酸在一定程度上能促进乳酸菌和真细菌梭菌属的生长,对其它三种细菌有一定的抑制作用,细菌总数比空白对照组略低。肠道短链脂肪酸的产生变化较大,茶氨酸在短期内促进了大量乳酸的产生。

全文目录


摘要  6-8
ABSTRACT  8-10
第一章 文献综述  10-28
  1.1 茶氨酸概述  10-12
    1.1.1 茶氨酸的结构和理化性质  10-11
    1.1.2 茶氨酸的分布  11
    1.1.3 茶氨酸的代谢  11-12
  1.2 茶氨酸的分析测定方法  12-13
  1.3 茶氨酸的制取方法  13-16
    1.3.1 化学合成法  13-14
    1.3.2 生物合成  14
    1.3.3 直接提取分离  14-16
  1.4 茶氨酸的生理功能  16-19
    1.4.1 镇静作用  16
    1.4.2 抗癌作用  16-17
    1.4.4 神经保护作用  17
    1.4.5 增强免疫力作用  17-18
    1.4.6 降血压作用  18
    1.4.7 抗氧化,清除自由基功能  18
    1.4.8 抗疲劳  18-19
    1.4.9 提高学习和记忆力的影响  19
  1.5 茶氨酸与肠道微生态  19-21
    1.5.1 肠道微生态系统概述  19-20
    1.5.2 氨基酸与SCFA代谢  20-21
    1.5.3 肠道微生态改善作用  21
  1.6 研究目的意义和主要内容  21-23
  参考文献  23-28
第二章 夏秋绿茶中茶氨酸的提取分离纯化  28-48
  2.1 原料  28
  2.2 材料与试剂  28
  2.3 仪器设备  28-29
  2.4 工艺路线  29-30
  2.5 试验方法  30-34
    2.5.1 浸提实验  30
    2.5.2 超滤浓缩实验  30-31
    2.5.3 纯化试验  31-32
    2.5.4 检测方法  32-34
  2.6 结果与分析  34-46
    2.6.1 提取工艺  34-36
    2.6.2 膜分离工艺  36-40
    2.6.3 静态吸附工艺  40-42
    2.6.4 柱层析工艺  42-46
  2.7 小结和讨论  46-47
  参考文献  47-48
第三章 茶氨酸对肠道微生态的作用  48-66
  3.1 材料与试剂  48
  3.2 仪器与设备  48-49
  3.3 探针  49
  3.4 实验方法  49-53
    3.4.1 粪便样本收集与处理  49-50
    3.4.2 厌氧发酵  50
    3.4.3 FISH计数实验  50-52
    3.4.4 SCFA的测定实验  52-53
  3.5 结果与讨论  53-63
    3.5.1 茶氨酸对肠道细菌的作用  53-59
    3.5.2 茶氨酸对肠道SCFA生成的影响  59-63
  3.6 本章小结  63-64
  参考文献  64-66
全文总结  66-68
致谢  68

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中图分类: > 工业技术 > 轻工业、手工业 > 食品工业 > 饮料冷食制造工业 > 茶 > 各种茶 > 绿茶
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