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那可丁对卵巢癌SKOV3细胞SKP-2表达的影响

作 者: 黄军岩
导 师: 程建新
学 校: 河北医科大学
专 业: 妇产科学
关键词: 那可丁 SKP-2 增殖抑制 FCM 顺铂 MTT
分类号: R737.31
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
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内容摘要


目的:本实验拟采用体外培养卵巢癌细胞系SKOV3(卵巢浆液性囊腺癌细胞株)。分别观察那可丁以及那可丁联合顺铂对卵巢癌SKOV3细胞SKP-2蛋白表达的影响,探讨那可丁及那可丁联合顺铂抑制肿瘤细胞增殖的情况,以期那可丁成为新型的抗卵巢癌药物,为卵巢癌的临床治疗开辟新的思路。方法:1、在96孔板中体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,并在倒置显微镜下观察细胞的形态变化及增殖情况。2、待SKOV3细胞培养24h时,将浓度为5,10,20,40,80,160μmol/L的那可丁分别加入细胞中,同时设立对照组,并分别在C02恒温箱中培养24、48、72小时时,采用MTT比色法检测细胞增殖情况。3、分别将10μg/ml的顺铂、20,40μmol/L浓度的那可丁、及那可丁联合顺铂加入SKOV3细胞培养板中,同时设立对照组,并分别在C02恒温箱中培养24、48、72小时时,采用流式细胞仪检测对照组、顺铂、那可丁及那可丁联合顺铂对SKP-2蛋白表达的影响。4、采用SPSS17.0统计软件,LSD-t检验检测组间差异的显著性,计量数据以“均数±标准差”(x±s)表示,多组间比较利用单因素方差分析,P<0.05为有显著性差异的标准。结果:1.MTT法检测那可丁对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响。利用在570nm波长处的吸光度(OD)值得出对照组、5、10、20、40、80、160μmol/L那可丁作用于SKOV3细胞24h时细胞的抑制率分别为0.6392±0.0547、16.31±12.51%、19.02±13.15%、35.34±14.23%、50.7±11.78%、58.99±8.16%、59.74±7.26%,作用SKOV3细胞48小时时细胞的抑制率分别为0.8943±0.0234、24.08±10.13%、31.01±15.01%、43.77±10.01%、77.30±8.56%、87.97±3.02%、89.20±1.98%,作用SKOV3细胞72小时细胞的抑制率分别为0.8648±0.0346、32.83±7.23%、34.02±13.11%、55.16±5.04%、89.22±3.79%、92.88±1.46%、94.06±2.06%,由此可以看出,随着那可丁浓度的增加以及作用时间的延长,卵巢癌细胞的抑制率呈明显的上升趋势,各组之间比较,差异有统计学意义(P<0.05),提示那可丁对SKOV3细胞增殖的抑制作用与其浓度及作用时间呈正相关;因此,那可丁对卵巢癌SKOV3细胞的增殖有明显的抑制作用,并且与那可丁的浓度及其作用时间密切相关。2.流式细胞仪检测那可丁作用于SKOV3细胞对SKP-2蛋白表达的影响。流式细胞仪检测对照组与治疗组对SKOV3细胞SKP-2蛋白表达的结果显示:24小时时,对照组、10μg/mL顺铂、20、40μmol/L那可丁以及20、40μmol/L那可丁分别联合10μg/mL顺铂作用于SKOV3细胞后SKP-2的荧光指数FI分别为:1.000±0.008、0.967±0.018、0.980±0.021、0.846±0.035、0.767±0.017、0.698±0.019;作用48小时时,对照组、20、40μmol/L那可丁以及20、40μmol/L那可丁联合10μg/mL顺铂作用于SKOV3细胞后SKP-2的荧光指数FI分别为:1.000±0.010、0.932±0.021、0.920±0.022、0.798±0.035、0.650±0.026、0.576±0.034。作用72小时时,对照组、20、40μmol/L那可丁以及20、40μmol/L那可丁联合10μg/mL顺铂作用于SKOV3细胞后SKP-2的荧光指数FI分别为:1.000±0.012、0.860±0.016、0.870±0.022、0.699±0.017、0.543±0.031、0.501±0.027。结果显示:各组与对照组相比,SKP-2的蛋白表达量降低,差异有统计学意义(p<0.05)。结论:1通过MTT法测在570nm波长处的OD值发现,那可丁能够抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖,并与其浓度和作用时间呈正相关。2那可丁联合顺铂作用于卵巢癌SKOV3细胞的抑制率比单独使用时增加,表明那可丁与顺铂有协同抗卵巢癌作用。3那可丁作用于卵巢癌细胞时可使SKP-2蛋白表达量下降,联合顺铂后表达量下降更明显,表明那可丁能够抑制卵巢癌细胞的生长并且联合顺铂后抑制作用增强,为卵巢癌的临床治疗开辟了新的思路。

全文目录


中文摘要  4-6
英文摘要  6-9
英文缩写  9-11
前言  11-12
材料与方法  12-16
结果  16-17
附图  17-18
附表  18-20
讨论  20-24
结论  24-25
参考文献  25-30
综述 SKP-2 在恶性肿瘤中的研究进展  30-42
  参考文献  37-42
致谢  42-43
个人简历  43

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 女性生殖器肿瘤 > 卵巢肿瘤
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