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心肺脑复苏后大鼠JNK、P38MAPK、NF-KB的变化和药物治疗研究

作　者: 刘芳
导　师: 刘晓亮
学　校: 吉林大学
专　业: 急诊医学
关键词: 血管加压素 心肺脑复苏 JNK P38MAPK NF-KB
分类号: R541.6
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


目的：探讨血管加压素对心肺脑复苏大鼠海马区JNK、P38MAPK、NF-kB以及casepase-3的影响。比较肾上腺素、血管加压素、以及联合用药组对大鼠心肺脑复苏的疗效。方法：将250只Wistar大鼠(雌雄不限)随机分为5组（n=50只/组），分别为：1、假手术组：只进行插管，不造成窒息，不进行心肺复苏。2、对照组：窒息导致心脏骤停，常规给予其心肺复苏，给予生理盐水1ml。3、肾上腺素组：做窒息模型，常规体外心肺复苏，复苏时给予其等容量的肾上腺素0.2mg/Kg。4、血管加压素：做窒息模型，常规体外心肺复苏，复苏时给予其等容量血管加压素0.8U/Kg，余同肾上腺组。5、联合用药组：做窒息模型，常规体外心肺复苏，复苏时给予肾上腺素0.2mg/kg+血管加压素0.8U/kg,等剂量。因对照组大鼠复苏后成活概率极低，所以除对照组外，其余各组复苏成功大鼠于1、3、6、12小时处死，留取大脑海马区，通过免疫组化方法检测大鼠海马内P38、JNK、caspase-3、NF-KB的表达。并计算各组大鼠自主循环恢复率、大脑海马区病理学变化。结果：1、血管加压素组、肾上腺素组及联合用药组复苏成功数值比较分别为39/50,24/50,42/50，肾上腺素组与联合组复苏自主循环恢率比较，差异有统计学意义（p＜0.05），联合用药组与血管加压素比较，差异无统计学意义（p＞0.05）。2、联合用药组与血管加压联合用药组素脑组织海马区中的JNK、P38、caspase-3、NF-KB免疫组化评分明显低于肾上腺素组，且差异有统计学意义（p＜0.05），联合用药组、血管加压素两组比较差异无统计学意义（p＞0.05）。3、在HE染色后，光镜观察病理学结果，肾上腺素组、血管加压素组、联合用药组较正常组有神经元凋亡的增多及神经元水肿，三组之间比较形态学差异不明显。但在电镜超微结构下可见，比起血管加压素组和联合用药组，应用肾上腺素组的大鼠神经细胞变性更严重，水肿更明显，线粒体损伤严重。而联合用药组和单用血管加压素组两者损伤相对较轻，且两组间差异不明显。结论：除对照组与假手术组外，联合用药组自主循环恢复率与肾上腺素比较，差异有统计学意义(p＜0.05)，联合用药组与血管加压素组比较差异不明显（p＞0.05）。通过形态学及免疫组化结果分析，联合用药组及血管加压素组更能够增加脑部血液灌流，减少神经元凋亡，能够抑制MAPK信号通路以及NF-kB信号通路的激活，减轻缺血再灌注损伤。

全文目录


摘要  4-6
Abstract  6-12
第1章 绪论  12-15
第2章 文献综述  15-21
  2.1 血管加压素的作用机制研究  15-17
  2.2 血管加压素应用于临床进展  17-18
  2.3 血管加压素应用于动物实验  18
  2.4 血管加压素与不同药物联合应用  18-20
  2.5 结语  20-21
第3章 实验材料  21-23
  3.1 实验动物  21
  3.2 试剂及仪器  21-23
    3.2.1 试剂  21
    3.2.2 仪器  21-23
第4章 实验方法  23-28
  4.1 实验动物的分组方法  23
  4.2 实验动物模型的制作  23
  4.3 复苏及给药方法  23-24
  4.4 判定标准  24
  4.5 标本处理  24-25
  4.6 实验步骤  25-28
    4.6.1 免疫组化测 JNK、P38、caspase-3、NF-KB  25-26
    4.6.2 石蜡切片苏木紫—伊红染色法的基本步骤（HE 染色）  26-27
    4.6.3 免疫组化结果判读  27
    4.6.4 统计学方法  27-28
第5章 实验结果  28-46
  5.1 复苏前各组大鼠基本参数比较  28
  5.2 ROSC 成功率的比较  28-29
  5.3 ROSC 恢复的大鼠所需时间及用药次数的比较  29
  5.4 脑组织病理结果  29-32
    5.4.1 大鼠脑组织海马区光镜下病理变化  29-31
    5.4.2 大鼠脑组织电镜形态学结果  31-32
  5.5 大鼠脑组织海马区免疫组化 S-P 法及评分  32-46
    5.5.1 大鼠海马区 caspase-3 免疫组化染色  32-35
    5.5.2 大鼠海马区 caspase-3 免疫组化评分  35-36
    5.5.3 大鼠海马区 JNK 免疫组化染色  36-38
    5.5.4 大鼠海马区 JNK 免疫组化评分  38-39
    5.5.5 大鼠海马区 P38 免疫组化染色  39-41
    5.5.6 大鼠海马区 P38 免疫组化评分  41-42
    5.5.7 大鼠海马区 NF-kBp65 免疫组化染色  42-44
    5.5.8 大鼠海马区 NF-kBp65 免疫组化评分  44-46
第6章 讨论  46-49
第7章 结论  49-50
参考文献  50-56
作者简介及读研期间发表的学术论文  56-57
致谢  57-58

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 心脏、血管（循环系）疾病 > 心脏疾病 > 血液循环衰竭
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