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Smac联合顺铂抑制人耐顺铂卵巢癌裸鼠移植瘤生长的研究

作 者: 杨超
导 师: 张虹
学 校: 天津医科大学
专 业: 妇产科
关键词: 卵巢癌 顺铂耐药 裸鼠 Smac 凋亡
分类号: R737.31
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要


目的用SKOV3/DDP耐药细胞株建立人卵巢癌SKOV3/DDP耐药细胞株动物模型,通过观察靶向Smac质粒联合顺铂处理裸鼠皮下耐药细胞株SKOV3/DDP移植瘤的生长情况,分析皮下移植瘤组织Smac、XIAP蛋白表达、肿瘤细胞凋亡率及微血管密度(MVD),探讨Smac和顺铂联合作用对人卵巢癌耐药细胞株裸鼠皮下移植瘤生长的影响及对卵巢癌顺铂耐药的增敏作用。方法将人卵巢癌SKOV3/DDP细胞接种于SPF级雌性BALB/C裸鼠皮下,建立人耐药卵巢癌裸鼠移植瘤模型,随机分为5组,对照组(Ⅰ组)予生理盐水,DDP组(Ⅱ组)予DDP腹腔注射,空质粒加DDP组(Ⅲ组),Smac质粒组(Ⅳ组),Smac质粒联合DDP组(V组)。每三天给药一次,共5次。观察各组肿瘤成瘤率、平均抑瘤率以及不同处理组对裸鼠体重、食欲及精神状态的影响。测量瘤体体积变化,绘制肿瘤生长曲线;并取各组瘤体组织标本分别行WESTERN BLOT检测Smac、XIAP蛋白表达,TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡率,及免疫组化方法检查CD34并计算MVD。结果各组裸鼠成瘤率均为100%。Smac+DDP组对移植瘤的生长有明显抑制作用,瘤体体积最小,与对照组、DDP组及空质粒+DDP组比较有显著性差异(p<0.05)。DDP组、空质粒+DDP组、Smac组、Smac+DDP组的平均抑瘤率分别为:16.42%,21.46%,42.72%,72.94%。WESTERN BLOT结果显示Smac蛋白在Smac组、Smac+DDP组表达强度高,与其余三组相比,差异有统计学意义(p<0.05);XIAP蛋白在Smac+DDP组表达强度较其余组低,差异有统计学意义(p<0.05)。对照组、DDP组、空质粒+DDP组、Smac质粒组、Smac质粒+DDP组的肿瘤细胞平均凋亡率分别为(19.90±3.18)%,(21.82±4.40)%,(22.64±3.81)%,(30.23±4.06)%,(48.59±4.47)%。各组MVD计数分别为:(24.8±5.36)、(21.2±3.11)、(19.8±3.70)、(14.4±3.85)、(11.6±2.70);其中,Smac+DDP组MVD最低,与对照组、DDP组及空质粒+DDP组有统计学差异(p<0.05)。结论1.Smac质粒联合顺铂对耐药卵巢癌移植瘤生长抑制作用较单一用药显著,Smac和顺铂对诱导耐药卵巢癌细胞凋亡有协同作用;2.Smac可增强人耐药卵巢癌移植瘤对顺铂的敏感性;3.Smac能减少卵巢癌微血管生成,这可能是其抑制肿瘤生长、增加耐药卵巢癌对顺铂敏感性的另一机制。

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 女性生殖器肿瘤 > 卵巢肿瘤
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