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人白细胞介素-10基因治疗对去卵巢大鼠实验性牙周炎发生的影响

作　者: 马守治
导　师: 闫福华；程辉
学　校: 福建医科大学
专　业: 口腔临床医学
关键词: 牙周炎 绝经后骨质疏松 牙槽骨 基因治疗 细胞因子
分类号: R781.4
类　型: 博士论文
年　份: 2011年
下　载: 81次
引　用: 2次
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内容摘要


牙周炎是由牙菌斑中的微生物所引起的牙周支持组织的慢性感染性疾病,主要表现为牙周支持组织的炎症和牙槽骨吸收,最终导致牙松动及丧失。牙周致病菌是牙周病发生的必要条件,宿主防御机能在牙周病发生、发展中起十分重要的作用。越来越多的证据表明PMO是牙周炎的全身促进因子。但牙周炎与PMO的联系机制还未完全阐明,预防和治疗PMO导致的牙周组织破坏是牙周领域的研究热点和难点之一。实验一细胞因子在去卵巢大鼠实验性牙周炎牙周组织中的表达目的了解PMO在牙周炎发病中的作用机制。方法将24只雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分成4组,每组6只。1:假手术(SHAM)组:对大鼠实施去卵巢假手术;2:去卵巢组(OVX):切除双侧卵巢;3:假手术+实验性牙周炎(SHAM+EP)组:对大鼠实施去卵巢假手术,术后10w,采用丝线结扎左侧上颌第二磨牙牙颈部;4:去卵巢+实验性牙周炎组(OVX+EP):切除双侧卵巢,术后10w,采用丝线结扎左侧上颌第二磨牙牙颈部。丝线结扎后2w,过量麻醉药处死大鼠。观察各组大鼠的体重、骨密度、血清生化指标、牙槽骨吸收和牙周组织细胞因子的表达。结果卵巢切除导致大鼠牙槽骨吸收量增加;上调了根分叉区牙周膜IL-6、OPG、RANKL的表达,下调了IL-10的表达。结论卵巢切除导致大鼠实验性牙周炎牙周组织的破坏,可能与牙周组织中IL-6、OPG、RANKL表达增加,IL-10表达下降有关。实验二尾静脉高压注射hIL-10质粒对去卵巢大鼠实验性牙周炎发生的影响目的探讨全身性hIL-10基因治疗对去卵巢大鼠骨代谢、牙槽骨吸收的影响及其机制。方法将96只3月龄雌性SD大鼠随机分成4组,每组24只。1:SHAM+hIL-10组;2:SHAM+VECTOR;3:OVX+hIL-10组;4:OVX+VECTOR组。术后即刻将各组大鼠随机分成3小组,分别于术后12w、14w、18w,予以丝线结扎左侧上颌第二磨牙,建立实验性牙周炎模型。术后12w起,每周给予尾静脉加压注射hIL-10质粒(1、3两组)或空载体质粒(2、4两组)一次。丝线结扎后2w,处死大鼠。观察所表达的hIL-10对大鼠体重、骨密度、血清生化指标、牙槽骨吸收和牙周组织细胞因子表达的影响。结果尾静脉高压注射hIL-10质粒可在血清中表达,抑制血清TNF-α和TRAP 5b的升高(P﹤0.05)。但在牙周膜中IL-10表达量较少,与空载体组差异不显著;大鼠牙周膜的IL-1β和TNF-α阳性细胞数目不同程度地减少(P﹤0.05)。结论尾静脉高压注射hIL-10质粒并不能抑制去卵巢大鼠实验性牙周炎的牙槽骨吸收,对牙周膜IL-1β和TNF-α有抑制作用,对其他细胞因子的影响不明显。实验三局部转染hIL-10基因对去卵巢大鼠实验性牙周炎发生的影响目的观察口腔粘膜注射hIL-10质粒对大鼠骨代谢、牙槽骨吸收的影响及其机制。方法将24只3月龄雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分成4组,每组6只。1:SHAM+hIL-10组;2:SHAM+VECTOR组。假手术后12w,丝线结扎1、2组大鼠的左侧上颌第二磨牙(SHAM+hIL-10+EP),右侧不结扎作为对照(SHAM+hIL-10+C)。3:OVX+hIL-10组;4:OVX+VECTOR组。卵巢切除后12w,丝线结扎3、4组大鼠的左侧上颌第二磨牙(OVX+hIL-10+EP)。同时,在组1大鼠的双侧上颌第二磨牙腭侧牙龈粘膜下和组3大鼠左侧上颌第二磨牙腭侧牙龈粘膜下注射5μg hIL-10质粒和5μl脂质体复合物;在组2大鼠的双侧上颌第二磨牙腭侧牙龈粘膜下和组4大鼠的左侧上颌第二磨牙腭侧牙龈粘膜下注射5μg空载体质粒和5μl脂质体复合物。隔天注射1次,第7次注射后的24小时,处死大鼠。观察所表达的hIL-10对大鼠体重、骨密度、血清生化指标、牙槽骨吸收和牙周组织细胞因子表达的影响。结果hIL-10基因编码的蛋白可在牙周组织中表达;表达的IL-10蛋白可抑制牙槽骨吸收和根分叉区牙周膜IL-1β、IL-6、TNF-α、RANKL、MMP-8的表达。结论局部注射hIL-10质粒可抑制去卵巢大鼠实验性牙周炎的牙槽骨吸收,可能与牙周组织促炎因子的表达下降有关。

全文目录


英文缩略词表  5-6
中文摘要  6-8
Abstract  8-12
实验一 细胞因子在去卵巢大鼠实验性牙周炎牙周组织中的表达  12-32
第二部分 尾静脉高压注射 hIL-10 质粒对去卵巢 大鼠实验性牙周炎发生的影响  32-51
第三部分 局部转染 hIL-10 基因对骨质疏松大鼠牙实验性 周炎发生的影响  51-65
全文总结  65-66
参考文献  66-74
综述  74-98
  参考文献  83-98
个人简历  98-99
致谢  99-100

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中图分类: > 医药、卫生 > 口腔科学 > 口腔内科学 > 牙周病
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