学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

日本乙型脑炎病毒受体的初步研究

作　者: 刘利兵
导　师: 姜绍谆；马文煜
学　校: 第四军医大学
专　业: 医学微生物学
关键词: 日本乙型脑炎病毒病毒受体分析提取
分类号: R373
类　型: 博士论文
年　份: 1994年
下　载: 181次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

病毒的受体在病毒感染的早期过程中起重要的作用，在很大程度上决定病毒的宿主谱、组织嗜性，并影响病毒的致病性。对其微细结构和特性的认识有助于病毒受体分离和提取，为寻找抗病毒预防治疗制剂开拓新的途径。本文通过免疫酶细胞化学、放射性结合分析等方法，检测了C6／36白纹伊蚊细胞表面JEVR的活性。初步证实该细胞表面有JEVR存在。建立了测定病毒受体的ELISA方法，对JEVR的特性进行了研究。应用不同的方法进行了受体的分离和提取，初步鉴定提纯物具有JEVR的活性。用免疫细胞化学法观察经JEV吸附的C6／36细胞滴片，可见到胞膜呈棕褐色的阳性细胞，表明C6／36细胞表面有JEV的附着。电镜结果也证明细胞膜表面有病毒颗粒附着，表明C6／36细胞表面可能具有JEV受体存在。受体的表达可能与细胞的生长、分化状态不同有一定关系。放射性配体结合分析法是鉴定受体存在、探讨受体特异性以及病毒与细胞受体相互作用关系的重要手段。本试验以~3H-JEV为探针，应用放射性配体结合分析法测定了C6／36细胞表面是否存在JEV受体。结果表明，~3H-JEV能附着于C6／36细胞表面，这种结合是受反应时间影响的。在一定范围内随着结合时间的延长，病毒结合的量也随之增加。标记的病毒可被未标记的乙脑病毒所阻断，但不被单纯疱疹病毒

全文目录

缩略语表  3-5
摘要  5-8
Abstract  8-12
前言  12-14
文献回顾  14-26
  1 病毒受体的一般特性  14-15
  2.病毒受体的研究方法  15-17
  3.病毒受体的结构  17-20
  4.病毒-受体反应动力学  20-21
  5.病毒受体的特异性  21-23
  6.病毒受体的提纯  23
  7.研究病毒受体的意义  23-24
  8.结语  24-26
第一部分 C6/36白纹伊蚊细胞表面存在JEV受体的初步证实  26-45
  1 材料和方法  27-33
    1.1 C6/36白纹伊蚊细胞  27
    1.2 病毒株及病毒抗原制备  27
    1.3 单克隆抗体的制备及纯化  27-28
    1.4 酶标McAb  28-29
    1.5 免疫酶细胞化学法  29-30
    1.6 JEV电镜样品的制备  30
    1.7 标记病毒的制备  30-32
    1.8 放射配体结合分析  32-33
  2 结果  33-43
    2.1 单克隆抗体纯化结果  33-35
    2.2 辣根过氧化物酶标记的McAb 2F2测定  35
    2.3 病毒的标记及纯化鉴定  35-38
    2.4 免疫细胞化学法  38-39
    2.5 电镜观察JEV对C6/36细胞附着  39-40
    2.6 放射结合分析法  40-43
  3 讨论  43-45
第二部分 ELISA测定病毒受体方法的建立和对受体特性的测定  45-58
  1.材料和方法  46-48
    1.1 细胞及病毒抗原  46
    1.2 胰蛋白酶消化C6/36细胞  46
    1.3 C6/C36细胞的冻融、超声处理  46
    1.4 小鼠组织细胞膜成分提取  46-47
    1.5 ELISA方法测定JEVR活性  47-48
  2.结果  48-56
    2.1 细胞表面JEV受体的测定  48-54
    2.2 细胞成分中JEV受体的测定  54
    2.3 JEV的细胞组织亲嗜性测定  54-56
  3.讨论  56-58
第三部分日本乙型脑炎病毒受体成份的提取及活性初步鉴定  58-69
  1. 材料和方法  59-62
    1.1 细胞  59
    1.2 C6/36伊蚊细胞膜成分的粗提  59
    1.3 C6/36伊蚊细胞膜成份粗提物免疫血清的制备  59-60
    1.4 线性蔗糖密度梯度纯化JEVR  60
    1.5 亲和层析提取JEVR  60-62
  2.结果  62-67
    2.1 JEVR粗提取物的活性测定  62-63
    2.2 线性蔗糖密度梯度纯化JEVR  63-66
    2.3 亲和层析结果及收集液活性测定  66-67
  3.讨论  67-69
小结  69-71
致谢  71-72
参考文献  72-80

日本乙型脑炎病毒受体的初步研究

内容摘要

全文目录

相似论文