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炎症因子在低温恶化心力衰竭中作用及EPO的保护机制
作 者: 祝志云
导 师: 王梦洪
学 校: 南昌大学
专 业: 内科学
关键词: 低温 促红细胞生成素 心力衰竭 心功能 炎症因子 阿霉素
分类号: R541.6
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要
目的:探讨炎症因子在低温恶化心力衰竭中的作用及促红细胞生成素(hypothermia, EPO)的保护机制。方法:雄性SD大鼠120只,2-3月龄,体重240-260g,随机分2组,分别为①对照组(A组)10只;②阿霉素(adriamycin, ADR)组110只;ADR组均予腹腔注射ADR制作大鼠心衰模型(2.5mg·kg-1·d-1,2次/周,连续5周),A组予腹腔注射同体积的生理盐水(2次/周,连续5周)。后行经胸壁超声心动图(transthoracic echocardiography,TTE)测定心功能,判断心衰模型是否建立成功。再将ARD组中造模成功存活下的76只大鼠按照随机原则分为①常温心衰组(B组)19只;②低温心衰组(C组)19只;③EPO常温心衰组(D组)19只;④EPO低温心衰组(E组)19只。第6周,D、E组腹腔注射EPO(4000IU·kg-1·d-1,连续4天):A、B、C组均予腹腔注射同体积的生理盐水(1次/天,连续4天);第7周将C、E组大鼠放置于气候箱中(4℃,4小时/天,连续4天),A、B、D组温度与外界温度相同,整个过程重复4天。实验过程中定期观察大鼠的精神状态及死亡情况,实验第7周末(即将C、E组从气候箱中取出当天)行心脏彩超测定心功能及终止实验。心脏标本常规HE染色观察心室肌病理变化,免疫组化法观测心室肌组织中炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-a的表达水平、实时荧光定量PCR法测定心室肌组织中炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-a mRNA表达量。结果:在腹腔注射ADR诱导建立心衰模型过程中,大鼠出现阿霉素中毒的表现,且死亡34只;A组未见上述中毒症状及死亡情况;心衰造模成功后,C组在放置低温气候箱过程中死亡4只,E组死亡1只。(1)心功能水平:与A组相比,其余四组经ADR处理后,LVEDD、LVESD增加(p<0.05), LVEF、FS降低(p<0.05);与B组相比,C组LVEDD、LVESD增加(p<0.05), LVEF、FS值增加(p<0.01),D组LVEF、FS值下降(p<0.01),LVEDD、LVESD减小(p<0.01);与D组相比,E组LVESD增加(p<0.01), LVEF、FS值下降(p<0.01),上述结果显示低温能进一步使心功能恶化,EPO可改善心衰大鼠心功能。(2)HE染色:光镜下可见对照组大鼠心肌细胞形态结构基本正常,其余四组心肌组织内可见不同程度的少量炎性细胞浸润、间质充血水肿、心肌细胞玻璃样变性及坏死。与常温心衰组相比,低温心衰组玻璃样变性及坏死更明显;EPO常温心衰组上述改变较常温心衰组轻。(3)免疫组化:光镜下可见心肌细胞胞浆内棕黄或棕褐着色。与A组相比,其余四组心肌组织内IL-6、IL-1β、TNF-a阳性细胞百分比增高,差异有统计学意义(P<0.05);与B组相比,C组心肌组织IL-6、IL-1β、TNF-a阳性细胞百分率增高,D组心肌组织IL-6、IL-1β、TNF-a阳性细胞百分率下降,差异均有统计学意义(P<0.05);与D组相比,E组心肌组织IL-6、IL-1β、TNF-a阳性细胞百分率下降,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)基因表达:与A组相比,其余四组心衰大鼠心室肌组织IL-6、IL-1β、TNF-a mRNA表达量上调,差异有显著意义(p<0.01;与B组相比,C组心衰大鼠心室肌组织IL-6、IL-1β、TNF-a mRNA表达上调,差异有显著意义(p<0.01),D组IL-6、IL-1β、TNF-a mRNA表达下调,差异有统计学意义(P<0.05);与D组相比,E组IL-6、IL-1β、TNF-a mRNA表达上调,差异有统计学意义(p<0.05)。结论:(1)低温促使心衰大鼠心功能进一步恶化,其机制之一可能为低温环境刺激心衰大鼠心肌组织炎症反应加重。(2)EPO调节IL-6、IL-1β、TNF-a的转录水平,从而抑制炎症反应,达到改善及拮抗低温恶化心衰大鼠心功能的作用。
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全文目录
摘要 3-5 ABSTRACT 5-11 第1章 前言 11-13 第2章 材料与方法 13-21 2.1 实验材料 13-14 2.1.1 实验动物 13 2.1.2 主要仪器 13 2.1.3 主要试剂 13-14 2.1.4 主要溶液的配制 14 2.2 实验方法 14-21 2.2.1 动物模型的建立及分组 14-15 2.2.2 观察项目及检测方法 15-20 2.2.3 统计学方法 20-21 第3章 结果 21-23 3.1 大鼠的一般情况 21 3.2 心脏超声测定结果 21 3.3. HE染色 21-22 3.4. 免疫组化 22 3.5. 基因的表达情况 22-23 第4章 讨论 23-27 4.1 ADR诱导CHF模型的建立 23 4.2 低温与CHF 23-24 4.3 CHF与炎症因子 24-25 4.4 EPO与炎症因子 25-27 第5章 结论 27-28 致谢 28-29 参考文献 29-32 附图 32-46 攻读学位期间的研究成果 46-47 综述 47-52 参考文献 50-52
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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 心脏、血管(循环系)疾病 > 心脏疾病 > 血液循环衰竭
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