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电针与尼莫地平对AD大鼠海马CA_3区α_7烟碱型乙酰胆碱受体的影响

作　者: 车鹏
导　师: 田建英
学　校: 宁夏医科大学
专　业: 人体解剖与组织胚胎学
关键词: 阿尔茨海默病 α7烟碱型乙酰胆碱受体电针尼莫地平交互作用
分类号: R965
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的⑴观察D-半乳糖所致衰老型AD模型大鼠与正常大鼠之间存在的空间学习记忆行为、海马区α7nAchR免疫阳性细胞及整个海马组织中α7nAchR蛋白表达的差异。⑵观察“益智醒脑”电针法和尼莫地平分别及联合干预在2周、4周、6周三个时间点对AD大鼠空间学习记忆行为、海马区α7nAchR免疫阳性细胞及整个海马组织中α7nAchR蛋白表达的影响。⑶探讨“益智醒脑”电针法与尼莫地平影响大鼠学习记忆能力的可能机制。方法经Morris水迷宫定位航行试验粗筛后的健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠210只,随机分为正常组、模型组、电针治疗组、尼莫地平治疗组、联合治疗组、电针非穴位组、多奈哌齐组7个组,每组30只,每个组设2周、4周、6周三个时间观察点,每个观察点的大鼠数量为10只。除正常组外,其余各组大鼠均予以腹腔注射D-半乳糖60mg/kg·d ,6周后完成造模。造模后第7天,电针治疗组大鼠选取百会、内关、肾俞、足三里四个穴位,以频率为3Hz、强度为1-2mA的疏密波进行电刺激,15min/d。尼莫地平治疗组大鼠予以每只大鼠尾静脉注射尼莫地平0.25mg/d。联合治疗组使用上述两种方法同时进行治疗。电针非穴位组选取的电针刺激部位为穴位旁5mm非经络经行部位的肌肉组织,电针治疗仪所有参数设置同电针治疗组。多奈哌齐组予以每只大鼠多奈哌齐0.125 mg/d灌胃。各组中各观察点大鼠分别在其相应的时间点进行脑组织灌注固定取材和新鲜组织快速取材,SP免疫组织化学法检测大鼠脑内海马区α7nAchR免疫阳性细胞的表达,western blotting法检测整个海马组织中α7nAchR蛋白的表达。结果⑴与正常组大鼠相比,模型组大鼠在2周、4周、6周三个时间点均出现逃避潜伏期的明显延长（P<0.01）、撤去平台后跨台次数明显减少（P<0.05）、目标象限停留时间百分比明显降低（P<0.01）和搜索策略发生改变。与模型组相比,电针治疗组大鼠在4周时出现逃避潜伏期的缩短（P<0.01）、撤去平台后跨台次数的增加（P<0.05）和目标象限停留时间百分比的增高（P<0.01）,6周时出现搜索策略的改变;尼莫地平治疗组大鼠在2周时出现逃避潜伏期的缩短（P<0.01）、撤去平台后跨台次数的增加（P<0.05）和目标象限停留时间百分比的降低（P<0.01）,6周时出现搜索策略的改变;⑵尼莫地平治疗组4周时出现撤去平台后跨台次数的减少（与2周、6周比较,P<0.05）和目标象限停留时间百分比的降低（与2周、6周比较,P<0.05）;⑶正常组大鼠海马CA₃区α7nAchR染色阳性细胞体积大,染色深,形态规则,细胞数量多;模型组大鼠海马CA₃区α7nAchR染色阳性细胞染色浅,数量少;电针治疗组2周时无明显变化,4周时细胞染色加深,数量增多,6周时细胞数量明显增多,体积增大;尼莫地平治疗组2周时细胞染色深,数量增多,但形态不规则;4周时细胞染色变浅,体积变小,形态结构紊乱,6周时细胞染色深,形态较规则;⑷电针治疗组4周、6周时,尼莫地平治疗组2周、6周时和联合治疗组2周、4周、6周时出现海马α7nAchR蛋白表达量的增高（P<0.01）,其中联合治疗组2周、4周、6周时的蛋白表达量与正常组间差异已无显著性（P>0.05）。结论⑴海马CA₃区α7nAchR与SD大鼠的空间辨别学习记忆能力有关。⑵“益智醒脑”电针法和尼莫地平均能提高AD大鼠的空间辨别学习记忆能力,二者改善记忆的机制之一为上调海马CA₃区α7nAchR。⑶电针与尼莫地平存在通过上调海马CA₃区α7nAchR改善大鼠记忆能力的交互作用。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-12
前言  12-15
材料与方法  15-25
结果  25-38
讨论  38-45
结论  45
问题与展望  45-46
附照片  46-52
参考文献  52-59
综述  59-71
  参考文献  65-71
致谢  71-72
攻读学位期间发表的学术论文  72

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