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泻肺逐饮汤对恶性胸腔积液大鼠TGF-β1、AQP1、CTLA-4和PFP的影响
作 者: 王珏
导 师: 刘建秋
学 校: 黑龙江中医药大学
专 业: 中西医结合临床
关键词: 恶性胸腔积液 泻肺逐饮汤 TGF-β1 AQP1 CTLA-4 PFP
分类号: R730.5
类 型: 博士论文
年 份: 2012年
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内容摘要
目的:通过观察泻肺逐饮汤对恶性胸腔积液大鼠模型胸水和胸膜组织中TGF-β1、AQP1、CTLA-4.PFP及生存期的影响,探讨泻肺逐饮汤对恶性胸腔积液的作用机制及疗效评价。方法:本实验将100只大鼠随机分为空白对照组(A)、模型组(B)、中药组(C)、力尔凡组(D)、中药加力尔凡组(E)5组,每组20只除空白对照组外,其余四组大鼠以1X108/l的艾氏腹水瘤细胞悬液胸腔内注射造模。从造模次日起,空白对照组、模型组予生理盐水灌胃7天;中药组、中药加力尔凡组给予泻肺逐饮汤灌胃,每日一次,连续7天;力尔凡组、中药加力尔凡组予力尔凡腹腔注射,隔日1次。造模后第8天取材,每组取12只鼠检测相关指标,剩余8只做生存期观察。测量各组大鼠胸水量的变化;光镜下观察胸膜组织和胸水中的细胞形态的变化;用免疫组化法测定胸水和胸膜组织中TGF-β1、AQP1的表达,用RT-PCR法测定胸水和胸膜组织中的CTLA-4和PFP的表达。结果:1.三个治疗组大鼠中位生存时间及生命延长率均较模型组延长(p<0.05),中药组与中药加力尔凡组较力尔凡组延长(p<0.05)。2.治疗组大鼠的胸水量较模型组少(p<0.05),而中药组和中药加力尔凡组差异明显(p<0.01)3.光镜下观察,模型组胸水涂片中,可见到大量癌细胞聚集成团,形态不规则。模型组胸水沉渣HE染色,可见大量癌细胞,形态不规则,胞浆比例严重失调。模型组大鼠的胸膜明显增厚、严重破坏,可见大量癌细胞核增大浓染,部分可见成团出现。各治疗组较模型组程度减轻。4.模型组大鼠胸水中TGF-β1含量高于各治疗组,与中药组、力尔凡组比较有差异(p<0.05),与中药加力尔凡组比较差异显著(p<0.01);力尔凡组、中药组与中药加力尔凡组比较无差异(p>0.05)。模型组大鼠胸膜组织中TGF-β1含量高于各治疗组,与中药组和中药加力尔凡组比较有显著差异(p<0.01);中药组的含量低于力尔凡组(p<0.05);中药加力尔凡组的含量明显低于中药组和力尔凡组(p<0.01)。5.模型组大鼠胸水中AQP1含量高于各治疗组,与中药组、力尔凡组比较有差异(p<0.05),与中药加力尔凡组比较差异显著(p<0.01);力尔凡组、中药组与中药加力尔凡组比较无差异(p>0.05)。模型组大鼠胸膜组织中AQP1含量明显高于各治疗组,比较有显著差异(p<0.01);中药加力尔凡组的含量明显低于中药组和力尔凡组(p<0.01)。6.模型组胸水和胸膜组织中CTLA-4mRNA表达较高,与中药组、力尔凡组比较有差异(p<0.05),与中药加力尔凡组比较差异显著(p<0.01);中药组和力尔凡组胸膜中CTLA-4mRNA表达高于中药加力尔凡组(p<0.05);力尔凡组高于中药组(p<0.05)。7.模型组大鼠胸水中PFPmRNA表达较低,与三个治疗组比较有明显差异(p<0.01);力尔凡组明显低于中药组、中药加力尔凡组(p<0.01)。模型组大鼠胸膜组织中PFPmRNA表达较低,与中药组和力尔凡组比较有差异(p<0.05),与中药加力尔凡组比较有差异显著(p<0.01);中药加力尔凡组高于中药组和力尔凡组(p<0.05)。结论:1.泻肺逐饮汤可以延长恶性胸腔积液大鼠的生存期。2.泻肺逐饮汤可以减少恶性胸腔积液大鼠胸水量。3.泻肺逐饮汤可以降低恶性胸腔积液大鼠胸水和胸膜组织中TGF-β1、AQP1、CTLA-4的含量。4.泻肺逐饮汤可以增加恶性胸腔积液大鼠胸水和胸膜组织中穿孔素的表达,从而治疗恶性胸腔积液
