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利用线粒体动态蛋白质组技术分析小麦杂种优势
作 者: 甘富
导 师: 彭永康
学 校: 天津师范大学
专 业: 细胞生物学
关键词: 杂种优势 线粒体蛋白质组 差异表达 小麦 MALDITOF MS 细胞器
分类号: S512.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
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内容摘要
作物杂种优势分子机理的研究由于在农业生产实践中具有重要的指导意义,因此很多研究者在水稻、玉米、小麦、油菜等农作物中进行了广泛的研究。已往的研究多数集中在杂交组合选育、基因表达与转录、同工酶分析、表观遗传调控、蛋白质差异表达分析等方面,但是目前对于杂种优势分子机理的确切机制还尚不明了。本研究就是在此基础上,从线粒体蛋白质组角度分析了线粒体蛋白质差异表达与杂种优势间的相互关系。我们以发育2天、4天、6天的小麦幼苗叶片为实验材料,利用双向凝胶电泳结合MALDI TOF MS为技术手段,对杂种与双亲间线粒体差异表达蛋白进行了分析鉴定。结果发现在小麦杂种与双亲间叶片线粒体蛋白质组呈现明显的差异,差异斑点数分别为22spots/2d、23spots/4d、33spots/6d。同时我们对这些差异蛋白进行了表达模式及频率的分析,主要有四种模式:附加型(ADT)、偏双亲(PDT)、高于双亲(HPDT)和低于双亲(LPDT),分析发现大多斑点呈现偏双亲现象,主要是偏于父本6DL/6VS。在6天叶子中,四种模式的表达频率分别为15.2%(5/33,),54.5%(18/33,),24.2%(8/33)and6.1%(2/33)。我们选择发育6天叶子线粒体蛋白图谱作为分析对象,利用MALDI TOF MS对差异蛋白进行质谱鉴定,在33个差异斑点中共有22个蛋白斑点得到归属鉴别。它们在细胞中涉及能量代谢、细胞结构组成、蛋白质转运与合成、胁迫反应、次生代谢等多种生物学功能。我们预测这些差异蛋白的表达与小麦杂种的优势生物学特性有一定的关系,但这些差异蛋白与杂种优势间的确切关系还需进一步研究。
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全文目录
摘要 5-6 Abstract 6-9 第一章 文献综述 9-25 1.1 杂种优势及其利用概述 9-10 1.1.1 杂种优势现象的发现 9 1.1.2 杂种优势在农业生产中的应用 9-10 1.2 作物杂种优势机理研究进展 10-15 1.2.1 作物杂种优势的遗传学研究 10-11 1.2.2 杂种优势的生理生化研究 11-12 1.2.3 杂种优势的分子生物学研究 12-15 1.3 蛋白质组学研究进展 15-23 1.3.1 蛋白质组学概念及研究内容 15-17 1.3.2 蛋白质组学相关研究技术 17-21 1.3.3 线粒体与植物线粒体蛋白质组研究进展 21-23 1.4 本研究的目的及意义 23-25 第二章 材料与方法 25-30 2.1 实验材料 25 2.2 实验试剂及仪器设备 25-26 2.2.1 实验试剂 25 2.2.2 主要实验仪器 25-26 2.3 实验方法 26-30 2.3.1 材料培养 26 2.3.2 小麦线粒体蛋白样品的制备 26-27 2.3.3 双向凝胶电泳 27-29 2.3.4 质谱鉴定 29-30 第三章 实验结果与分析 30-61 3.1 小麦杂交F_1及双亲幼苗叶片线粒体动态蛋白质组双向电泳结果 30-37 3.2 小麦杂交F_1及双亲发育6天叶片线粒体差异蛋白质谱鉴定结果 37-59 3.3 讨论 59-61 第四章 结论 61-63 参考文献 63-72 致谢 72-73 附录 73
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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 禾谷类作物 > 麦 > 小麦
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