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1、寡核苷酸基因芯片检测肺癌中点突变的研究 2、二氧化硒诱导肺癌细胞凋亡过程中c-fos蛋白表达的改变

作　者: 于海建
导　师: 李龙芸
学　校: 中国协和医科大学
专　业: 内科呼吸
关键词: 肺癌基因芯片 Rb2/p130基因点突变寡核苷酸基因芯片 p53基因二氧化硒 c-fos蛋白肺痛细胞GLC-82，凋亡
分类号: R734.2
类　型: 博士论文
年　份: 2003年
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内容摘要

目的：用寡核苷酸基因芯片的方法，在中国首次检测肺癌标本中Rb2／p130基因的热点突变，为肺癌的诊断探索快速、准确的基因检测途径。方法：1．收集肺癌患者的手术标本，并提取基因组DNA。 2．在Gene bank中检索Rb2／p130基因的DNA序列后，设计并合成探针和引物序列。 3．将探针按一定的顺序点样于醛基化的玻片上，制备成基因芯片。 4．用荧光标记的引物对肺癌标本DNA进行Exon 21、Exon 22的PCR扩增，然后用PCR扩增产物与基因芯片进行杂交。 5．通过对杂交信号的检测，判断是否发生热点突变，并用测序的方法对突变位点进行验证。结果：本实验用寡核苷酸基因芯片的方法检测了30例肺癌标本的Rb2／p130基因的突变。结果表明，PCR产物浓度和杂交温度是影响结果的2个关键因素。在30例肺癌标本中，Rb2／p130基因突变的检出率是16.67％，其中，肺腺癌的突变率是20％(4／20)，肺鳞癌的突变率16.67％(1／6)，Exon 21突变4例次，Exon 22突变1例次。对突变位点的测序证实了基因芯片的结果。结论：寡核苷酸基因芯片法检测出中国人肺癌组织标本存在Rb2／p130基因突变，但突变率(16.67％)低于西方人(78.5％)。未能检测全部突变位点、标本量小和人种差异可能是低突变率的原因。

全文目录

第一部分寡核苷酸基因芯片检测肺癌中点突变的研究  4-60
  第一章 Rb2／p130寡核苷酸基因芯片的制备及肺癌手术标本的检测  4-25
    中文摘要  4-5
    英文摘要  5-6
    前言  6
    材料与方法  6-17
    结果  17-19
    讨论  19-22
    参考文献  22-25
  第二章寡核苷酸基因芯片检测肺癌患者痰标本中p53点突变  25-42
    中文摘要  25-26
    英文摘要  26-27
    前言  27
    材料与方法  27-33
    结果  33-37
    讨论  37-40
    参考文献  40-42
  论文综述  42-55
  附录1  55-56
  附录2  56-58
  附录3  58-59
  附录4  59-60
第二部分二氧化硒诱导肺癌细胞凋亡过程中c-fos蛋白表达的改变  60-78
  中文摘要  60-61
  英文摘要  61-62
  前言  62
  材料与方法  62-66
  结果  66-71
  讨论  71-74
  参考文献  74-78
简历及在校期间发表的文章  78-79
致谢  79

1、寡核苷酸基因芯片检测肺癌中点突变的研究 2、二氧化硒诱导肺癌细胞凋亡过程中c-fos蛋白表达的改变

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