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全文目录
缩略语表 5-6 中文摘要 6-8 ABSTRACT 8-11 序言 11-13 第一部分 文献综述 13-47 1. 祖国医学对本病的认识 13-22 1.1 病名溯源 13-14 1.2 病因病机 14-15 1.3 中医药治疗 15-22 2. 恶性胸腔积液的现代医学研究进展 22-33 2.1 概说 22-23 2.2 恶性胸腔积液的形成机理 23-24 2.3 恶性胸腔积液的诊断进展 24-27 2.4 恶性胸腔积液治疗进展 27-33 3. 恶性胸腔积液与TGF-β的相关研究进展 33-37 3.1 TGF-β的分子结构 33-34 3.2 TGF-β的生物学效用 34-36 3.3 TGF-β与恶性胸腔积液的关系 36-37 4. 恶性胸腔积液与AQP-1的相关研究进展 37-41 4.1 AQPs的分子结构 37-38 4.2 AQP1的分布与意义 38-40 4.3 AQP1与恶性胸腔积液的关系 40-41 5. 恶性胸腔积液与CTLA-4的相关研究进展 41-43 5.1 CTLA-4的生物学特性 41 5.2 CTLA-4的基因结构 41-42 5.3 CTLA-4的功能 42-43 5.4 CTLA-4与恶性胸腔积液的关系 43 6. PFP与恶性胸腔积液的相关研究进展 43-47 6.1 PFP的分子生物学结构 44 6.2 PFP穿孔素介导的细胞凋亡机制 44-45 6.3 PFP穿孔素与恶性胸腔积液 45-47 第二部分 实验研究 47-66 1. 实验一:MPE动物模型建立 47-54 1.1 实验材料 47-48 1.2 实验动物分组 48 1.3 实验模型建立 48 1.4 实验动物给药 48-49 1.5 取材及样品处理 49 1.6 观察指标 49-50 1.7 数据分析 50 1.8 实验结果 50-54 2. 实验二:泻肺逐饮汤对MPE大鼠TGF-β1、AQP1的影响 54-60 2.1 实验材料 54-55 2.2 图像分析 55 2.3 统计分析 55 2.4 实验结果 55-60 3. 实验三 泻肺逐饮汤对MPE大鼠CTLA-4及PFP1的影响 60-66 3.1 实验材料 60-61 3.2 实验分组 61 3.3 动物模型的建立 61 3.4 实验动物给药 61 3.5 取材及样品处理 61 3.6 采用RT-PCR法测定胸水和胸膜组织中CTLA-4、PFP的表达 61-63 3.7 统计方法 63 3.8 实验结果 63-66 第三部分 讨论 66-78 1. 模型建立及实验动物的选择 66-67 1.1 实验动物的选择 66 1.2 实验瘤株的选择 66-67 1.3 造模方式的选择 67 2. 泻肺逐饮汤对MPE大鼠生存期的影响 67-68 3. 泻肺逐饮汤对MPE大鼠胸腔积液量的影响 68 4. 泻肺逐饮汤对恶性胸腔积液大鼠TGF-β1的影响 68-69 5. 泻肺逐饮汤对恶性胸腔积液大鼠AQP1的影响 69-70 6. 泻肺逐饮汤对恶性胸腔积液大鼠CTLA-4的影响 70 7. 泻肺逐饮汤对恶性胸腔积液大鼠PFP的影响 70-71 8. 泻肺逐饮汤治疗恶性胸腔积液大鼠的疗效分析 71-77 8.1 泻肺逐饮汤的组方沿革 71-76 8.2 泻肺逐饮汤治疗恶性胸水的作用原理 76-77 9. 问题与展望 77-78 结论 78-79 致谢 79-80 参考文献 80-88 附图 88-95 攻读博士学位期间发表的论文 95-97 个人简历 97
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 一般性问题 > 肿瘤治疗学
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