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淫羊藿苷对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制研究

作　者: 陈凯
导　师: 齐敏友
学　校: 浙江工业大学
专　业: 药理学
关键词: 糖尿病肾病转化生长因子-β1 基质金属蛋白酶 Ⅳ型胶原淫羊藿苷
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

目的：研究淫羊藿苷对糖尿病(Diabetes Mellitus, DM)大鼠肾组织转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)、基质金属蛋白酶-2、9(matrix metalloproteinases, MMP-2、9)及Ⅳ型胶原(Collagen typeⅣ, Ⅳ)表达的影响，探讨淫羊藿苷对糖尿病大鼠肾脏的保护机制。方法：Sprague-Dawley大鼠尾静脉注射链脲佐菌素(STZ,40mg/kg)建立糖尿病大鼠模型，72小时后测血糖，血糖≥16.7mmol/L造模成功，随机分为：对照组、糖尿病模型组、淫羊藿苷组(80mg/kg/d, i.g.)。大鼠饲养12周，第5周开始给药连续8周。心脏取血测血清尿素氮(blood ureanitrogen, BUN)、肌酐(creatinine, Cr)；摘取双侧肾脏，称重，计算肾脏脏器指数(kidney weight/body weight, KW/BW)；测肾组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、羟脯氨酸(hydroxyproline, Hyp)活性；采用HE，Masson染色观察肾脏的病理组织学的改变；免疫组化方法检测肾组织TGF-β1、Ⅳ型胶原、MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平；RT-PCR方法检测MMP-2、MMP-9基因表达。结果：1.各组12周末，模型组大鼠的血糖、KW/BW水平较对照组显著升高(P<0.01)；淫羊藿苷组的KW/BW水平显著低于模型组(P<0.01)，血糖水平与模型组无显著差异(P>0.05)。2.各组大鼠血清BUN、Cr的变化：模型组大鼠的BUN、Cr活性较对照组升高(P<0.01)；淫羊藿苷干预后BUN、Cr活性较模型组显著下降(P<0.05)。3.肾组织SOD、MDA、Hyp的变化：模型组大鼠的SOD活性较对照组显著降低，MDA、Hyp含量显著升高(P<0.01)；淫羊藿苷干预后SOD活性较模型组显著升高，MDA、Hyp含量显著下降(P<0.05)。4.模型组大鼠肾小球明显肥大，肾小管间质纤维化程度加重；淫羊藿苷组减轻肾小球肥大，抑制肾小管间质纤维化。5.与对照组相比，模型组大鼠肾组织TGF-β1、Ⅳ型胶原的蛋白表达显著增加(P<0.01)，MMP-2、MMP-9蛋白及基因表达显著减少(P<0.01,P<0.05)，淫羊藿苷组TGF-β1、Ⅳ型胶原的蛋白表达明显减少，MMP-2、MMP-9蛋白及基因表达显著增加(P<0.01, P<0.05)。结论：淫羊藿苷对糖尿病大鼠肾脏具有保护作用，其作用机制可能是通过调节TGF-β1、MMP-2、MMP-9、Ⅳ型胶原的表达，从而发挥其保护作用。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-12
第一章绪论  12-27
  1.1 糖尿病肾病病理及其发病机制研究进展  12-20
    1.1.1 糖尿病肾病的特征和病理表现  12-13
    1.1.2 糖尿病肾脏病的发病机理与研究进展  13-20
  1.2 糖尿病肾病中西医治疗及淫羊藿苷研究进展  20-27
    1.2.1 糖尿病肾病的治疗现状  20-24
    1.2.2 淫羊藿苷的研究进展  24-27
第二章淫羊藿苷对糖尿病肾病的保护作用及其机制研究  27-51
  2.1 前言  27
  2.2 材料  27-30
    2.2.1 实验动物  27-28
    2.2.2 主要试剂  28
    2.2.3 药物  28-29
    2.2.4 仪器  29
    2.2.5 溶液及药品配制  29-30
  2.3 方法  30-39
    2.3.1 动物模型的建立  30
    2.3.2 脏器系数  30
    2.3.3 肾脏组织生化指标测定  30-35
    2.3.4 肾脏组织病理学检测  35-36
    2.3.5 肾脏组织免疫组化检测  36
    2.3.6 肾脏组织 RT-PCR 检测  36-38
    2.3.7 统计方法  38-39
  2.4 实验结果  39-48
    2.4.1 一般情况  39-40
    2.4.2 肾脏组织生化指标变化  40-42
    2.4.3 肾脏组织病理形态变化  42-43
    2.4.4 肾脏组织免疫组化学染色情况  43-47
    2.4.5 肾脏组织 RT-PCR 半定量 MMP-2 和 MMP-9 mRNA 表达情况  47-48
  2.5 讨论  48-50
    2.5.1 大鼠 DN 模型评价  48-49
    2.5.2 淫羊藿苷对 DN 保护作用机制分析  49-50
  2.6 小结  50-51
参考文献  51-59
攻读硕士学位期间已发表的论文  59-60
致谢  60

淫羊藿苷对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制研究

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