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高效液相色谱法测定广防己及其配伍组中马兜铃酸A含量

作　者: 孙康
导　师: 吴建红
学　校: 湖北中医药大学
专　业: 中医方剂学
关键词: 广防已马兜铃酸肾毒性配伍减毒实验研究
分类号: R284.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

目的：本实验将广防已与不同药物配伍,通过高效液相色谱法测定广防已及其各配伍组生药、灌胃大鼠血浆及肾脏组织中马兜铃酸A (Aristolochic Acid A, AA)的含量,从而找到能够制约广防已肾毒性的最佳配伍组。方法：以防已汤为主方,将广防已与生晒参、肉桂、茯苓以及黄连和车前子配伍,分为10组：空白对照组,单味广防已组,广防已生晒参组,广防已茯苓组,广防已肉桂组,广防已黄连组,广防已车前组,广防已生晒参茯苓肉桂组,广防已生晒参茯苓肉桂黄连组和广防已生晒参茯苓肉桂车前组。运用高效液相色谱法测定其在生药、大鼠血浆和肾脏组织中AA含量。结果：广防已在可致肾损剂量之下,与黄连配伍后在生药、大鼠血浆和肾脏组织中所测得的AA含量最少,其次是车前子、茯苓、肉桂、生晒参；在复方配伍中马兜铃酸A含量更少。通过SD大鼠大剂量给药7天,检测大鼠血浆及肾组织匀浆液中AA含量,发现配伍组的AA含量比单味广防已组均低,而且含有黄连、车前及其复方配伍组的大鼠血浆以及肾组织匀浆中未检测到AA。结论：1.通过适当配伍,广防已的毒性是可被降低的,而广防已配伍黄连组所测得AA含量最低,这可能与黄连中含有大量生物碱有关；2.通过SD大鼠短期、大剂量给药实验,说明短期配伍使用广防已比单用广防已毒性小即安全性增大。

全文目录

摘要  6-8
Abstract  8-10
前言  10-12
第一章高效液相色谱法测广防已及其配伍各组生药中马兜铃酸A含量  12-24
  1 实验药物、仪器以及试剂  12-13
    1.1 实验药物  12
    1.2 实验仪器  12
    1.3 实验试剂  12-13
  2 实验方法  13-19
    2.1 色谱条件  13
    2.2 对照品马兜铃酸A的溶液制备  13
    2.3 供试品溶液的制备  13
    2.4 马兜铃酸A的定性分析  13-15
    2.5 马兜铃酸A对照品的线性关系考察  15-16
    2.6 精密度试验  16
    2.7 稳定性试验  16
    2.8 重复性试验  16-17
    2.9 加样回收率试验  17
    2.10 统计学处理  17-18
    2.11 各组供试品中马兜铃酸A含量测定  18-19
  3 结论  19
  4 讨论  19-24
    4.1 采用高效液相色谱法检测药物中马兜铃酸A含量的依据  19-20
    4.2 高效液相色谱法测定广防已配伍后马兜铃酸A含量的变化  20-21
    4.3 色谱条件选用的根据  21-24
第二章高效液相色谱法测大鼠血浆和肾脏组织中马兜铃酸A含量  24-41
  1 实验药物、仪器、试剂与动物  24-25
    1.1 实验药物  24
    1.2 实验仪器  24
    1.3 实验试剂  24
    1.4 实验动物  24-25
  2 实验方法  25-36
    2.1 实验动物分组与给药  25
    2.2 色谱条件  25
    2.3 马兜铃酸A对照品溶液的制备  25-26
    2.4 含药及空白血浆的制备  26
    2.5 含药及空白肾组织均浆液的制备  26
    2.6 血浆及肾组织均浆液添加样品溶液的制备  26
    2.7 系统适应性试验  26-29
    2.8 线性关系考察  29-30
    2.9 精密度试验  30-31
    2.10 稳定性试验  31
    2.11 重复性实验  31-32
    2.12 加样回收率试验  32-33
    2.13 各实验组大鼠血浆中马兜铃酸A含量测定  33-35
    2.14 各实验组大鼠肾组织中马兜铃酸A含量测定  35-36
  3 结论  36
  4 讨论  36-40
    4.1 检测大鼠血紫及臂组织中马兒铃酸A含量的意义  36-37
    4.2 色谱条件选择的依据  37-38
    4.3 大鼠血装及肾组织制备的理论依据  38-40
  5 本研究可能存在的局限性  40-41
结语  41-42
参考文献  42-46
文献综述  46-52
  参考文献  50-52
致谢  52-53
附图  53-59

高效液相色谱法测定广防己及其配伍组中马兜铃酸A含量

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