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丹参酮ⅡA对体外培养的子宫内膜异位症在位内膜细胞粘附作用的影响

作　者: 王宇非
导　师: 丛慧芳
学　校: 黑龙江中医药大学
专　业: 中医妇科学
关键词: 丹参酮ⅡA 子宫内膜异位症 在位内膜细胞 粘附作用
分类号: R711.71
类　型: 博士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


目的：子宫内膜异位症是目前临床常见的妇科疑难疾病之一,其发病机制至今尚不十分明确,因此其治疗也大多停留在改善临床症状上。目前多数中医学者认为瘀血阻滞是其主要的病因病机,活血化瘀为其基本治疗大法。现代研究证实子宫内膜能在异地种植生长,需经过粘附-侵袭-血管生成三个病理过程,分子水平的机理研究提示,阻断三者之一,即可影响子宫内膜异位症的形成和发展。而子宫内膜异位症在位内膜是关键,在位内膜的差异是发生内异症及内异症复发的决定因素。粘附是子宫内膜异位症形成的第一步骤。因此我们选择将药物直接干预在在位内膜上,研究其对粘附作用的影响,望求从“源头”阻止其发病。本课题成功的完成了子宫内膜异位症在位内膜细胞的体外培养工作,将活血化瘀药物丹参提取物丹参酮IIA作用于在位内膜,并探讨了丹参酮IIA对其粘附作用的影响。方法：1、参照Ryan等的细胞培养方法,成功建立了子宫内膜异位症在位内膜细胞体外培养模型。2、将不同浓度的丹参酮IIA作用于在位内膜细胞上,用western blot方法检测E-钙粘蛋白、CD44V6、ICAM-1蛋白含量的表达结果：1、本实验证明两组不同时期在位内膜细胞培养成活率具有统计学意义,P<0.05。两组经不同途径取材得到的子宫内膜细胞成活率无统计学意义,P>0.05。2、空白对照组E-钙粘蛋白、CD44V6蛋白、ICAM-1蛋白呈高表达丹参素IIA高剂量组与空白对照组比较,E-钙粘蛋白、CD44V6蛋白、ICAM-1蛋白含量较少,具有明显的统计学差异,p<0.01。丹参素IIA中剂量组和丹参素IIA低剂量组与空白对照组比较E-钙粘蛋白、CD44V6蛋白、ICAM-1蛋白明显较少,p<0.05。结论：1、体外培养子宫内膜异位症在位内膜细胞成功可行2、本实验结果表明丹参酮ⅡA可提高子宫内膜异位症在位内膜细胞粘附蛋白E-cadherin.CD44v6及ICAM-1的含量,可能会阻止子宫内膜异位症的发生发展。

全文目录


缩略词表  5-6
中文摘要  6-8
ABSTRACT  8-10
前言  10-12
文献综述  12-47
  一、祖国医学对子宫内膜异位症的认识  12-30
    (一) 对子宫内膜异位症病名的认识  12-13
    (二) 对子宫内膜异位症病因病机的认识  13-18
      1. 中医古籍对子宫内膜异位症病因病机的认识  13-15
      2. 现代中医学对子宫内膜异位症病因病机的认识  15-18
    (三) 中医药治疗子宫内膜异位症  18-30
      1. 中医古籍对子宫内膜异位症的治疗  18-19
      2. 现代中医药对子宫内膜异位症的治疗  19-30
  二、现代医学对子宫内膜异位症的认识  30-47
    (一) 现代医学对子宫内膜异位症的定义  30
    (二) 现代医学对子宫内膜异位症病因病机的认识  30-39
    (三) 现代医学对子宫内膜异位症病因病机的治疗  39-47
实验研究  47-67
  一、子宫内膜异位症患者在位子宫内膜细胞与正常子宫内膜细胞培养  47-55
    (一) 实验材料  47-49
      1. 主要实验试剂  47
      2. 主要仪器  47-48
      3. 主要试剂的配制  48
      4. 实验器材清洗与消毒  48-49
    (二) 实验方法  49-53
      1. 标本来源  49
      2. 原代培养  49-50
      3. 传代培养  50
      4. 细胞观察与鉴定  50-51
      5. 细胞冻存与复苏  51
      6. 统计学分析  51
      7. 结果  51-53
    (三) 结论  53-55
  二、丹参素ⅡA对子宫内膜异位症在位内膜粘附系列指标的影响  55-67
    (一) 实验材料  55-58
      1. 实验分组及给药  55
      2. 实验仪器设备  55
      3. 实验试剂  55-56
      4. 实验所需溶液的配置  56-58
    (二) 实验原理  58-59
    (三) 实验方法  59-67
      1. 总蛋白的提取  59
      2. 测蛋白质(Pr)含量  59-60
      3. 冻存变形的蛋白质(Pr)  60
      4. Western Blot具体步骤  60-63
      5. 统计学分析  63
      6. 实验结果  63-67
讨论  67-73
  一、立题依据  67-70
    (一) 粘附与子宫内膜异位症  67-69
    (二) 丹参酮ⅡA的药理药效研究  69-70
  二、丹参酮ⅡA对体外培养的子宫内膜异位症在位内膜细胞粘附作用的影响  70-73
    (一) E型钙依赖粘附蛋白(E-cadherin)  70-71
    (二) 粘附分子CD44拼构变异体6(CD44v6)  71
    (三) 细胞间粘附分子-1(ICAM-1)  71-73
结论  73-74
致谢  74-75
参考文献  75-85
附图  85-86
攻读博学位期间发表的论文  86-88
个人简历  88

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中图分类: > 医药、卫生 > 妇产科学 > 妇科学 > 女性生殖器其他疾病 > 子宫内膜异位症
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