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从蛋白水平探讨微囊藻毒素的毒作用机制
作 者: 傅文宇
导 师: 徐立红
学 校: 浙江大学
专 业: 劳动卫生与环境卫生学
关键词: 微囊藻毒素 毒性机制 蛋白质 差异表达蛋白 caspase-3 p53 PP2A 信号转导蛋白 骨架蛋白 蛋白质组学 双向凝胶电泳 质谱 生物信息学 双染色
分类号: R114
类 型: 博士论文
年 份: 2006年
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内容摘要
自上世纪70年代以来,由于水体富营养化导致世界范围内蓝藻水华频频发生。由蓝藻(主要是铜绿微囊藻)产生的毒素—微囊藻毒素对人类和家畜都产生了极为严重的影响。微囊藻毒素是一种环状七肽类毒素,其中5个氨基酸为固定成分,一般结构为(D-Ala-L-X-erythro-β-methyl-D-isoAsp-L-Y-Adda-D-isoGlu-N-Methyldehydro-Ala),其中Adda(3-amino-9-methoxy-2,6,8-trimethyl-10-phenyldeca-4,6-dienoic acid)是一种特殊的氨基酸,是微囊藻毒素生物活性表达所必需的基团。X,Y为两种可变氨基酸,由此产生60多种同类物,其中存在较多、毒性较大的是微囊藻毒素-LR和RR,其中L,R分别为亮氨酸,精氨酸,分别缩写为MC-LR和MC-RR。 同位素示踪显示,用氚标记的微囊藻毒素进入动物体内后,主要分布在肝脏,但发现肠道和肾脏这两个器官内也有不同程度的蓄积,提示这三个脏器是可能都受毒素的影响。而且微囊藻毒素对很多细胞都有毒理学效应,包括肝细胞、肾细胞、成纤维细胞、内皮细胞、上皮细胞以及淋巴细胞等。最近,研究人员首次发现微囊藻毒素能在无脊椎动物(鱼、虾、蟹等)性腺中大量累积,性腺是除肝脏外的第2个靶器官,微囊藻毒素可在卵中大量存在并传递到后代,因此微囊藻毒素对包括人类在内的哺乳动物生殖的影响也应该受到关注和重视。同时微囊藻毒素可以在鱼类、虾、蟹体内富集,沿食物链出现生物放大现象,进而影响整个水生生态系统和人类健康。
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全文目录
中文摘要 4-9 英文摘要 9-15 前言 15-21 实验材料 21-28 研究方法 28-34 结果 34-91 一、凋亡执行蛋白caspase-3的活化 34-38 二、MC-RR作用后响应蛋白的筛选 38-60 三、MC-RR诱导的差异表达蛋白的质谱鉴定 60-88 四、MC-RR诱导的差异表达蛋白质的Western blot验证 88-91 讨论 91-105 一、凋亡关键蛋白caspase-3参与MC-LR诱导的细胞凋亡过程 91-93 二、用蛋白质组学方法检测到MC-RR作用引起细胞内一系列蛋白水平发生改变 93-96 三、微囊藻毒素不仅能抑制PP2A的活性,而且还能影响其蛋白水平 96-98 四、细胞内一些重要的蛋白的磷酸化水平和蛋白水平都受微囊藻毒素的调节 98-101 五、本研究中发现未见报道与微囊藻毒素毒作用机制相关的蛋白 101-105 结论 105-107 参考文献 107-114 综述 114-134 一、The regulative eccect of reactive oxygen species on apoptosis induced by chemicals 114-126 二、微囊藻毒素致毒机理的研究进展 126-134 发表论文、获奖成果 134-136 参与的科研项目 136-137 致谢 137
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中图分类: > 医药、卫生 > 预防医学、卫生学 > 卫生基础科学 > 卫生毒理
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