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荞麦无菌苗培养条件优化及离体再生体系研究

作　者: 陈佳
导　师: 冯佰利
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 植物资源学
关键词: 荞麦无菌苗组织培养再生
分类号: S517
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

荞麦是我国高寒山区人民主要的粮食作物，它营养丰富，还具有降血糖﹑降血脂以及降血压的保健功效，是不可多得的既可食用又可保健用的粮食作物，因此荞麦产业的发展在我国具有十分广泛的前景和潜力。甜荞属于异花授粉作物，授粉困难导致结实和产量较低，因此，利用一些技术手段来改良其品质就成为必不可少的条件。一方面，可以尝试用种间杂交的方法结合不同种荞麦的有利性状，希望能够发挥其杂种优势，得到新品种；另一方面，通过组织培养和转基因技术等现代生物技术改良荞麦品质和产量也是一个重要的手段。本论文就荞麦再生体系的建立进行剖析，揭示打破荞麦种子休眠的方法和植物激素对荞麦组织培养的影响，探索荞麦再生体系建立的技术路线，为荞麦的组织培养及植株再生提供更为全面、深入的理论依据，也为转基因荞麦的研究提供理论基础。试验得出如下主要结论：（1）采用5种不同的破除种子休眠的方法和设置3种不同的培养条件，对组织培养中荞麦无菌苗的培养进行优化，研究筛选出了荞麦无菌苗培养的最佳方法，为荞麦再生体系的建立和转基因研究奠定基础。试验结果表明，经过人工去皮的种子发芽率78%，长势等明显好于其他四种处理的种子；光培养条件下的无菌苗成苗率高于暗培养下无菌苗，且健壮程度也远远大于暗培养的无菌苗；1/2MS培养基里培养的无菌苗成苗率大于MS培养基，且在发芽的个体中，93.8%的个体成苗。即人工去皮种子培养于1/2MS培养基，25℃恒温光照培养可以得到大量健壮的无菌苗供试验后续使用。（2）以无菌苗的子叶和胚轴为外植体，研究荞麦愈伤诱导的培养基设计，研究结果表明，子叶和胚轴在附加2mg/L2,4-D、1mg/L6-BA的MS培养基中愈伤组织生长状态最好，最适合后期的分化再生，且诱导率都在90%以上，其中胚轴诱导率全为100%。（3）以诱导得到的子叶和胚轴愈伤组织来研究荞麦的分化再生，进行最佳培养基筛选，结果表明，子叶来源的愈伤在2mg/L6-BA、1.5mg/L KT培养基中分化效率为64.0±6.9且产生不定芽的数量最多长势最好，胚轴来源的愈伤在2mg/L6-BA、0.5mg/LKT培养基中的分化效率为47.5±4.8且不定芽数量最多长势最好；不定芽接种于0.6mg/LNAA的1/2MS培养基中生根率可达100%，经炼苗后移栽存活率可达70%以上。

全文目录

摘要  6-7
ABSTRACT  7-11
第一章文献综述  11-27
  1.1 概述  11-16
    1.1.1 荞麦的起源及分布  11-12
    1.1.2 荞麦的营养成分及药用价值  12-14
    1.1.3 荞麦的市场前景  14-15
    1.1.4 我国荞麦的开发利用现状  15-16
  1.2 植物组织培养概述  16-22
    1.2.1 植物组织培养的特点  16-17
    1.2.2 植物组织培养类型  17-18
    1.2.3 植物组织培养的应用前景  18-21
    1.2.4 植物组织培养的效益评价  21
    1.2.5 植物组织培养的研究进展  21-22
  1.3 我国荞麦组培的研究现状  22-23
  1.4 高效繁殖无菌苗对植物组织培养的意义  23-25
    1.4.1 种子休眠对高效繁殖无菌苗的影响  23-25
    1.4.2 优良无菌苗的研究现状  25
  1.5 本研究的背景及目的意义  25-26
  1.6 试验内容及技术路线  26-27
    1.6.1 试验内容  26
    1.6.2 技术路线  26-27
第二章荞麦无菌苗培养条件优化  27-33
  2.1 试验材料和方法  27-28
    2.1.1 主要仪器设备及试剂  27
    2.1.2 试验材料  27
    2.1.3 试验方法  27-28
  2.2 结果与分析  28-29
    2.2.1 不同预处理方式对种子萌发的影响比较  28
    2.2.2 不同培养条件对种子萌发﹑成苗及株高的影响  28-29
  2.3 小结  29-33
第三章荞麦离体再生体系的建立  33-41
  3.1 试验材料和方法  33-34
    3.1.1 主要仪器设备及试剂  33
    3.1.2 试验材料  33
    3.1.3 试验方法  33-34
    3.1.4 数据统计及分析方法  34
  3.2 结果与分析  34-36
    3.2.1 不同激素配比下子叶和胚轴愈伤组织诱导  34-35
    3.2.2 不同激素配比下子叶和胚轴愈伤组织分化再生  35-36
    3.2.3 根再生及炼苗移栽  36
  3.3 小结  36-41
第四章结论与讨论  41-44
  4.1 讨论  41-43
  4.2 结论  43-44
参考文献  44-49
致谢  49-50
作者简介  50

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