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解毒活血法对单侧输尿管梗阻大鼠炎症细胞因子的影响

作　者: 杨京京
导　师: 王香婷
学　校: 河北医科大学
专　业: 中医诊断学
关键词: 肾小管间质纤维化 单侧输尿管梗阻 解毒活血法 白细胞介素-1β 肾肿瘤坏死因子-α 单核细胞趋化蛋白-1
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


肾小管间质纤维化(tubular interstitial fibrosis,TIF)几乎是各种慢性肾脏疾病进展为终末期肾衰竭的共同病变过程,以肾小管扩张或萎缩、间质炎症细胞浸润、成纤维细胞增殖、活化以及细胞外基质(extracellular matrix,ECM)沉积等为病理特征。炎症反应是TIF的始动环节之一并贯穿其始终,有效抑制炎症反应对控制肾小管间质纤维化的发生发展有着重要意义。目的：本研究采用单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)的方法建立肾小管间质纤维化模型,以缬沙坦为对照药,通过观察解毒活血法对大鼠肾脏组织病理形态学的改变,对血肌酐(serum creatinine,Scr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)及单核细胞趋化蛋白-1(monoocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的影响,探讨其对UUO大鼠的保护作用及可能机制,为临床治疗提供实验依据。方法：健康雌性Sprague Dawley(SD)大鼠50只,随机分为假手术组,模型组,缬沙坦组,解毒活血低剂量组,解毒活血高剂量组,每组10只,适应性喂养1周。第8天,除假手术组,其余各组结扎左侧输尿管复制UUO模型。所有大鼠灌胃给药,缬沙坦组给予26mg生药/kg.d；解毒活血低剂量组予12g生药/kg·d；解毒活血高剂量组予24g生药/kg·d,容量均为lml/100g,假手术组和模型组予等容量生理盐水,每日1次,共14天。所有大鼠于第22天断头处死,常规制备血清,检测血肌酐和血尿素氮。切取左肾,制备肾组织匀浆,放射免疫法检测IL-1p；行HE、Masson染色,观察肾组织病理形态学改变,免疫组化法检测TNF-α和MCP-1。结果：1各组大鼠的一般情况假手术组大鼠的被毛、饮食、精神状态、活动等无明显改变。模型组大鼠的被毛蓬乱,饮食减少,精神萎靡,活动减少。各治疗组大鼠的一般情况均好于模型组。2各组大鼠血肌酐、血尿素氮的检测结果模型组大鼠的血肌酐（117.090±14.521μmol/L）、血尿素氮（9.689±0.570mmol/L）较假手术组（61.118±12.492，7.485±0.354）显著升高（P＜0.01），缬沙坦组、解毒活血高、低剂量组的血肌酐（95.218±15.805，81.914±9.598，83.863±8.716）、血尿素氮（8.832±0.289，8.374±0.297，8.573±0.344）较模型组均明显降低（P＜0.01）。3各组大鼠的肾组织病理形态学改变HE染色显示：假手术组的肾小管上皮细胞排列整齐，无明显异常改变。模型组的肾小管上皮细胞变性、坏死、脱落，肾小管扩张，间质大量炎症细胞浸润。缬沙坦组，解毒活血高、低剂量组的肾小管上皮细胞变性、坏死及炎症细胞浸润程度均比模型组减轻。Masson染色显示：假手术组的间质有少量胶原成分的表达。模型组间质可见大量胶原沉积。缬沙坦组，解毒活血高、低剂量组的胶原沉积均比模型组显著减少。4各组大鼠肾组织TNF-α的免疫组化检测结果假手术组的肾小管上皮细胞有少量TNF-α的表达，呈浅黄色。与假手术组相比，模型组表达显著增多，呈棕黄色。与模型组相比，缬沙坦组TNF-α的表达减少，呈浅黄色。解毒活血高、低剂量组均比模型组明显减少，呈浅黄色。5各组大鼠肾组织MCP-1的免疫组化检测结果假手术组有极少量MCP-1的表达。与假手术组相比，模型组表达显著增多，主要见于肾小管上皮细胞，呈棕黄色。与模型组相比，缬沙坦组MCP-1的表达减少，呈浅黄色。解毒活血高、低剂量组均比模型组明显减少。6各组大鼠肾组织IL-1β放射免疫法的检测结果模型组大鼠肾组织的IL-1β（144.510±14.462pg/ml）表达水平较假手术组（107.640±14.657）显著升高（P＜0.01），缬沙坦组（130.590±9.803）、解毒活血低剂量组（127.420±11.274）较模型组均明显降低（P＜0.05），解毒活血高剂量组（124.580±12.060）较模型组显著降低（P＜0.01）。结论：1解毒活血方药具有显著减轻肾小管间质纤维化大鼠肾组织结构的损伤，改善肾功能的作用。从实验角度证实解毒活血方药能明显减轻肾小管间质纤维化，起到保护肾脏的作用。2单侧输尿管结扎大鼠肾组织中的炎症细胞因子IL-1β、TNF-α、MCP-1表达明显升高，表明炎症反应是导致TIF形成的重要机制之一。3解毒活血方药能降低单侧输尿管结扎大鼠肾组织中IL-1β、TNF-α、MCP-1的高表达，通过抑制炎症反应来减缓肾小管间质纤维化的进程。

全文目录


摘要  4-7
ABSTRACT  7-11
前言  11
材料与方法  11-15
结果  15-17
附图  17-23
附表  23-24
讨论  24-28
结论  28-29
参考文献  29-34
综述 中药复方防治肾间质纤维化的实验研究进展  34-47
  参考文献  44-47
致谢  47-48
个人简历  48

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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