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非霍奇金淋巴瘤患者外周血及骨髓淋巴细胞Bcl-2/IgH、IgH基因重排的检测

作　者: 张晓慧
导　师: 梁勇
学　校: 天津医科大学
专　业: 内科学
关键词: 非霍奇金淋巴瘤 弥漫大B细胞淋巴瘤 Bcl2/IgH基因重排 IgH基因重排
分类号: R733.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


目的：通过检测非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin lymphoma, NHL)患者外周血及骨髓淋巴细胞Bcl-2/IgH、IgH基因重排,并与NHL患者临床及实验室指标进行相关性分析,初步探讨Bcl-2/IgH、IgH基因重排对NHL的早期诊断、评价疗效等方面的意义。方法：研究对象为2009年6月至2011年3月我科住院70例NHL患者：包括60例B-NHL患者(弥漫大B细胞淋巴瘤患者30例,小B细胞淋巴瘤15例,慢性淋巴细胞白血病患者8例,粘膜相关淋巴瘤3例,伯基特淋巴瘤2例,边缘区淋巴瘤1例,套细胞淋巴瘤1例)和10例T-NHL患者,及7例淋巴结炎性肿大患者、20名正常对照。提取全血及骨髓淋巴细胞DNA,通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)检测Bcl-2/IgH主要断裂区基因重排、IgH基因重排,以凝胶电泳出现相应条带者为阳性,探讨Bcl-2/IgH、IgH基因重排对NHL的早期诊断的意义,比较化疗后的动态变化、全血与骨髓检测的敏感性。同时与患者病理组织学检查进行比较,并与正常对照及病例对照组进行对比。探讨此两种基因重排的发生与NHL患者淋巴瘤分期、是否伴有全身症状、血浆β2-MG水平、LDH水平、是否伴有骨髓侵犯、肝脏劈脾脏侵犯的相关性。利用SPSS13.0统计软件进行分析。结果：1.30例弥漫大B细胞淋巴瘤患者(DLBCL)中,11例外周血Bcl-2/IgH重排阳性(36.7%)10例骨髓Bcl-2/IgH重排阳性(33.3%),与30例其它B-NHL(除外滤泡淋巴瘤FL及DLBCL)(?)(?)性率(6.7%)及20例正常人阳性率(5%)均有显著性差异(p均<0.05)。所有T-NHL及7例淋巴结炎性肿大患者Bcl-2/IgH重排均为阴性。2.外周血与骨髓淋巴细胞检测Bcl-2/IgH基因重排阳性率分别为36.7%、33.3%,X2检验及配对t检验均无显著性差异(p>0.05)。3.对8例Bcl-2/IgH基因重排阳性患者进行动态监测,3个疗程R-CHOP治疗后Bcl-2/IgH基因重排较治疗前可明显减少,PCR半定量结果均值由初治0.53降至0.28(p<0.05),6个疗程R-CHOP治疗后PCR半定量均值为0,Bcl-2/IgH基因重排可完全转阴。4.Bcl-2/IgH基因重排阳性患者中血浆LDH水平升高占81.8%,在重排阴性患者中占28.6%,两组间有统计学差异(p<0.05)。但Bcl-2/IgH基因重排与淋巴瘤分期、是否伴有全身症状、血浆β2-MG水平、是否伴有骨髓侵犯、肝脏脾脏侵犯均无显著相关性(p均>0.05)。5.20例DLBCL(均为初治)9例IgH基因重排阳性(45%),30例其它B-NHL(均为初治或复发患者,DLBCL除外)14例IgH基因重排阳性(46.7%),其两组间无统计学差异性(p>0.05),但对照组20名正常人、10例T细胞淋巴瘤患者及7例淋巴结炎性肿大患者重排均为阴性(p<0.05)。6.对7例IgH基因重排阳性患者进行动态监测,一个疗程的R-CHOP治疗较治疗前就能显著减少IgH基因重排,PCR半定量结果均值由初治0.42降至0.13(p<0.05),2个疗程后PCR半定量均值为0,重排完全消除。7.全血与骨髓淋巴细胞检测IgH基因重排阳性率并无显著差异(43.3%&36.7%,p>0.05),但PCR半定量结果显示骨髓检测更为敏感(0.95 & 0.30,p<0.05)。8.IgH基因重排阳性患者中血浆LDH水平升高占90%,在重排阴性患者中占30%,两组间有统计学差异(p<0.05)。IgH基因重排与淋巴瘤分期、是否伴有全身症状、血浆β2-MG水平、是否伴有骨髓侵犯、肝脏脾脏侵犯均无显著相关性(p均>0.05)。结论：1.Bcl-2/IgH基因重排可作为DLBCL早期诊断、评价治疗的特异性指标,其发生与血浆LDH水平相关,并可用于与其它类型NHL作鉴别。2.IgH基因重排可作为B-NHL早期诊断及评价疗效的特异性指标,重排发生与血浆LDH水平相关。

全文目录


中文摘要  4-6
Abstract  6-10
缩略语/符号说明  10-12
前言  12-16
  研究现状、成果  12-15
  研究目的、方法  15-16
1. 对象与方法  16
  1.1 病例和对照  16
2. 病情分级及相关指标判定  16
  2.1 分期  16
  2.2 指标判定  16
3. 主要试剂和仪器  16-18
  3.1 主要试剂与材料  16-17
  3.2 主要仪器设备  17-18
4. 实验方法  18-20
  4.1 淋巴细胞的分离  18
  4.2 DNA提取  18-19
  4.3 DNA扩增(PCR)  19-20
  4.4 琼脂糖凝胶电泳  20
  4.5 统计学处理  20
5. 结果  20-41
  5.1 结果判断  20-22
  5.2 DNA提取结果  22
  5.3 Bcl-2/IgH基因重排结果  22-25
  5.4 Bcl-2/IgH基因重排相关指标的研究结果  25-30
  5.5 IgH基因重排结果  30-34
  5.6 IgH基因重排相关指标的研究结果  34-39
  5.7 联合检测  39-41
讨论  41-44
结论  44-45
参考文献  45-50
发表论文和参加科研情况说明  50-51
综述 Bcl-2/IgH基因重排与非霍奇金淋巴瘤关系的研究进展  51-65
  综述参考文献  60-65
致谢  65

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 造血器及淋巴系肿瘤 > 网状内皮系统肿瘤
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