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骨髓瘤细胞诱导的骨髓微环境重塑及其在多发性骨髓瘤发病中的作用
作 者: 张蕴玉
导 师: 傅晋翔
学 校: 苏州大学
专 业: 血液病学
关键词: 多发性骨髓瘤 间充质干细胞 成骨分化 细胞间隙连接蛋白
分类号: R733.3
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
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内容摘要
【目的】在体外不同共培养体系中观察多发性骨髓瘤(MM)细胞对骨髓间充质干细胞(BMMSCs)增殖、分化潜能、基因表达及细胞因子表达的影响;并分析正常人BMMSCs与MM细胞相互作用后,对MM细胞周期及细胞间隙连接蛋白(connexin,Cx)基因Cx43、Cx45表达的影响;探讨MM细胞能否在体外诱导正常BMMSCs出现类似MM-BMMSCs样异常及BMMSCs对MM细胞GJIC功能的影响。【方法】验分为三组:对照组,间接共培养组及U266条件培养基(U266-CM)直接共培养组,MM细胞与BMMSCs在体外经不同培养体系共培养后行细胞计数检测BMMSCs增殖能力的变化;Von Kossa染色观察BMMSCs成骨分化潜能的变化;RT-PCR检测MM细胞对BMMSCs基因RANKL/OPG、IL-1β、DKK1表达及细胞因子SDF-1α、IGF-1表达的影响;PI染色流式细胞术(FCM)分析BMMSCs对MM细胞周期的影响,RT-PCR检测BMMScs与MM细胞相互作用后MM细胞Cx43、Cx45基因表达的变化。【结果】BMMSCs与MM细胞间接共培养及与U266-CM直接共培养后增殖能力无明显变化;Von Kossa染色提示两共培养组BMMSCs成骨分化潜能较差,矿化基质沉积较正常对照组少;BMMSCs与MM细胞共培养24h后共培养组RANKL、IL-1β、DKK1基因表达上调,OPG基因表达下调;细胞因子SDF-1表达下调、IGF-1上调;BMMSCs与MM细胞直接及间接共培养后,FCM检测提示共培养组MM细胞S期细胞比例增高,间接共培养组MM细胞Cx43表达无明显变化,但直接共培养组MM细胞Cx43表达明显减低,Cx45两共培养组与对照组无明显差异。【结论】MM细胞与BMMSCs体外共培养可以诱导BMMSCs发生改变,MM细胞可以抑制BMMSCs成骨分化潜能,破骨活化及成骨抑制基因表达增加,这与MM-BMMSCs相似,说明体外MM细胞可以诱导正常BMMSCs出现类似MM-BMMSCs样异常。BMMSCs对MM细胞增殖的促进作用可能与下调MM细胞Cx43的表达有关。
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全文目录
中文摘要 4-6 Abstract 6-9 研究背景 9-22 一. 骨髓微环境与多发性骨髓瘤的关系 9-15 二. 间隙连接蛋白(Connexin, Cx)与肿瘤 15-17 参考文献 17-22 第一部分 多发性骨髓瘤细胞对骨髓间充质干细胞生物学特性的影响 22-38 前言 22 1 材料与方法 22-27 2 结果 27-34 讨论 34-36 参考文献 36-38 第二部分 骨髓间充质干细胞对多发性骨髓瘤细胞连接蛋白表达的影响 38-48 前言 38 1 材料与方法 38-41 2 结果 41-44 讨论 44-46 参考文献 46-48 结论 48-49 综述 49-56 参考文献 53-56 攻读硕士学位期间公开发表的论文 56-57 中英文对照缩略词表 57-58 致谢 58-59
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 造血器及淋巴系肿瘤 > 骨髓肿瘤
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