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酿酒葡萄籽中原花青素的提取和抗氧化性研究
作 者: 徐洁
导 师: 胡博然
学 校: 扬州大学
专 业: 食品科学
关键词: 葡萄籽 原花青素 提取纯化 抗氧化性
分类号: TS261.9
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要
原花青素是葡萄籽多酚的主要活性物质,现代研究表明,原花青素不仅具有高效的抗氧化活性,而且还有保护心血管、抗癌抗辐射、皮肤保健及美白等功效。本文对葡萄籽中原花青素的提取工艺、分离纯化及抗氧化活性进行以下几个方面的研究:以儿茶素为标准品,采用浓硫酸-香草醛法测定原花青素含量;以原花青素的提取量为指标,通过单因素实验确立影响原花青素提取量的相关因素,并通过正交实验确定提取的最佳条件。对原花青素进行超声波助提实验,筛选到提取的最佳工艺条件为:超声功率80W、料液比1:35、超声时间30min、乙醇浓度50%,原花青素含量为55.728mg/g;对原花青素进行微波助提实验,筛选到提取的最佳工艺条件为:料液比1:25、微波功率115W、微波时间40s、乙醇浓度80%,原花青素含量为106.936mg/g;对原花青素进行酶解助提实验,筛选到提取的最佳工艺条件为:酶解温度45。℃、pH4.0、酶解时间1.0h、酶液浓度100u/mg,原花青素含量为87.513mg/g。通过静态吸附、解吸试验,从5种不同极性的大孔树脂中筛选得到,AB-8树脂的吸附、解吸效果最好,吸附率和解吸率分别达到78.00%、92.42%。选用AB-8树脂对动态吸附条件进行优化实验,确定浓度为3mg/mL的原花青素以3BV/h的流速流经树脂柱时,AB-8的吸附率最高可达到78.19%;对解吸条件进行优化实验,用100mL浓度为30%的乙醇溶液以2BV/h的流速对吸附饱和后的树脂进行洗脱,原花青素的解吸率高达92.37%。将10%-50%乙醇洗脱液进行冻干处理,对原花青素冻干粉的纯度进行测定,得到该混合物的纯度为85.16%。采用四种不同处理样品:原花青素粗提液(GSP0)、25%乙醇洗脱液(GSP1)、50%乙醇洗脱液(GSP2)、50%乙醇洗脱液冻干粉(GSP3),分别进行抗氧化活性实验的研究。1.在清除HO·的实验中,以浓度相同的Vc溶液为对照,检测四种样品的抗氧化性,结果表明:不同样品清除率的大小依次是GSP3、Vc、GSP2、GSP1、GSPO,当浓度大于2.3mg/mL时,Vc溶液的清除率大于GSP3。2.在清除O2·-的实验中,原花青素对02·-的清除率与浓度呈正相关,不同样品清除率的大小依次是:GSP3、GSP2、GSP1、GSP0、Vc。3.在测定还原力的实验中,由700nm下测得吸光值曲线可以看出,还原力与原花青素的浓度呈正比,且它们之间还原力大小关系是:GSP0>GSP1>GSP3>GSP2>Vc.4.在抗油脂氧化能力的实验中,与未添加抗氧化剂的样品相比,原花青素有一定的抗油脂氧化能力,动物油、植物油的过氧化值分别为64.22meq/kg(动物油对照为144.83meq/kg)、433.31meq/kg(植物油对照为573.72meq/kg),且与植物油相比,原花青素对动物油的保护作用更明显。5.利用电子顺磁共振技术测定原花青素提取液对DPPH清除率,不同样品对DPPH清除能率的大小依次是:GSP3、GSP0、GSP2、GSP1,样品中原花青素浓度与清除率呈正相关,与低浓度原花青素溶液相比,高浓度溶液对DPPH的清除具有高效性。
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全文目录
摘要 2-4 Abstract 4-8 第一章 前言 8-19 1 酿酒葡萄概述 8 2 葡萄籽原花青素 8-11 2.1 原花青素的结构与理化性质 8-10 2.2 原花青素的生物活性 10-11 3 原花青素的提取、分离与检测 11-14 3.1 原花青素的提取 11-12 3.2 原花青素的分离 12-14 3.3 原花青素的检测 14 4 原花青素的抗氧化性 14-18 4.1 自由基的产生及危害 14-16 4.2 抗氧化剂的作用机理 16 4.3 抗氧化的检测方法 16-18 5 研究内容和意义 18-19 第二章 葡萄籽原花青素的提取工艺 19-40 1 实验材料 19-20 1.1 材料 19 1.2 试剂 19 1.3 仪器 19-20 2 实验方法 20-23 2.1 原花青素的测定 20 2.1.1 标准曲线的绘制 20 2.1.2 样品的测定 20 2.2 原花青素的提取 20-23 2.2.1 超声波助提原花青素的单因素实验 20-21 2.2.2 微波助提原花青素的单因素实验 21-22 2.2.3 酶法助提原花青素的单因素实验 22-23 2.3 最优提取工艺的验证 23 3 结果与讨论 23-38 3.1 超声波助提原花青素的单因素影响研究 23-29 3.2 微波助提原花青素的单因素影响研究 29-34 3.3 酶法助提原花青素的单因素影响研究 34-38 4 本章小结 38-40 第三章 葡萄籽中原花青素的纯化工艺 40-51 1 实验材料 40 1.1 材料 40 1.2 试剂 40 1.3 仪器 40 2 实验方法 40-43 2.1 原料前处理 40-41 2.1.1 样品液的制备 40-41 2.1.2 树脂预处理 41 2.1.3 树脂装柱 41 2.2 试验方法 41-43 2.2.1 树脂静态吸附、解吸试验 41 2.2.2 树脂吸附条件的优化 41-42 2.2.3 AB-8树脂恒定洗脱条件的优化 42-43 2.3 纯化后原花青素的纯度测定 43 3 结果与讨论 43-49 3.1 不同树脂的静态吸附率、解吸率与时间的关系 43-44 3.2 树脂吸附条件的优化 44-46 3.3 AB-8树脂恒定洗脱条件的优化 46-49 3.4 纯化后原花青素的纯度测定 49 4 本章小结 49-51 第四章 原花青素的抗氧化研究 51-65 1 实验材料 51 1.1 材料 51 1.2 试剂 51 1.3 仪器 51 2 实验方法 51-54 2.1 清除羟自由基活性 52 2.2 清除超氧阴离子自由基活性 52-53 2.3 原花青素的还原力测定 53 2.4 原花青素的抗油脂氧化能力测定 53 2.5 利用电子顺磁共振技术测定清除DPPH·自由基活性 53-54 3 结果与讨论 54-63 3.1 清除羟自由基活性 54-55 3.2 清除超氧阴离子自由基活性 55 3.3 原花青素的还原力测定 55-56 3.4 原花青素的抗油脂氧化能力测定 56-57 3.5 利用电子顺磁共振技术测定清除DPPH·自由基活性 57-63 4 本章小结 63-65 主要结果与展望 65-67 参考文献 67-72 致谢 72-73
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中图分类: > 工业技术 > 轻工业、手工业 > 食品工业 > 酿造工业 > 酿酒工业 > 副产品加工与利用
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