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SCIN与肾透明细胞癌增殖关系的初步研究

作 者: 李瑞蕾
导 师: 宋鑫
学 校:
专 业: 肿瘤学
关键词: 肾透明细胞癌 SCIN 细胞周期 增殖
分类号: R737.11
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要


目的:细胞异常增殖被认为是肾透明细胞癌发生的重要机制。SCIN基因编码蛋白scinderin属于肌动蛋白结合蛋白,通过调控细胞骨架蛋白F-actin,参与细胞骨架结构重构、分泌、分化、运动,甚至是肿瘤发生等方面都可能发挥着重要作用。本研究首次在肾透明细胞癌细胞中探讨SCIN的功能,拟通过阻断内源性SCIN表达研究SCIN对肾透明细胞癌增殖影响的可靠证据,为进一步研究肾透明癌增殖的分子机制提供实验佐证。方法:1、Westernblotting检测3株肾透明细胞癌细胞系769-P、786-O、caki-1由SCIN表达。2、利用慢病毒构建系统构建SCIN-shRNA干扰载体。3、利用慢病毒SCIN-shRNA干扰载体感染肾透明细胞癌769-P细胞系,RT-PCR和Westernblotting验证敲除效率。4、MTS实验,细胞生长曲线,流式细胞周期分析研究SCIN与769-P细胞增殖的关系。5、利用RT-PCR检测敲除SCIN后,769-P细胞周期相关蛋白mRNA表达差异,以期寻找SCIN下游靶基因。结果:1、3株肾透明细胞癌细胞系均SCIN表达,SCIN表达具有普遍性,同时选取769-P细胞进行下一步实验。2Westernblotting和RT-PCR验证证实,SCIN-shRNA慢病毒干扰载体能够降低769-P细胞中的SCIN表达。3、MTS实验,细胞生长曲线,流式细胞周期分析证实,敲除SCIN后,细胞增殖减弱,细胞周期阻滞在G2/M期。4、RT-PCR证实敲除SCIN后,CDKl表达降低。结论:SCIN可能通过调控CDK1促进肾透明癌细胞增殖,参与肾透明细胞癌的恶性生物学行为。

全文目录


目录  4-5
中文摘要  5-7
Abstract  7-9
缩略词表  9-10
前言  10-13
材料  13-18
方法  18-30
结果  30-38
  一、ccRCC细胞系中SCIN的表达及SCIN-shRINA慢病毒感染细胞后SCIN表达干扰鉴定  30-33
  二、SCIN-shRNA慢病毒细胞内沉默SCIN成功后细胞功能实验  33-37
  三、SCm-shRNA慢病毒细胞内沉默SCIN成功后,寻找下游祀基因  37-38
讨论  38-42
结论  42-43
参考文献  43-45
综述  45-56
  参考文献  53-56
硕士学位期间主要成绩  56-58
致谢  58-59

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 泌尿器肿瘤 > 肾、肾盂肿瘤
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