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糖皮质激素受体缺失的神经元与糖皮质激素非基因组作用参与调节兴奋毒性损伤
作 者: 肖林
导 师: 陈宜张
学 校: 第二军医大学
专 业: 神经生物学
关键词: 糖皮质激素 糖皮质激素受体 海马神经元 发育 NMDA 非基因组作用 神经兴奋毒性 NMDA受体 MAPK [Ca2+]i
分类号: Q42
类 型: 博士论文
年 份: 2007年
下 载: 49次
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内容摘要
通过免疫印迹、免疫荧光标记、逆转录聚合酶链反应等实验方法,本研究发现胚胎海马神经元可以发生体外培养环境和体内发育阶段双重依赖性的糖皮质激素受体(GR)表达缺失:处于发育较早期的胎鼠(如E16、E18)海马神经元在体外无血清培养条件下GR表达发生沉默,而取自发育较晚期的胎鼠(如E20, P0)海马神经元,在同样培养条件下却不发生GR表达沉默。糖皮质激素受体缺失的神经元可以作为一种研究糖皮质素(GC)非基因组作用的理想模型。利用该模型,研究进一步发现GC可通过非基因组作用加重NMDA诱导的神经元毒性损伤。有趣的是,NMDA本身的神经元毒性是通过含NR2B的NMDA受体介导,而GC加重损伤的作用则是通过含NR2A的NMDA受体介导。研究还表明GC可以增加NMDA诱导的p38激活而抑制ERK的激活,并增强NMDA引起的细胞内钙升高,提示GC非基因组作用加重NMDA毒性的机制可能与此有关。此外,本研究还发现,无论是在体还是离体,海马神经元对NMDA的损伤敏感性均随其发育成熟而增加。而NMDA诱导的神经元内钙信号反应以及p38的激活亦随发育而变化,提示NMDA受体在发育过程中与细胞内下游信号通路的联系是变化的,但详细机制尚待研究。
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全文目录
摘要 4-8 英文缩写 8-10 摘要 10-14 Abstract 14-18 第一部分 糖皮质素受体缺失的神经元模型 18-46 第一章:糖皮质素受体缺失的培养胚胎海马神经元:一个用于研究糖皮质激素在神经系统非基因组作用的新模型 18-32 前言 18-19 材料与方法 19-22 结果 22-29 讨论 29-32 第二章:培养环境和胚胎发育阶段依赖性的糖皮质激素表达缺失 32-46 前言 32-33 材料方法 33-35 结果 35-44 讨论 44-46 第二部分:糖皮质激素非基因组作用参与调节神经元兴奋毒性损伤 46-88 第一章:海马神经元对NMDA 神经毒性的易感性随着发育过程而变化 46-69 前言 47-48 材料方法 48-53 结果 53-64 讨论 64-69 第二章:糖皮质素非基因组作用增加NMDA 诱导的神经毒性损伤 69-88 前言 69-71 材料与方法 71-73 结果 73-85 讨论 85-88 实验结果总结 88-89 参考文献 89-107 综述 107-118 在读期间发表文章情况 118-119 致谢 119-122 附件:已发表论文 122-127
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中图分类: > 生物科学 > 生理学 > 神经生理学
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