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马尔尼菲青霉黑色素合成与左旋多巴的关系

作　者: 韦立莉
导　师: 梁伶
学　校: 广西医科大学
专　业: 皮肤性病学
关键词: 马尔尼菲青霉黑色素左旋多巴抗真菌药物体外药敏实验
分类号: R914
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 24次
引　用: 2次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的探索马尔尼菲青霉(Penicillium marneffei, PM)酵母相黑色素的可能来源,构建其黑素化培养体系,并研究黑素化是否影响其对抗真菌药物的敏感性,为PM的致病机制的研究提供理论依据。方法将PM标准株FRR和临床人分离株GXMU110608分别在含/不含1.0mM左旋多巴(L-DOPA)的基础培养基以及含/不含1.0mM L-DOPA的脑心浸膏培养基(BHI)进行酵母相培养10-15天,观察菌落、培养液颜色及使用电子显微镜观察超微形态学的变化。然后用三种常用抗真菌药物氟康唑(Fluconazole, FCZ)、伊曲康唑(Itraconazole, ICZ)、两性霉素B(Amphotericin B,AMB)对2株PM菌株酵母相(37℃)用微量稀释法进行体外抗真菌药敏实验,测定各药分别在黑素化或非黑素化的2株菌株的最小抑菌浓度(MIC值),比较MIC值的差异,探讨PM黑素化或非黑素化在体外对抗真菌药物敏感性的差异。结果(1)2株受试菌株在基础培养基中37℃震荡培养15天,含L-DOPA的培养液颜色变成深褐色至黑色,而不含L-DOPA的基础培养基基本不变色；(2)2株受试菌株在脑心浸膏培养基(BHI)上37℃培养10天,含L-DOPA培养基上的菌落较不含L-DOPA培养基的菌落颜色深,且菌落周围出现黑色色素；(3)光学显微镜下观察,含或不含L-DOPA的酵母细胞的形状、颜色无明显差异；(4)扫描电镜下观察,含或不含L-DOPA的酵母细胞表面无明显差异；(5)透射电镜下观察,可以看到在含有L-DOPA的酵母细胞壁内侧、胞浆及细胞器微体中有电子致密颗粒沉积,细胞壁内侧可见直径约100nm的电子致密颗粒紧密排列,细胞浆内电子致密物显著增多,微体囊腔明显扩大,微体囊腔内和核心部位电子致密物显著增多。而未含有L-DOPA的酵母细胞壁或胞浆、细胞器中未见(基础培养基培养)或有少许(BHI培养)电子致密颗粒；(6)黑素化的PM标准株及临床人分离株与未黑素化的PM标准株及人临床分离株的对AMB的MIC值均有差异,P<0.05；(7)黑素化的PM标准株及临床人分离株与未黑素化的PM标准株及人临床分离株的对FCZ及ICZ的MIC值均无差异,P>0.05。结论(1)PM酵母相可以利用L-DOPA合成多巴型黑色素,并分泌到细胞外。(2)酵母相细胞的微体可能参与多巴型黑色素细胞内合成加工过程,黑色素经加工后形成直径约100nm的颗粒分布在细胞壁内侧。(3)在体外,PM黑色素合成增多可能有降低PM对AMB敏感性的作用。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-8
前言  8-10
材料和方法  10-17
结果  17-23
附图  23-32
讨论  32-41
小结  41-42
展望  42-43
参考文献  43-47
综述  47-60
  参考文献  55-60
致谢  60-61
发表文章  61

马尔尼菲青霉黑色素合成与左旋多巴的关系

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